Вивчення впливу селенсодержащих з'єднань на системну гемодинаміку і мозковий кровотік






    Головна сторінка


:)



Скачати 220.49 Kb.
Дата конвертації01.12.2017
Розмір220.49 Kb.
Типдипломна робота
:)

ЗМІСТ

ВСТУП

ГЛАВА 1 ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ

1.1 Сучасні уявлення про механізми регуляції мозкового кровотоку

1.2 Роль селену в організмі

1.3 Фармакологічна характеристика селенсодержащих з'єднань

ГЛАВА 2 Матеріали та методи дослідження

2.1 Вивчення гострої токсичності

2.2 Реєстрація мозкового кровотоку методом водневого кліренсу

2.3 Реєстрації параметрів кардіогемодинаміки за допомогою комп'ютерах терной програми «Bioshell» на стережуть тварин

2.4 Методика оцінки поведінки тварини в тесті «відкрите поле»

2.5 Оцінка координації рухів

2.6 Методика умовного рефлексу пасивного уникнення (УРПУ)

2.7 Методи вивчення протигіпоксичну активності

2.8 Методика відтворення постішеміческіх цереброваскулярних феноменів

2.9 Умови експериментальних досліджень

2.10 Статистична обробка даних

ГЛАВА 3 ВПЛИВ селеніту натрію І Селеніти ЦИНКУ НА ЦЕРЕБРАЛЬНУ ГЕМОДИНАМІКУ, СИСТЕМНЕ артеріальний тиск І ЧАСТОТУ серцевих скорочень УМОВАХ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ НОРМИ

3.1 Вивчення гострої токсичності досліджуваних сполук

3.2 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на мозковий кровотік

3.3 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень у решти щурів

ГЛАВА 4 ВПЛИВ селеніту натрію І Селеніти ЦИНКУ НА ПСИХОНЕВРОЛОГІЧНИЙ СТАТУС ТВАРИН В УМОВАХ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ НОРМИ

4.1 Вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на пізнавальну, рухову і емоційну активність

4.2 Вивчення впливу досліджуваних сполук на процеси пам'яті і навчання

4.3 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на координацію рухів

ГЛАВА 5 ВИВЧЕННЯ протигіпоксичну АКТИВНОСТІ досліджуваних сполук І ЇХ ЕФЕКТИВНОСТІ В УМОВАХ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНИХ РОЗЛАДІВ

5.1 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість тварин до гіпоксичної гіпоксії

5.2 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість тварин до циркуляторної гіпоксії мозку, викликаної білатеральної оклюзії загальних сонних артерій

5.3 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість тварин до тотальної ішемії мозку, викликаної критичними гравітаційними перевантаженнями

5.4 Вплив досліджуваних сполук на мозковий кровотік у наркотізірованних білих щурів в умовах глобальної ішемії мозку

5.5 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на артеріальний тиск і опір мозкових судин в умовах експериментальної патології

ГЛАВА 6 ВИВЧЕННЯ психотропної активності селеніту натрію І Селеніти ЦИНКУ В УМОВАХ ТОТАЛЬНОЇ ІШЕМІЇ МОЗКУ

6.1 Вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на психоневрологічний статус білих щурів, які зазнали впливу гравітаційних перевантажень (профілактичне введення)

6.2 Вивчення терапевтичної дії досліджуваних сполук на психоневрологічний статус тварин, які зазнали впливу гравітаційних перевантажень

ВИСНОВОК

ЗАГАЛЬНІ ВИСНОВКИ

СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ

Список використаних скорочень

GPX (ГЛП) - глутатионпероксидаза

АТ - артеріальний тиск

АХ - ацетилхолін

ГАМК - гамма-аміномаслянная кислота

МК - мозковий кровотік

НМК - порушення мозкового кровообігу

НТ - нейротрансмітери

САД - системний артеріальний тиск

СБ - селенсодержащіе білки

СТС - сигнал-трансдукторние системи

ЦНС - центральна нервова система

ЧСС - частота серцевих скорочень

КА - катехоламіни


ВСТУП

Незважаючи на досягнуті успіхи практичної кардіології в боротьбі з виникненням і наслідками серцево-судинної патології проблема фармакологічної корекції кардіологічних захворювань залишається однією з актуальних проблем медицини. У структурі серцево-судинних захворювань одне з провідних місць займають судинні ураження мозку [1].

Останнім часом в практиці лікування хворих з порушеннями мозкового кровообігу набули широкого поширення антиоксиданти. Застосування антиоксидантів використовується в терапії ішемічного інсульту з метою оптимізації окислювально-відновлювальних процесів. У проведених експериментальних і клінічних дослідженнях високу антиоксидантну активність показав селенит натрію [2].

За даними С.М. Миколаєва селенит натрію охороняє міокардіальні клітини від руйнування, обмежує периинфарктную зону, зменшує розміри рубців [3]. М.Д. Савіної і А.Н. Кудріним виявлено антиаритмічний ефект селеніту натрію на експериментальних моделях аритмій [4]. Накопичено великий досвід застосування селенсодержащих з'єднань в якості харчових добавок [2].

Висока ефективність селеніту натрію пов'язана з його здатністю підвищувати активність GPX. Цей фермент сприяє накопиченню глутатіону, який припиняє або обмежує процеси ПОЛ і його поширення [5, 6, 7].

Однак дія селенсодержащих з'єднань на системний артеріальний тиск, мозковий кровотік досі не вивчено. З огляду на той факт, що селеніти є вираженими антиоксидантами, представляло інтерес вивчити їх вплив на показники системної гемодинаміки і оцінити доцільність застосування в якості нейропротекторів.

Мета роботи: вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на параметри системної і церебральної гемодинаміки та психоневрологічний статус тварин в умовах норми і експериментальної патології.

Завдання досліджень:

1. Вивчити вплив селеніту натрію і селеніту цинку на мозковий кровотік, системний артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень.

2. Вивчити вплив селеніту натрію і селеніту цинку на психоневрологічний статус тварин в умовах експериментальної норми:

- рухову активність і емоційні реакції щурів в тесті «відкрите поле»;

- пам'ять і здатність до навчання тварин в методиці пасивного уникнення;

- координацію рухів.

3. Вивчити протигіпоксичну активність досліджуваних сполук.

4. Вивчити вплив досліджуваних сполук на показники системної і церебральної гемодинаміки в умовах глобальної ішемії мозку.

5. Вивчити психотропну активність селеніту натрію і селеніту цинку в умовах тотальної ішемії мозку, викликаної критичними гравітаційними перевантаженнями.

Наукова новизна досліджень

В результаті проведеного дослідження вперше отримані дані, згідно з якими селеніт натрію і селеніт цинку викликають зниження мозкового кровотоку у наркотізірованних тварин. Тривале профілактичне введення селеніту натрію і селеніту цинку викликає зниження рівня емоційної тривожності. Гіпс натрію і селеніт цинку мають виражений антигипоксическим ефектом: підвищують стійкість тварин до гіпоксичної і циркуляторної гіпоксії. В умовах гострої судинної патології мозку селенит натрію і селеніт цинку знижують смертність тварин, підвищують рухову і дослідницьку активність, зменшують тривожність, покращують процеси навчання і пам'яті, координацію рухів. Попереднє введення селеніту натрію і селеніту цинку до ішемії мозку зменшує ступінь прояву фази гіперперфузії і гальмує розвиток фази невідновлення мозкового кровотоку

Практична значимість роботи

Отримані в експериментальних дослідженнях дані представляють теоретичний і практичний інтерес, оскільки розкривають невивчені ефекти селеніту натрію і селеніту цинку на мозковий кровообіг і психоневрологічний статус в умовах норми і при патологічних станах. У клінічному плані особливе значення має виявлена ​​нами здатність селеніту натрію і селеніту цинку зменшувати фазу гіперперфузії і гальмувати розвиток постішеміческого цереброваскулярного феномена невідновлення мозкового кровотоку. Обидва з'єднання представляють безсумнівний інтерес в якості засобів для корекції церебральних ишемий - найпоширенішого виду судинної патології мозку. Отримані результати про анксіолітичні і ноотропні ефект досліджуваних сполук дають обгрунтування для рекомендацій по їх раціональному використанню в комплексному лікуванні порушень мозкового кровообігу.

Впровадження результатів дослідження в практику

Результати дослідження знайшли відображення в інформаційному листі «Обгрунтування застосування селеніту натрію і селеніту цинку в комплексному лікуванні порушень мозкового кровообігу», і спрямовані для інформування лікарів МУЗ ЦМЛ м П'ятигорська, МУЗ ЦМЛ «Міська лікарня №2» м П'ятигорська, поліклініки №1 г . П'ятигорська, МУЗ КЦГБ р Кисловодська.

4. В умовах гострої судинної патології селенит натрію і селеніт цинку знижують смертність тварин, підвищують рухову і дослідницьку активність, зменшують тривожність, покращують процеси навчання і пам'яті, координацію рухів.

ГЛАВА 1 ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ

1.1 Сучасні уявлення про механізми регуляції мозкового кровотоку

Регуляція мозкового кровообігу давно є актуальною проблемою. Незважаючи на великий фактичний матеріал, накопичений з даної проблеми, питання про фізіологічні механізми лежать в основі регулювання мозкового кровообігу залишається відкритим. Мозок людини, складаючи лише 2% від загальної маси тіла, утилізує 20-25% споживаного організмом кисню. Кровообіг в головному мозку не можна розглядати ізольовано від кровообігу всього організму в цілому. У нерозривному зв'язку з МК знаходяться такі параметри, як системний артеріальний тиск (САТ), загальний периферичний опір судин, центральний венозний тиск, об'єм циркулюючої крові і т.д. Кровопостачання мозку характеризується наявністю оптимального режиму, що забезпечує в процесі життєдіяльності безперервне і своєчасне поповнення його енергетичних та інших витрат. Це досягається послідовним включенням ряду факторів, що призводять в дію механізми саморегуляції мозкового кровообігу [8, 9, 10, 11, 12].

Регуляція мозкового кровотоку вкрай складна. З літератури можна зробити висновок, що в регуляції бере участь кілька взаємопов'язаних регуляторних контурів, кожен з яких може функціонувати самостійно. Дія їх направлено на підтримку в певних межах хімічного складу тканини мозку (а відповідно і оптимальних режимів харчування) і регуляції фізичного статусу мозкової тканини (її обсягу, кількості рідини і т.д.). Виділяють 4 регуляторних контуру: нейрогенний, гуморальний, метаболічний і міогенний [13, 14, 15].

Роль нервової системи

В даний час вважається загальновизнаним активну участь нервової системи в регуляції мозкового кровообігу. Результати морфологічних досліджень показали наявність в стінках мозкових судин адренергічної і холінергичеськой іннервації.

Симпатичну іннервацію судини головного мозку отримують від вузлів шийного відділу симпатичного прикордонного стовбура, включаючи зірчастий ганглій [15, 16, 17, 18].На різних тварин було встановлено, що роздратування шийних і хребетних нервів викликає звуження судин мозку і зменшення мозкового кровотоку. У ряді досліджень показано важливе значення клітин синьої плями, яке представляє собою основне норадренергической освіту мозку. У них виявлено високий вміст катехоламінів [19, 20].

Важливе значення в регуляції МК має холинергическая система. Парасимпатичні волокна відходять від лицьового нерва і колінчастого ганглія, приєднуючись до синокаротидних сплетіння, проникають в порожнину черепа [9]. Холінергічні сплетення виявлені в адвентиції артерій і піальних судин. Гистохимические дослідження показали, що волокна симпатичних і холінергічних нервів слідують поруч, утворюючи єдине термінальне сплетіння [21, 22, 23, 24].

Роль парасимпатичної системи в регуляції мозкового кровообігу неоднозначна. Дослідження показали суперечливі результати. При стимуляції парасимпатичних нервів і введенні ацетилхоліну виявили розширення судин мозку, яке знімалося атропіном. Активне розширення піальних артерій у відповідь на зниження системного артеріального тиску усувається внутрішньовенним введенням атропіну. Тоді як стимуляція холінергічних гілок великого кам'янистого нерва не приводила до зміни тотального мозкового кровотоку [25].

Особливий інтерес представляє вивчення ролі аортальних і каротидних рефлексогенних зон, що містять баро-і хеморецептори в регуляції мозкового кровообігу. У ряді досліджень [26, 27, 28, 29] активація каротидних барорецепторів підвищенням тиску в каротидному синусі або електрична стимуляція сінокаротідних нервів викликали розширення судин мозку паралельно зниженню артеріального тиску. У відповідь на включення каротидних барорецепторів пережатием загальної сонної артерії або денервации каротидних зон - судини звужувалися, і артеріальний тиск підвищувався. Інші дослідники [30] спостерігали протилежні реакції судин. Поряд з холінергічної іннервації мозкових судин сучасні дослідники виявили наявність пуринергічні і пептідергіческіх нервових волокон в стінках мозкових судин [31]. В артеріях головного мозку знайдено моноаміноаціти (огрядні, хромафінними клітини, меланофори), які функціонально пов'язані в єдину систему біологічних регуляторів [32].

Дослідження останніх років [33] підтверджують важливу роль стовбура мозку в забезпеченні адекватного церебрального кровотоку. Показані порушення регуляції кровотоку в експерименті при руйнуванні стовбурових і спінальних шляхів [34]. Роль нервового компонента в місцевих судинних реакціях головного мозку була показана Ю.А. Москаленко і його співробітниками [13, 26, 35, 36, 37].

В даний час була узагальнена велика група хімічних передавачів сигналів між нейронами і від нейронів на ефекторні клітини отримала назву нейротрансмітери (НТ). Саме НТ створюють можливість об'єднання окремих нейронів у цілісний головний мозок і дозволяє йому успішно виконувати всі його різноманітні і жізненонеобходімие функції.

Нейротрансмітери ділять на нейромедіатори - прямі передавачі нервового імпульсу, що дають пускові ефекти (зміна активності нейрона, скорочення м'язи, секрецію залози), і нейромодулятора - речовини модифікують ефект нейромедіаторів. Співвідношення концентрації і активності нейромедіаторів визначає функціональний стан більшості постсинаптичних клітин. Нейромодулятора зазвичай діють більш локально в певних зонах мозку [38, 39].

Більшість НТ синтезується в нейронах. Потім вони транспортуються в везикули в обмін на накопичені там Н + (акумуляція протонів в везикулах здійснюється особливою Н + -АТФази за рахунок енергії АТФ). Ці везикули розташовані в нервовому закінченні, НТ зберігаються в них в високих концентраціях (до 100-500 мМ). Коли поширюється по нерву потенціал дії приходить в зону везикул, він відкриває потенціалзалежні Са 2+ -канали, іони Са 2+ входять в нервові клітини, що призводить до викиду їх з НТ в синапс.

Розрізняють збуджують і інгібуючі, або гальмують НТ. Ефекти перших переважають в стані неспання і високої функціональної активності, друге - в спокої і особливо під час спокійного сну без сновидінь. За хімічною структурою НТ можна розділити на 5 класів: амінокислоти, аміни і їх похідні, нейропептиди, нуклеозиди та нуклеотиди, стероїди. Останні 2 класу поки представлені єдиними речовинами [40, 41].

Всі НТ дифундують через синапс і на зовнішній стороні плазматичної мембрани постсинаптичні клітини зв'язуються зі специфічними рецепторами. НТ не потрібно проникати через мембрану клітини, всередину клітини надходить не сам НТ, а сигнал, що виникає при зв'язуванні НТ з рецептором. Сприйняття, перетворення, посилення і передачу сигналу всередину клітини і потім всередину її органел здійснюють сигнал-трансдукторние системи (СТС). Рецепторами нейромедіаторів є регуляторні субодиниці швидких іонних каналів (Na + - або Сl -) - це іонотропние рецептори. Ефекти нейромодуляторов реалізуються більш складними СТС, що включають рецептори, ГТФ-залежні G-білки, мембранні ферменти, Ca 2+ - або К + - канали, другі посередники і їх білкові рецептори (найчастіше протеїнкінази) - це метаботропние рецептори. Різні механізми реалізації сигналів визначають тимчасові відмінності: нейромедіатори діють за час нервового імпульсу - мілісекунди (швидкі відповіді клітин), модулятори - за секунди або хвилини, такі ефекти називаються повільними.

Головні медіатори головного мозку - амінокислоти. До збудливим відносяться глутамат і аспартат. При звільненні в синапс вони через іонотропние рецептори відкривають швидкі натрієві канали, що призводить до швидкого входу в постсинаптичні нейрон іонів натрію. Це деполяризує плазматическую мембрану і викликає збудження нейрона. Збуджуючі амінокислоти необхідні для всіх функцій мозку, включаючи підтримку його тонусу, неспання, психологічної та фізичної активності, регуляцію поведінки, навчання, пам'ять, сприйняття чутливих і больових імпульсів. Однак їх надлишок викликає важкі захворювання. Наприклад, надлишок глутамату призводить до судомних нападів. При ішемії в синапс виділяється так багато глутамату, що викликає надмірне накопичення іонів Ca 2+ в постсинаптическом нейроне і його перезбудження (нейротоксическое дію) - виникає інсульт [1, 41].

Ще один збудливий медіатор - ацетилхолін (АХ), який активує іонотропние N-холінорецептори з відкриттям тих же швидких натрієвих каналів. Через ці рецептори АХ бере участь у функціях базальних гангліїв головного мозку, пов'язаних з регулюванням рухової активності і м'язового тонусу.

Головний ингибирующий нейромедіатор головного мозку - гамма-аміномаслянная кислота (ГАМК). Утворюється з глутамату, зв'язується з ГАМК іонотропнимі ГАМК А рецепторами (субодиницями хлоридних каналів), що призводить до їх відкриття і швидкому входу в постсинаптичні нейрон іонів Cl -. Ці іони викликають гіперполяризацію і в результаті - гальмування нейрона

Амінокислота гліцин - особливий ингибирующий нейромедіатор спинного мозку. Він діє за аналогічним механізмом, а антагоністом його рецепторів є стрихнін. [36, 37, 38, 38, 40, 42, 43].

До нейромодуляторов відносяться всі нейромедіатори, але їх модулирующие ефекти реалізуються не через іонно, а через метаботропние рецептори. Ацетилхолін через М-холінорецептори включає 3 різні СТС, що знижує рівень цАМФ, відкриває К + - канали і викликає накопичення ліпідних друге посередників і потім іонів Са 2+. Через М-холінорецептори (їх в мозку більше ніж N-рецепторів) АХ стимулює утворення умовних рефлексів і пам'ять. Так при хворобі Альцгеймера характерна рання загибель холінергічних нейронів. Через ці рецептори АХ реалізує активність мотонейронів спинного мозку і регуляцію внутрішніх органів парасимпатичними нервами системи. ГАМК і її синтетичні агоністи через обидва типи рецепторів ГАМК А і ГАМК В - знижують активність головного мозку.

Існує велика кількість спеціалізованих нейромодуляторов. У головному мозку з прогестерону утворюються активують мозок нейромодулятора - нейростероідов. На відміну від більшості стероїдних гормонів вони діють не шляхом проникнення в ядро клітини і з'єднання з ядерними рецепторами, а в результаті активації ГАМК А - рецепторів нейронів [38, 41, 43].

Описані 3 типу СТС опосередковує дію і деяких інших інгібуючих модуляторів, в тому числі і поки єдиного нуклеозидного НТ - аденозину. Через свої А 1-рецептори він знижує концентрацію іонів Са 2+ в нейронах, що уповільнює вивільнення багатьох НТ, знижує тонус головного мозку, сприяє ранкової млявості [43, 44, 45].

Важливий клас нейромодуляторов - моноаміни: катехоламіни (КА) і індолілалкіламіни. КА синтезуються з амінокислоти тирозину, активність ключового ферменту синтезу тирозингідроксилази збільшується системою цАМФ - протеинкиназа А. КА забезпечують функціонування симпатоадреналової системи. Дофамін звільняється в основному в синапсах базальних ядер головного мозку, норадреналін - в стовбурі мозку і закінченнях симпатичних нервів. Дофамін - гальмівний модулятор, що знижує ефекти збудливого медіатора АХ [38].

Норадреналін викликає накопичення в клітині іонів Са 2+ (через α 1 -адренорецептори) і цАМФ (через β-адренорецептори). Активується ретикулярна формація стовбура, що тонізує головний мозок, включаючи кору великих півкуль.

Однак ті ж КА через α 2 -адренорецептори знижують концентрацію іонів Са 2+ і цАМФ, що призводить до зменшення виділення норадреналіну і інших НТ. ГАМК, аденозин і селективні антагоністи α 2 -адренорецепторів реалізують і іншу пристосувальну стратегію - толерантну. Для неї характерне зниження споживання кисню, температури тіла і катаболізму зі зменшенням активності головного мозку та інших фізіологічних систем. В результаті значно збільшується стійкість організму до багатьох екстремальних факторів.

Індолалкіламіни утворюються з амінокислоти триптофану: серотонін - в стовбурі головного мозку і ентерохромафінних клітинах кишечника, мелатонін - в епіфізі. Серотонін - знижує агресивність, страх, депресію, стимулює харчову поведінку, сон і знижує больові умовні рефлексу, сприяє навчанню та лідерства. Мелатонін переважно виробляється вночі і сприяє сну, гальмує виділення гонадотропних гормонів. Обидва індолалкіламіна знижують статеву активність [39].

Поряд з цим великі успіхи, досягнуті в останнє десятиліття у вивченні синаптичних молекул дозволяють виділити групу атипових трансмиттеров або нейрональних Мессенжер. До таких сполук відносять газ - оксид азоту (NO), цинк, що виконує функції антагоністичного котрансміттера NMDA-рецепторів, а також локалізований в гангліальних клітинах d-серин, що є ендогенним лігандом місця зв'язування гліцину, що входить до складу NMDA-рецепторного комплексу [36, 37 , 38, 38, 40, 44, 45, 46].

Метаболічна, міогенна і гуморальна регуляція

Миогенная регуляція мозкового кровотоку здійснюється за рахунок зміни внутрішньоартеріального тиску і прямий відповідної реакції м'язів судинної стінки у вигляді звуження артерій при його підвищенні або їх розширення при його зниженні (феномен Остроумова - Бейлісс). Дія цієї реакції короткочасно [26, 36].

Важливою особливістю головного мозку є його висока метаболічна активність. При ураженнях головного мозку порушення кровообігу призводять до зв'язаних змін метаболічних процесів незалежно від характеру шкідливого впливу - травми, компресії, гіпоксії мозку. Порушення кровообігу і метаболізму мозку розвиваються в певній послідовності - накопичення лактату, тканинної ацидоз, параліч вазомоторов, порушення ауторегуляції, порушення регуляції внутрішньочерепного тиску, зникнення реакції церебральних судин на зміну концентрації вуглекислого газу, втрата контролю метаболізму, розвиток набряку мозку.

Активним чинником, що впливає на судинну стінку, є напруга вуглекислоти в артеріальній крові.Механізм дії СО 2 на судини мозку вивчений в роботах багатьох авторів [27, 32, 47].

Величина просвіту артерій залежить від напруги СО 2 в капілярах і тканинах, концентрації іонів Н + в околососудістого просторі і напруги О2. Підвищення напруги СО 2 викликає виражену дилатацію судин. Так, при підвищенні рСО 2 вдвічі мозковий кровотік також подвоюється. Дія СО 2 опосередковано відповідним збільшенням концентрації Н +, що утворюються при дисоціації вугільної кислоти. Інші речовини, при накопиченні яких збільшується концентрація іонів водню, також підсилюють мозковий кровотік. Зменшення напруги кисню викликає розширення судин, а збільшення - звуження. Однак вплив ро2 на просвіт судин нижче, ніж вплив рСО 2. Вплив вуглекислоти на церебральну гемодинаміку пояснюється або безпосереднім впливом на судинну мережу, розташовану поблизу артеріального кінця капілярів [44, 48, 49], або змінами рН цереброспинальной рідини, що оточує артериолу.

Багато авторів вважають, що дія СО 2 на судини мозку реалізується за допомогою нервових механізмів [29, 45, 46]. Істотна роль в механізмі дії СО 2 відводиться також місцевим нервовим механізмам [21, 24, 47]. Реакція мозкового кровотоку на гиперкапнию слабшає при гіпотензії, ішемії мозку [48, 49, 50, 51, 52]. Цей ефект пояснюють дилатацією артерій під дією накопичилися в умовах патології кислих продуктів метаболізму і зменшенням резервних можливостей для їх подальшого розширення [53, 54].

Вплив кисню на цереброспинального кровопостачання виражена слабше в порівнянні з СО 2. Однак гіпероксія і надлишкова оксигенація крові ведуть до звуження судин мозку, а гіпоксія навпаки викликає дилатацію і збільшення церебрального кровотоку [55, 11, 44, 18]. Вважають, що вазоконстрикторное реакція при гіпербаричної оксигенації носить пристосувальний характер, захищаючи мозок від проникнення в нього надлишкового кисню [48, 56].

В процесі адаптації судинного тонусу мозку до гіпоксії передбачається участь тканинного метаболізму шляхом збільшення анаеробної передачі продукції АТФ в гладких м'язах мозкових судин [53, 57].

У літературі є дані про участь іонів К + і Н + в регуляції тонусу судин мозку [58, 44, 53, 59, 60]. Біохімічні дослідження [44] свідчать про те, що під впливом Са 2+ інтенсивність споживання кисню і величина дихального контролю мозку підвищуються, в той же час збільшення концентрації іонізованого Са 2+ в розчинній цитоплазмі забезпечує метаболічні ефекти синаптичної передачі нервових імпульсів. Іони Са 2+ є важливим компонентом судинної стінки, що запускає скорочувальний м'язовий механізм. Концентрація Са 2+ впливає на діаметр піальних артерій: збільшення її призводить до їх звуження, а зниження до розширення цих судин [61].

До метаболічних факторів регуляції мозкового кровотоку відносяться зрушення газового складу крові, напруги в ній кисню, вуглекислоти [25, 62, 63]. Зміни газового складу крові змінює рН середовища, що оточує судини [64], викликає зрушення концентрації різних вазоактивних речовин [65, 66].

При різних змінах системної гемодинаміки роль даного механізму унікальна.

Монооксид азоту утворюється в ендотелії судин, сприяє розширенню мікросудин і є постійним регулятором мікроциркуляції. Згідно з даними [67], велика кількість цієї речовини утворюється в ендотелії капілярів. Пригнічення його синтезу істотно змінює швидкість кровотоку в капілярах м'язів. Передбачається, що пригнічення синтезу монооксиду азоту в ендотелії після важкої ішемії веде до масової адгезії нейтрофілів до стінок мікросудин і до погіршення або припинення їх «прохідності» для крові.

У регуляції МК виявляють себе гуморальні механізми, які поділяють на 2 групи: 1 - гормони, що виробляються нервовими закінченнями залізистих і огрядних клітин, дія яких спрямована на тонус прилеглих судин; 2 - гормони, що виробляються спеціалізованими органами внутрішньої секреції [68]. Гуморальні фактори мають виражені вазоактивними властивостями. Брадикинин викликає у людини церебральну дилатацію і збільшення кровотоку [69].

Під впливом ацетилхоліну в дослідах описано як розширення, так і звуження піальних артерій [22, 70, 71, 72, 73]. Аплікація серотоніну на поверхню мозку викликає тривалу констрикцию великих піальних артерій [11, 23, 56, 74] за рахунок переважного дії на Д-рецептори судинної стінки. Відзначено двофазне дію дофаміну - первинне звуження з подальшою дилатацією [11, 75, 76, 77]. Важлива роль належить b-адренорецепторів в регуляції тонусу судин і метаболізму мозку у людини [73, 78]. Встановлено регіональні відмінності в розподілі a- і b-блокатори в судинах мозку. Каротидная артеріальна система більш чутлива до норадреналіну, ніж хребетна [11, 21]. Простагландини викликають неоднозначні реакції на внутрішньо-і позачерепні судини. Теорія, яка пояснює багатосторонні дії простагландинів засновані на здатності їх впливати на синтез циклічних нуклеотидів, головним чином цАМФ [11, 79].

Метаболізм головного мозку носить аеробний характер і для забезпечення життєдіяльності та анатомічної цілісності його структури мозку необхідно до 20% всієї циркулюючої крові і 25% всього кисню. Цим визначається такий високий кровотік, високий рівень споживання кисню, багаторівнева, дубльована система регуляції мозкового кровообігу і механізми компенсації при ураженні одного або кількох басейнів кровопостачання. При повному припиненні надходження кисню і глюкози, внаслідок порушення кровотоку або при інших причинах через 1-3 секунди відбувається втрата свідомості, через 4-6 хвилин необоротна загибель мозку. Період 4-6 хвилин критичний. При цьому подальша перфузия не приводить до відновлення кровотоку на різних територіях мозку внаслідок перекриття капілярного відділу мікроциркуляторного русла. Переміщення крові відбувається з областей мозку, менш активних в функціональному відношенні, в області з інтенсивною діяльністю. Величина локального кровотоку в цей час значно підвищується в одних областях, знижуючись одночасно в інших на тлі стабільного або, рідше, кілька збільшеного кровотоку в мозку в цілому. Але цей критичний період в 4-6 хвилин може розширюватися до десятків хвилин при переохолодженні та наявності в організмі седативних речовин (барбітурати, нейролептики, транквілізатори). Слід зазначити, що при падінні парціального тиску кисню нижче 65 мм рт.ст. порушується синтез медіаторів і починаються зміни свідомості [80]

1.2 Роль селену в організмі

Селен є есенціальним мікроелементом для людини і тварин. Він є одним з біологічно важливих мікроелементів, присутніх в організмі людини і беруть участь в метаболічних, біофізичних і енергетичних реакціях організму, що забезпечують життєздатність і функції клітин, тканин, органів і організму в цілому. Особливо важлива роль селену для функціональної активності таких органів як серце, печінка, нирки та ін.

Селен - елемент 4 групи головної підгрупи періодичної системи Менделєєва, багато в чому повторює хімічні властивості сірки. Селен здатний заміщати сірку в сірковмісних амінокислотах з утворенням селеноамінокіслот, які активніше в біологічному відношенні, і є більш сильними протекторами іонізуючої радіації, ніж сірковмісні амінокислоти. Крім того, селеноамінокіслоти сприяють зменшенню кількості вільних радикалів, що порушують активність і властивості ферментів і амінокислот [81, 82, 83].

Селен надходить в організм людини з грунту з продуктами рослинництва і тваринництва, що визначає залежність рівня забезпеченості мікроелементом від геохімічних умов проживання.

Однак не весь селен грунту доступний для рослин. Так, в кислих, сильно заболочених грунтах біодоступність мікроелемента низька, хоча загальний вміст може бути і значним [83].

З урахуванням того, що оптимальний рівень споживання селену, відповідний максимальної активності глютатіонпероксидази (GPX) тромбоцитів або змістом селену в сироватці крові 115-120 мкг / л, становить 120 мкг / сут, встановлені концентрації селену відповідають помірної забезпеченості населення мікроелементом на більшості досліджених територій, причому ні в одному з регіонів не зареєстровані випадки глибокого дефіциту селену - вміст у сироватці крові менше 50 мкг / л. У Росії середні концентрації селену в сироватці становлять від 62 мкг / л на заході, до 145 мкг / л на сході [81, 84, 85].

У рослин найважливішою хімічної формою селену є селенометіонін. Велика частина селену в тваринних тканинах присутній у вигляді селенометіоніна і селеноцистеїну [86].

Біохімічні функції селену визначають селенсодержащіе білки (СБ). Недолік мікроелемента може призводити до порушення клітинної цілісності, зміни метаболізму тиреоїдних гормонів, активності біотрансформуються ферментів, посилення токсичної дії важких металів, підвищення концентрації глютатіону в плазмі [87, 88].

Характерною особливістю СБ ссавців є те, що вони, мабуть, пов'язані з окисно-відновними процесами, що проходять всередині клітини і поза нею [89]. До теперішнього часу охарактеризовані 12 СБ, що містять в активному центрі селен [90].

- GPX1 (cCPX) - клітинна глутатионпероксидаза - передбачається її наявність у всіх клітинах організму ссавців, мабуть використовується як Селеновіт депо, антиоксидант.

- GPX2 (CPX-СІ) - локалізується в клітинах епітелію шлунка

- GPX3 (рCPX) - міжклітинна GPX або GPX плазми, контролює рівень перекисів поза клітиною, функція ферменту не з'ясована, проте показано, що активність рCPX відновлюється швидше, ніж cCPX, що може говорити про більшу значимість цього ферменту.

- GPX4 (РНCPX) - фосфолипид, локалізується в основному в сім'яниках, проте знайдений в мембранах, цитозолі. Відновлює гідроперікісі холестерину, його ефірів, фосфоліпідів, грає важливу роль в репродуктивній системі чоловіка [91].

- ID - група 3 оксидоредуктаз, регулюють активність тироксину. В експериментах на тваринах показано, що одночасний дефіцит селену і йоду призводить до сильнішого гіпотиреоїдизмі, ніж дефіцит одного йоду. Деякі автори припускають, що кретинізм у новонароджених може бути наслідком комбінованого дефіциту цих 2 елементів у матері [87].

- ID1 - фермент, бере участь у метаболізмі тироксину і трийодтироніну. Це мікросомальний фермент локалізований в печінці, нирках, щитовидній залозі та ЦНС.

- ID2 - каталізує перетворення тироксину в трийодтиронін

- ID3 - дезактівурует тироксин і трийодтиронін, локалізована в ЦНС, шкірі, плаценті. Бере участь у метаболізмі енергії [92].

- TR ссавців - основна функція - каталізує NADPH - залежне відновлення в цитоплазмі.

- SPS2 - фермент, каталізує АТФ-залежну активацію селену з утворенням селенофосфата.

- SelP - глікопротеїн, може виконувати роль антиоксиданту і селенового депо. Швидко синтезується при введенні селенових добавок. Бере участь в дезактивації важких металів.

- селенопротеіни W (SelW) - міжклітинний білок, присутній в багатьох тканинах переважно в м'язах і мозку. Передбачається його участь в окислювально-відновлювальних реакціях, вплив на розвиток онкологічних захворювань.

Дані ізотопного аналізу і результати теоретичних досліджень дозволяють припускати, що в організмі ссавців може налічуватися від 20 до 100 СБ [93].

Підвищення захворюваності на рак та серцево-судинними захворюваннями при дефіциті селену, безпліддя у чоловіків і збільшення ризику смерті від СНІДу можуть бути пов'язані зі зниженням біосинтезу СБ і порушенням відповідних біохімічних процесів [81].

Відповідно до сучасних уявлень, загальною регульованою формою селену в організмі є селенід, який утворюється з селеноцистеїну під дією Sec-β-ліази [94, 95].Попередником селеноцистеїну може бути селенометіонін. Неорганічний селен (селеніт) реагує з відновленою формою глутатіону (GSH) також з утворенням селеніду [96]. Останній частково включається в біосинтез СБ і тРНК в результаті реакції з селенфосфатсінтетазой (SPS), частково екскретується з організму переважно у вигляді метильованих форм з сечею і диханням [97, 98]. Фосфорилювання селеніду здійснюється за участю АТФ [99]. Регулювання реакції фосфорилювання селеніду визначає можливість депонувати селен - явище, що спостерігається при дефіциті мікроелемента. Пригнічення реакції призводить до збільшення концентрації селеніду і як наслідок, до збільшення екскреції селену. Ця ситуація спостерігається, коли селен доступний в кількостях більших, ніж необхідно для синтезу селенопротеїни [100, 101].

Абсорбування селену організмом відбувається в тонкій кишці, серед сегментів якої трохи більшу швидкість транспорту забезпечує дванадцятипала кишка, звідки низькомолекулярні форми селену здатні перейти в кров уже через 1 хвилину після надходження в кишку [102]. Абсорбція селеніту натрію відбувається відмінно від органічних сполук. Експериментальні дані вказують на те, що селен вступає в неферментативне реакцію з GSH з утворенням селенідіглутатіона [103], який може служити субстратом для γ-глутамілтрансферази та таким чином переноситься через мембрани клітин. Оскільки селеновий статус експериментальних тварин майже не впливає на величину абсорбування вводиться селеніту [103], слід припустити, що для цього з'єднання регуляторний механізм абсорбції відсутня. Кількість і розподіл СБ в органах і тканинах ссавців залежить від специфіки їх експресії, селенового статусу організму, тривалості прийому селену і хімічної форми селену в раціоні [104].

При дефіциті селену рівень СБ знижений, проте включення мікроелемента здійснюється в першу чергу в найбільш важливі білки і тканини - репродуктивні і ендокринні органи, мозок. Скелетні м'язи і серце забезпечуються селеном повільніше [99]

M. Wenzel і співавт. (1971) визначили біологічні напівперіоди існування селену в тканинах. Зокрема, для м'язів цей термін склав 100 діб, для печінки - 50 діб, нирок - 32 діб і для сироватки крові - 28 діб.

В умовах виходу з селендефіцітного стану активність GPX-GI досягає максимуму вже через 10 годин після початку введення селену, тоді як активність cGPXначінает зростати тільки через 24 години і не досягає максимуму навіть через 3 дня [105].

Гомеостатическое регулювання рівня селену в різних органах і тканинах призводить до того, що при введенні високих доз селену рівень СБ перевищує досягається при адекватному споживанні. У людини активність pGPXдостігает максимуму при споживанні всього 50 мкг селену на добу [106].

При введенні селеніту натрію тваринам у високих дозах не спостерігали збільшення активності ферменту, незважаючи на значне зростання концентрації мікроелемента в плазмі і еритроцитах, але відзначали навіть деяке його зниження [107].

При зниженні загального вмісту селену в плазмі і еритроцитах збільшується частка PHGPX, а в еритроцитах зростає рівень сGРХ і гемоглобіну [108].

Після введення радіоактивного селену значна його частина зв'язується білками плазми крові. При цьому виявилося, що еритроцитів в даному процесі належить провідна роль, так як 75 Se у вигляді селеніту надзвичайно швидко, в межах декількох секунд проникає через їх мембрани [McMurray CH, Davidson W., 1974]. Вже через 1-2 хвилини в еритроцитах концентрується 50-70% всього селену крові. На моделі in vitro показана тимчасова залежність перерозподілу селену між елементами крові. Є підстави вважати, що до 4 хвилині концентрація мікроелемента досягає максимуму. Потім протягом 15-20 хв майже весь селен виходить з еритроцитів, зв'язуючись спочатку з альбумінами, а потім з глобулінами плазми крові [81, 109].

В еритроцитах присутній селеновий «насос» у людини і ряду тварин [Wright PL, Bell MC, 1963; KJ, Hidiroglou M. 1972; Sandholm., 1975]. Під впливом системи глутатіон - глутатионпероксидаза селенит піддається перетворенню з утворенням комплексу селену з глутатионом. При последущем відновленні селен каталізує транспорт електронів до кисню. Вийшовши з еритроцита, можливо, в складі селеноглутатіонового комплексу, цей мікроелемент фіксується в білках плазми. Крім того, знижена активність глутатіонпероксидази в еритроцитах, мабуть, сприяє утворенню окислювальних форм білків, наприклад гемоглобіну (HbSSG). Дефіцит селену може призводити до гемолізу еритроцитів [109].

У сполук селену виявлена ​​різна біодоступність. Встановлено, що селен, що міститься в більшості досліджених сполук має меншу біодоступністю порівняно з селеніту натрію [110].

Селен виводиться з організму в основному з сечею, фекаліями і повітрям, що видихається (часниковий запах). Серед шляхів виведення домінуючим є перший, а останній характерний при гострому і хронічному отруєнні. При токсикозах альтернативним шляхом виведення селену можна вважати його накопичення в волоссі і нігтях [100].

Концентрація селену в сечі протягом доби значно змінюється, проте велика частина вводиться селену виводиться протягом 24 годин [101], що дозволяє використовувати цей показник як критерій забезпеченості селеном, тому що він добре корелює з рівнем споживання цього мікроелемента. Зазвичай цим шляхом виводиться близько 40-50% споживаного селену, проте в деяких випадках ця величина може досягати 60%. Залежно від вживаної дози концентрація селену в сечі може варіювати від 0,9 мкг / л (ендемічні зони Китаю) до 3900 мкг / кг (Венесуела) [111].

Фактором, що впливає на рівень виведення, є хімічна форма селену. Зазвичай неорганічні солі легше виводяться з організму, що робить їх більш безпечними при споживанні, ніж органічні сполуки. Є дані, що свідчать про низький рівень виведення органічних форм селену і, отже, про найбільшу небезпеку отруєння при споживанні аномально високих доз [112].

У здорових добровольців в навантажувальні тести при щоденному двократному збільшенні рівня споживання мікроелемента прийом селеніту натрію в дозах 100 - 800 мкг / сут. призводить до активної екскреції надлишку селену з сечею, що досягає 80-90% від величини споживання.

При прийомі препаратів органічного походження межа виведення селену з сечею досягається при дозі 400 мкг / кг [81, 113].

Дефіцит селену викликає ряд ендемічних захворювань у людини і тварин. «Беломишечная» хвороба (аліментарна м'язова дистрофія) характеризується осередкової дегенерацією різного ступеня тяжкості і некрозом скелетної та серцевої м'язів незапального характеру, вона попереджається включенням в раціон селену [81]. Патоморфологічні зміни при цьому захворюванні характеризуються глибокими порушеннями скелетних м'язів і міокарда. Зокрема, спостерігається строката патогістологічна картина за рахунок нерівномірного повнокров'я, дистрофічних і некробіотичні змін кардіоміоцитів, нерідко з явищами дистрофічного звапніння. На думку А.П. Авцина (1972), біле забарвлення м'язів обумовлена ​​зникненням міоглобіну і вторинним коагуляційний некрозом міоцитів. Зміни міокарда і скелетних м'язів мають дегенеративно-некробіотичні характер. Хвороба «Кеша» являє собою ендемічну фатальну кардиомиопатию, для якої характерні аритмії, збільшення розмірів серця, фокальні некрози міокарда, за якими слід серцева недостатність. У хворих, які страждають на цю хворобу виявляються аномалії мембран еритроцитів. В еритроцитах хворих дітей рівень селену, активність Na +, К + -АТФази, плинність ліпідів і їх мембран відрізняються від показників дітей контрольної групи, що проживають в тому ж регіоні [114, 115, 116, 117, 118, 119].

При проведенні в Фінляндії протягом 5 років епідеміологічних досліджень на 11000 чоловіків і жінок у віці 35-59 років було встановлено, що за цей період 252 перенесли інфаркт міокарда і 131 померло від серцево-судинних захворювань. У всіх випадках рівень селену склав 52 мкг / л, в контролі 55 мкг / л. Ряд робіт проведених в ще в 80-х роках продемонстрував, що при концентрації селену в сироватці нижче 0,4 мкмоль / л ймовірність виникнення інфаркту міокарда збільшується в 7 разів, а при вмісті 0,4-0,6 мкмоль / л - в 3 рази [120].

В іншому дослідженні, проведеному в тих же умовах, для групи померлих рівень селену склав 62 мкг / л. В контролі 68 мкг / л. Відносний ризик смерті при концентрації селену в плазмі менше 45 мкг / л склав 3.2 [121].

У районах Центральної Африки, дефіцитних одночасно по селену і йоду зареєстрований ендемічний мікседематоідний кретинізм [122].

Експериментальні та клінічні дослідження показали, що етіологія кістозного фіброзу підшлункової залози (муковісцидоз) обумовлена ​​дефіцитом ряду елементів, особливо селену, в перинатальному періоді. Це захворювання поширено серед дітей молодшого віку. Крім того, при дефіциті селену спостерігається аліментарний гепатоз - некротичні зміни печінки, обширний набряк і відкладення цероідного пігменту в жировій тканині і вогнищева і дифузна інфільтрація в кишечнику, шлунку, брижі і регіонарних лімфатичних вузлах - ідіопатична еозинофільна інфільтрація [81, 123].

Перші відомості про селен пов'язані з проявами його токсичності, зумовленої аномально високим споживанням. Виділяють кілька ступенів токсичності [124, 125].

Гостра токсичність проявляється при короткочасному споживанні високих доз селену і швидко призводить до смерті. Ознаки: часникове дихання, летаргія, надлишкове виділення слини, тремтіння м'язів, міокардит і т.д.

Подострая токсичність пов'язана зі споживанням високих доз селену протягом значного часу. Ознаки: сліпота, атаксія, дезорієнтація, утруднення дихання [125].

Хронічний селеноз розвивається при споживанні помірно-підвищеної кількості селену протягом декількох тижнів або місяців [114, 127].

Оцінка ступеня токсичності сполук селену для людини не може відсутністю селективного і чутливого індикатора надлишкового надходження селену в організм людини. Одним з можливих показників є алопеція і зміна нігтів, а також переважне накопичення селену еритроцитами в порівнянні з плазмою [115].

Безпечний і достатній рівень добового споживання селену становить 50 - 200 мкг / сут. Мінімальна потреба в селені встановлена ​​за даними для ендемічних регіонів Китаю: найменша величина споживання мікроелемента, при якій не спостерігалося розвиток хвороби Кеша, склала 19 і 14 мкг / сут для чоловіків і жінок відповідно [117].

Фізіологічна потреба в селені встановлена ​​за показником споживання, що забезпечує максимальну активність GPX плазми. Для жителів біогеохімічних провінцій Китаю з глибоким дефіцитом селену ця величина складає 40 мкг / сут [117]. Для європейців цей рівень становить 70 мкг для чоловіків і 55 мкг для жінок [127, 138].

У Фінляндії з урахуванням багаторічного досвіду використання збагачених селеном добрив передбачається значно вищий рівень споживання селену, що відповідає фізіологічної потреби, а саме 120 мкг / сут, цьому значенню відповідає максимальна активність GPX тромбоцитів [85].

При розрахунку РД (референт дози) виходячи з даних отриманих при вивченні ендемічного селеноз в Китаї беруть 853 мкг / добу при масі тіла 55 кг. Введення додаткового коефіцієнта (х3) для обліку індивідуальної чутливості дає значення 5 мкг селену на 1 кг маси тіла на добу, що відповідає 350 мкг / добу при масі тіла 70 кг [85, 111, 116, 128].

1.3 Фармакологічна характеристика селенсодержащих з'єднань

Біологічні функції селену величезні.Антиоксидантні властивості селену визначають перспективність використання препаратів мікроелемента при оксидантному стресі. Окислювальне пошкодження тканин грає ключову роль в розвитку багатьох захворювань: атеросклерозу, ішемічної хвороби серця, діабетичних ангіопатій, нейродегенеративних і аутоімунних захворювань, раку, променевої хвороби [129, 130, 131, 132], псоріазу [134], опіків [135], катаракти [136, 137] та ін. Для фармакологічної корекції окисного стресу широко використовуються антиоксиданти різної хімічної природи. На думку В.Г Зайцева, О.В. Островського, В.І. Закревського найбільші перспективи клінічного застосування мають представники груп каталізаторів і пасток радикалів. Антиоксиданти - каталізатори не витрачаються в ході захисних реакцій, а значить, можуть бути використані в значно менших дозах, ніж АТ інших груп. Їх ефект в організмі буде зберігатися більш тривалий час, а ймовірність побічної дії у них набагато менше. Крім того, поки немає даних про можливість прояву АТ даної групи прооксидантно дії в умовах близьких до фізіологічних. Найбільші перспективи в медичному застосуванні мають імітатори глутатіонпероксидази, до яких відносять селенсодержащіе з'єднання. Відомо, що ДП каталізує перетворення небезпечних для організмів гідропероксидів (ROOH) і Н 2 О 2 в інертні гідроксісоедіненія (RОН) і воду відповідно за участю глутатіону. Глутатионпероксидаза - перший селеносодержащіх фермент, знайдений в організмі ссавців. Фермент не володіє суворої специфічністю по відношенню до перекису і потребує як кофактора в глутатіону, який в ході ферментативної реакції піддається окисленню:

Н 2 О 2 + 2GSH → H 2 O + GSSG

ROOH + 2GSH → ROH + H 2 O + GSSG

У цій реакції електрон переноситься на перекис ні з відновленого глутатіону, а з селенола, який при цьому переходить в селениста кислоту, а потім остання регенерує в селенол відновленим глутатионом. Імітатори ДП ефективні в основному для зниження інтенсивності ПОЛ [81].

Вивчення терапевтичного впливу селену на перебіг експериментального інфаркту міокарда у щурів дозволило чітко встановити його благотворну дію [Кактурскій Л.В., 1986]. Загоєння інфаркту міокарда продемонстровано в експерименті на щурах, у яких інфаркт відтворювали лігування вінцевої артерії (120 тварин). Протягом тижня після інфаркту щурам підшкірно вводили водний розчин селеніту натрію з розрахунку 30 мкг / кг на добу. Для потенціювання ефекту селену одночасно внутрішньом'язово вводили α-токоферол в дозі 50 мг / кг на добу. Щурів забивали через 2 ч, 1, 3, 7, 14, 30 діб. У нелікованих щурів відзначено зменшення зони інфаркту міокарда, особливо виражене в ішемічної стадії (4,52% проти 31,7% в контролі, р <0,001). Величина зони інфаркту корелювала з рівнем перекисного окислення ліпідів в цій же зоні, визначається хемолюмінісцентним методом. Гістостереометріческі показано прискорення дозрівання гранулоцитарною тканини у нелікованих тварин. Це виражалося збільшенням числа клітин фибропластическом ряду і зменшенням частки сегментоядерних лейкоцитів. У зовнішній зоні інфаркту на відміну від контролю під впливом селену відзначені нормальна активність оксидоредуктаз, а також збереження ультраструктурной організації кардіоміоцитів, тобто відзначений протективний ефект селену на кардіоміоцити на гисто- і ультраструктурному рівні. Сформована на 30-ту добу постинфарктная зона у нелікованих тварин мала пухке будова, а у щурів, які отримували селен, - компактну будову зі значним вмістом м'язових елементів.

З наведених даних видно, що незначне зниження селенового статусу веде до важких порушень серцево-судинної системи. В експериментах показано, що відсоток постішеміческого відновлення механічної функції серця в групі з додаванням селену вище, а показники дегенерації тканини внаслідок ішемії нижче в порівнянні з контролем.

30-річні дослідження А.Н. Кудріна і співавт. переконливо доводять, що селеніт натрію можна розглядати в якості регуляторного елемента життєдіяльності клітин. Авторами показана виражена ефективність селеніту натрію при інфаркті міокарда. Найбільше гальмування ПОЛ і протекторну дію на мембрани кардіоміоцитів виявила комбінація селеніту натрію і α-токоферолу внаслідок потенціювання ефектів. Під впливом цих інгібіторів ПОЛ динаміка одужання прискорювалася при зменшених розмірах рубця за рахунок обмеження ураження міокарда в околоінфарктной зоні. Крім того Кудріним і співавторами отримані дані згідно з якими селеніт натрію і органічні сполуки селену здатні усувати різні форми аритмій і смертельну фібриляцію серця, визавают хлоридом кальцію і гістаміном. Автори роблять висновок, що селеніт натрію, α-токоферол, убіхінон і особливо їх комбінації є головною антиоксидантною системою організму, що захищає його від мембранної патології при ішемії, гіпоксії, іонізуюче випромінювання, інтоксикації ССl 4, дистрофії [4, 138, 139].

За даними С.М. Миколаєва селенит натрію охороняє міокардіальні клітини від руйнування, обмежує периинфарктную зону, зменшує розміри рубців [3]. М.Д. Савіної і А.Н. Кудріним виявлено антиаритмічний ефект селеніту натрію на експериментальних моделях аритмій [4]. Т.А. Венцславская і д.р. вивчали ефекти препарату піпередін-етил-селенофена при експериментальної аритмії серця. Антиаритмическая активність порівнювалася з ізотіном (верапаміл). Виявлено противоаритмическое дію речовини. Було встановлено, що изоптин і піпередін-етил-селенофен, застосовані в дозі 1 мг / кг для лікування порушень ритму серця, викликаних кальцію хлоридом в дозі 125 мг / кг, викликають у всіх випадках лікувальний ефект. При цьому піперидин- етил-селенофен відновлює ритм і його регуляторні механізми значно швидше, ніж изоптин. Виявлено кардіопротекторну дію селену на моделі хронічної навантаження залізом у мишей [140].

В епідеміологічних дослідженнях відзначена зворотна кореляція між рівнем селену в плазмі і ризиком розвитку коронарної хвороби серця і атеросклерозу. Зниження рівня селену в плазмі корелювало зі збільшенням згортання крові і підвищенням синтезу попередників агрегації - ейкозаноїдів, таких як тромбоксан А 2 і лейкотрієни [141].

Селен впливає на біосинтез простагландинів. Відзначено значне збільшення часу згортання крові у людей, що споживали щодня 700 мкг селену у вигляді селеніту натрію протягом 6 тижнів [142]. Інший аспект впливу селену на метаболізм простагландинів - захист простагландіндегідрогенази, ключового ферменту деградації простагландинів. При нормобарической гіпероксії, активність цього ферменту знижується, завдяки чому спостерігається судинозвужувальний ефект. Такий захист може бути здійснена введенням в дієту щурів вітаміну Е в дозі 600 МО / кг (зберігається близько 50% активності простагландіндегідрогенази тканини легенів при кисневої експозиції) або селену в дозі 100 мкг / кг маси тіла [143].

Показано, що ендотеліальні клітини з високим вмістом селену не пригнічує агрегацію тромбоцитів у присутності ацетилсаліцилової кислоти [144].

Б.І. Левшин виявив нормалізуючий вплив селеніту натрію, селенофена 5, селенофена 6, на ізофермент ЛДГ 5 і загальну активність ЛДГ сироватки крові. Препарати селену надають позитивний вплив на показники білкового, жирового і вуглеводного обміну при токсичному гепатиті. Лікувально-профілактичне введення селеніту натрію сприяє деякому прискоренню регенераційних процесів в печінці після її прижиттєвої часткової екстирпації, про що свідчить більш швидке наростання і збільшення вмісту глікогену в печінці [139, 145, 146, 147]. К.О. Шаріпов виявив вплив органічних похідних селену в регуляції антиокислювальних процесів в печінці при експериментальному токсичному гепатиті [148].

Встановлено, що при гострих інфекційних захворюваннях рівень селену в сироватці крові знижений. При цьому зазначено, що максимальне зниження рівня селену відзначається у хворих у важкому клінічному стані [81, 149]. Показано, що одночасне збагачення раціону тварин селенсодержащих дріжджами і вітаміном Е зробило стимулюючий ефект на В-систему імунітету, що виражається в збільшенні кількості антітелобразующіх клітин, і на мітогеном активність Т-лімфоцитів. Імуномодулюючий ефект сполук селену відносять за рахунок функції глутатіонпероксидази, які забезпечують відновлення гідроперекисів і інших продуктів вільнорадикальних реакцій і регулюють вихід ліпоксігеназного і циклооксигеназного метаболітів арахідонової кислоти [150, 151, 152].

Селен впливає на репродуктивну функцію. У всіх вивчених видів тварин дефіцит селену викликає порушень репродуктивної функції. При дефіциті селену самки щурів приносять всього 1-2 нежиттєздатних дитинчати. З усіх органів яєчка містять найбільшу кількість селену. У сільськогосподарських тварин при застосуванні добавок селеніту натрію збільшується народжуваність, поліпшується виживаність молодняка, знижується частота безпліддя. При дефіциті селену тічка, овуляція, запліднення і ранній розвиток плода у овець протікають нормально, але на 3-4 тижні суягности ембріони гинуть [153, 154, 155, 156].

Встановлено, що статеві гормони, СТГ і еритропоетин впливають на розподіл селену в елементах крові. Процес перерозподілу селену під дією статевих гормонів супроводжується змінами імунологічних показників крові [81, 156, 157, 158].

У селену описано радіопротекторну дію. Зниження рівня селену в сироватці крові є характерною реакцією організму на опромінення. Додаткове введення неорганічних сполук селену, зокрема селеніту натрію, з водою тваринам, підданих опроміненню, призводило до збільшення середньої тривалості життя і в значній мірі зменшувало частоту виникнення радіаційно-індукованих пухлин у порівнянні з такою у опромінених тварин, що не отримували селен [129, 130 , 131, 132].

Препарат «Селена», який отримують із дріжджів і містить селен 100 мкг / таб. використовується в якості радиозащитного кошти. Він має здатність зменшувати стимулюючу дію CCl 4 на перекисне окислення ліпідів, знижує достовірно перекисне окислення ліпідів в 1,5 рази, одночасно підвищує рівень активності супероксиддисмутази в 3 рази, статистично достовірно не змінює рівень активності каталази, підвищує рівень селену в печінці [159].

Роль селену при онкологічних захворюваннях значна. Протипухлинна активність сполук селену пропорційна їх каталітичної активності. Встановлено, що в ряду різних з'єднанні селену найбільша активність спостерігається у селенотрісульфіда глутатіону. Це з'єднання було запатентовано в якості канцеростатичним препарату в зв'язку з його високою цитотоксичною активністю по відношенню до клітин карциноми легенів, аденокарциноми ободової кишки, меланоми, аденокарциноми молочної залози, гліоми, медуллобластоми, опухольтрансформірованних фібробластів і кератиноцитів [160]. Другим за активністю з'єднанням є гіпс. Значна кількість робіт присвячена вивченню антимутагенних селеніту натрію [161, 162]. Було зроблено припущення, що високі рівні селену в раціоні тварин можуть стимулювати репарацію пошкодженої ДНК, що викликається канцерогеном [163, 164, 165].

Також є дані про антиканцерогенною дії фармакологічних доз селену. У сорокових роках 20 ст була встановлена ​​його захисна роль щодо хімічно індукованих пухлинних клітин [166, 167], а в шістдесятих роках з'явилися перші результати, які свідчать про зворотний зв'язок між рівнем забезпеченості селеном населення і показниками смертності від онкологічних захворювань. Специфічною особливістю онкологічних захворювань є накопичення селену пухлиною за рахунок зменшення його концентрації в мозку, серці і м'язах. Розрахунок коефіцієнта кореляції між величиною смертності та рівнем селену в сироватці крові показав наявність зворотну кореляцію для лімфом, раку шлунково-кишкового тракту, легенів, молочної залози, товстої і прямої кишки, печінки. У більшості досліджень зазначалося, що високі дози селену знижують частоту розвитку пухлин в значній кількості випадків більш ніж на 35%. Клінічні дослідження в США показали, що у людей похилого віку споживання селену знижує ризик ракових захворювань на 65% [168, 169, 170].

За розрахунками ряду авторів, контингент людей, з низьким вмістом селену (1,63 мкмоль / л) має в 2 рази більший ризик захворіти на рак, ніж люди з високим рівнем селену в організмі (норма 1,72 мкмоль / л) [171, 171 ].

Показано, що селен стимулює апоптоз - програмована клітинна смерть. Це може запобігти закріплення мутацій в наступних поколіннях клітин. Цей ефект спостерігається при застосуванні високих доз селену і пов'язаний з хемозащітним дією мікроелемента [173, 174].

Протипухлинну дію селену можна пояснити виключно його участю в антиоксидантної системі GPX. Виняток передракових генетично пошкоджених клітин за рахунок апоптоза видається більш ефективним в запобіганні раку, ніж придушення проліферації. Клінічний ефект хімічних препаратів, більшість з яких інгібуєпроліферацію клітин, припиняється у разі скасування прийому ліків. Агенти, що індукують апоптоз, такі як селен, можуть забезпечувати більш швидкий захист з меншою токсичністю [81].

Відомий ряд ефектів взаємодії селену з вітамінами і мікроелементами. Припускають, що вітамін С відновлює селеніт до елементарного селену, а елементарна сірка і селен легко з'єднуються, утворюючи сульфіди і селеніди, що містять два і більше атомів сірки або Se. Передбачається також, що Sec, за допомогою перенесення електронів може з'єднуватися з елементарним селеном з утворенням селенсодержащих зв'язків [81, 172].

Ступінь абсорбції селену залежить також в значній мірі від споживання β-каротину і, мабуть, інших жиророзчинних вітамінів, акумулювання яких організмом відбувається в тонкій кишці [175].

Вітамін Е є сильним антиоксидантом, однак для придушення перекисного окислення шляхом використання тільки вітаміну Е є недостатнім для пригнічення утворення пухлини. У дослідженнях було показано, що спільне застосування вітаміну Е і селену більш адекватно. Так при прийомі в дієті 2,5 мг / кг селену знижує загальне число пухлин на 45% у тварин, що знаходяться на адекватної по вітаміну Е дієті і тільки на 24% при дефіциті вітаміну Е. Висловлюються припущення про те, що вітамін Е і селен спільно забезпечують антиоксидантний захист за якимось іншим шляхом. Взаємозв'язок між селеном і вітаміном Е так само пояснюється їх впливом на різні етапи освіти органічних перекисів [81, 172].

Л.А. Кудрявцева (1964-1969) показала, що селен і вітамін Е є необхідними компонентами обміну речовин у тварин. Але вітамін Е фармакологічно менш активний, він тільки у великих дозах 100 мг / кг викликає ефекти, подібні з такими при малих дозах селеніту натрію 100 мкг / кг. Це співвідношення варіює в окремих випадках. Наприклад, при ексудативному діатезі курчат 1 молекула селену здатна замінити 700-1000 молекул вітаміну Е. Також відзначено, що Se уповільнює розпад вітамінів А і Е. А при нестачі селену знижується і загальний вміст мікроелементів в організмі. Гіпс натрію в дозі, що становить 1% від хронічної токсичної дози (300-400 мкг / 100г раціону), в 500 разів активніше вітаміну Е і в 250000 активніше α-цистеїну при некротичної дегенерації печінки [176, 177].

Описано позитивний вплив селену щодо ряду ксенобіотиків. Описано протективное дію відносно нітратів. Так, у тварин отримували селен і нітрати в раціоні відзначено збільшення концентрації селену в сироватці крові при зниженні концентрації метгемоглобіну [177, 178, 179, 180, 181].

Виявлено захисну дію селену щодо важких металів. H 2 Se здатний вступати в реакцію з металами, утворюючи нерозчинні комплекси, що знижують біологічну доступність селену і металу. Ця взаємодія лежить в основі зниження токсичності металів підвищеними дозами селену [182].

Селен виявляє захисну дію відносно органічних і неорганічних сполук ртуті. Так селенит натрію запобігає некроз нирок і знижує смертність, пов'язані з впливом хлориду ртуті та метилртути [183, 184]. Селен забезпечує захист від токсичної дії кадмію, він повністю знімає його тератогенний ефект [185, 186].

Описано взаємодію селену з миш'яком, який є антагоністом селену [187, 188]. У зв'язку з тим, що свинець, олово, телур мають подібні структури, вони мають аффинностью по відношенню до з'єднань сірки і взаємодіють з селеном. Експериментальні дані вказують на можливість конкурентного дії селену і міді [189].

Освіта біологічно недоступних сполук селену з металами пояснюється здатність срібла, кадмію та ін. Викликати у тварин вторинну недостатність селену і блокувати синтез глутатіонпероксидази навіть при раціонах, що містять адекватну кількість селену [81].

В даний час все більшу кількість робіт присвячено дослідженню взаємозв'язку різних елементів в організмі. Показано, що мідь, цинк, селен і молібден залучені в значну кількість біохімічних процесів [190]. Відзначено, що зміст щурів на напівсинтетичних аминокислотном раціоні з низьким вмістом селену супроводжувалося різким зниженням рівня інших мікроелементів, наприклад цинку в клітинах панкреатичних відростків, в паренхімі нирок і в клітинах сперматогенного епітелію [153, 191].

Відомо, що інтенсивне фізичне навантаження визначає прискорення метаболічних процесів, приводячи до значного оксидантного стресу. Цей стан може бути нівельовано додаванням селену.

Вивчення впливу препаратів селену на витривалість організму при фізичних навантаженнях дозволило виявити існування температурного ефекту дії селену. Так, при високих температурах у тварин отримували селен, витривалість була нижче на 35-38% (р <0,05), ніж при низьких температурах - збільшувалася майже на 200%. (Р <0,05) в порівнянні з контролем.

Явище селеновой активації працездатності при низьких температурах має особливе значення у зв'язку з відомими даними про високий рівень антиоксидантного захисту саме у полярних тварин (північний ведмідь, тюлені, моржі і д.р.), в організмі яких в харчовій метаболізм активно включені жири, а також про підвищений метаболізмі жирів у місцевого населення Півночі (ескімоси, чукчі). Високий рівень селену в сироватці крові цих народів дозволяє припускати тісний взаємозв'язок між зазначеними явищами. Ймовірно, що позитивний ефект від прийому селену слід очікувати, коли організм з чисто вуглеводного забезпечення м'язових зусиль переходить на більш довготривалі джерела енергетичного постачання мускульних скорочень, тобто в умовах переохолодження і тривалих м'язових перевантажень [81].

Таким чином, аналіз літературних даних, присвячений селенсодержащих з'єднанням, демонструє їх різнобічному фармакологічному вплив на організм. Експериментальні дослідження і клінічні спостереження показали, що селеніти сприятливо впливають на антиоксидантний статус організму, мають кардіопротекторної, гепатопротекторної, радіопротекторну активністю, запобігають або гальмують розвиток пухлинних процесів, а також цілого ряду захворювань пов'язаних з дефіцитом селену. Однак дія селенітів на мозковий кровотік, динаміку розвитку постішеміческіх феноменів і психоневрологічний статус залишається невивченим.

Зазначені обставини і послужили підставою для порівняльного вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на системну гемодинаміку і мозковий кровотік в умовах норми і при патологічних станах.

ГЛАВА 2 Матеріали та методи дослідження

2.1 Вивчення гострої токсичності

Визначення гострої токсичності проводили на безпородних білих мишах обох статей масою 20-25 г. Тварини пройшли карантин протягом 14 днів. Досліджувані речовини вводили внутрішньочеревно. Спостереження за поведінкою і станом піддослідних тварин проводилося протягом 14 діб, при цьому відзначали зовнішній вигляд, поведінкові реакції і кількість загиблих тварин [192].

Класифікували групу токсичності згідно К.К. Сидорову [193].

2.2 Реєстрація мозкового кровотоку методом водневого кліренсу

Об'ємну швидкість мозкового кровотоку реєстрували методом водневого кліренсу за допомогою імплантованого платинового електрода, розташованого на поверхні сагиттального синуса в області стоку синусів.

Метод заснований на швидкості вимивання попередньо введеного водню з мозкової тканини і дозволяє визначити об'ємну швидкість мозкового кровотоку. Позитивними сторонами методу є відсутність травматизації судин мозку, стабільність показників, індиферентність використовуваного газу.

На основі водневого кліренсу реєстрували мозковий кровотік на наркотізірованних щурах. Результати оцінювалися по кривій зміни напруги водню на електроді полярографическим способом [10, 30, 59, 194, 195].

2.3 Реєстрації параметрів кардіогемодинаміки за допомогою комп'ютерах терной програми «Bioshell» на стережуть тварин

Досліди проводилися на білих щурах. Попередньо за 24 години до початку експерименту (хлоралгідрат 300 мг / кг, внутрішньоочеревинно) імплантували поліетиленовий катетер через праву сонну артерію [196]. Периферичний кінець катетера підшкірно виводили на холку тваринного і фіксували. Реєстрацію даних виробляли з використанням одноразових датчиків SP-01 (США) і комп'ютерної програми «Bioshell» в реальному масштабі часу на базі персональних комп'ютерів IBM AT 486 і Pentium-133 [197]. Аналізували наступні параметри кардіогемодинаміки:

- артеріальний тиск

- частоту серцевих скорочень.

2.4 Методика оцінки поведінки тварини в тесті «відкрите поле»

Оцінку впливу досліджуваних сполук на орієнтовно дослідну та рухову активність тварин проводили в тесті «відкрите поле». Запропонований Холом метод "відкритого поля" широко застосовується в різних експериментальних дослідженнях, пов'язаних з вивченням поведінки, психофармакології.

Установка являє собою коло діаметром 80 см, з бортиком 20 см, розділений на 8 радіальних секторів і одним в центрі. Тестоване тварина поміщали в центральний сектор, спиною до експериментатору. Протягом 3 хвилин спостереження реєстрували число пересічених секторів (рухова активність), вставання на задні лапи і число пересічених центральних секторів (орієнтовно-дослідницька активність), кількість стереотипних рухів (грумінг), емоційну активність (дефекація, уринация) [192, 198, 199 , 200, 201].


2.5 Оцінка координації рухів

Координацію рухів щурів оцінювали в тесті обертового стрижня. Щурів поміщали на горизонтальний стрижень діаметром 4 см, що обертається зі швидкістю 3 об / хв. Нездатність тварин утримувати рівновагу на стрижні протягом трьох хвилин розглядали як прояв порушення координації рухів [192, 202].

2.6 Методика умовного рефлексу пасивного уникнення (УРПУ)

Дана модель призначена для вивчення процесів пов'язаних з відтворенням пам'ятного сліду. Оцінку антиамнестичну ефекту проводили по вимірюванню латентного періоду заходу тваринного в темний відсік при відтворенні навички УРПУ. Вироблення умовної реакції пасивного уникнення затемненого відсіку виробляли в експериментальній камері, яка складалася з двох суміжних відсіків, великого освітленого 60 на 60 см, і малого затемненого (15х15см), забезпеченого електродним підлогою.

Відсіки повідомлялися між собою за допомогою чотирикутного отвору (8х8см). Щура поміщали на середину майданчика світлого відсіку, хвостом до темного відсіку і протягом трьох хвилин реєстрували латентний період першого заходу в темний відсік. Тварин, що не заходили в темну камеру, по витікання трьох хвилин з досвіду виключали.

У темному відсіку тварина отримувало через електричний підлогу одноразове електроболевое роздратування електричним струмом (40 в), що складається з трьох імпульсів тривалістю 1 сек, випливають із інтервалом 0,5 сек. Щур вважалася навченої, якщо протягом 30 сек після сеансу навчання вона не заходила в темний відсік експериментальної камери. Тест на відтворення УРПУ здійснювали через 24 години після навчання при повторному приміщенні тварин в світлий відсік камери і реєстрації протягом трьох хвилин латентного періоду першого заходу в темний відсік, кількості заходів і загального часу перебування в темному відсіку. У модифікації Буреш, Бурешова вироблення умовної реакції пасивного уникнення затемненого відсіку також виробляли одноразовим електроболевим роздратуванням електричним струмом (40 в), що складається з 12 імпульсів тривалістю 1 сек, випливають із інтервалом 5 сек. протягом хвилини. Модифікація Буреш, Бурешова дозволяє судити про вплив досліджуваних сполук на процес фіксації навчання і консолідацію пам'яті (перехід короткочасної пам'яті в довготривалу) оскільки навчання проводили після ішемії, а також про ступінь неврологічних порушень, тварин перенесли тотальну ішемію мозку, тому що спосіб навчання не вимагає абсолютної вироблення рефлексу уникнення [192, 203].

2.7 Методи вивчення протигіпоксичну активності

Для створення патологічного фону, на якому вивчалася ефективність досліджуваних сполук, використовувалися різні моделі циркуляторних гіпоксій.

Нормобарична гіпоксія з гіперкапнією (т.зв. «баночна гіпоксія») є найбільш простим методом оцінки антигипоксической активності. Тварин однакової ваги (розкид не більше 2 г на групу) поміщали в герметично закриті (кришки змащували вазеліном) банки 750 см 3. У всіх випадках реєстрували час виживання (смерті) тварин [202].

Циркуляторную гіпоксію відтворювали шляхом перев'язки двох передніх загальних сонних артерій. Операція проводилася в асептичних умовах з використанням наркозу хлоралгидрат, внутрибрюшинно, 300 мг / кг маси тіла. За оперованими тваринами спостерігали протягом 3 діб з реєстрацією числа тих, що вижили тварин в досвіді і контролі [192].

Наступну модель ішемії мозку створювали критичними гравітаційними перевантаженнями в краніо-каудальному положенні тварин. Відомо, що поздовжні гравітаційні перевантаження, створювані центрифугою, викликають порушення кровопостачання головного мозку, ступінь і характер яких залежить від величини і вектора прискорення.

Щури поміщалися в окремі поздовжні осередку, обсяг осередків відповідав розміру тварин і не давав можливості мимовільно відхилятися від заданого вектора прискорення.

Центрифуга є мотор з приводом встановлений на станині. До приводу зверху кріпиться коромисло довжиною 2,0 м, по краях якого розташовані камери для тварин. Також є пульт управління, що дозволяє контролювати число оборотів, градієнт наростання і спаду перевантажень [204].

2.8 Методика відтворення постішеміческіх цереброваскулярних феноменів

Для оцінки дії досліджуваних препаратів на динаміку розвитку постішеміческіх цереброваскулярних феноменів відтворювали ішемію мозку шляхом двосторонньої оклюзії сонних артерій протягом 10-12 хв. при зниженні САД до 40 мм рт.ст. Після ішемії і реінфузії крові в артеріальну систему тваринного здійснювали реєстрацію швидкості МК методом кліренсу водню [10, 30, 59, 194, 195].

2.9 Умови експериментальних досліджень

Експериментальні дослідження проведені на 236 щурах масою 200 -250 г обох статей і 154 білих мишах масою 20-25г обох статей. Досліджували неорганічні похідні селену: селеніт натрію, селеніт цинку.

У зв'язку з тим, що селеніт натрію і селеніт цинку легкорастворім в воді в експериментах використовували водні розчини. Розчини речовин готували додаванням при перемішуванні фізіологічного розчину (0,9% розчин натрію хлориду).

2.10 Статистична обробка даних

У таблицях дисертації дані представлені в вигляді середніх арифметичних і помилки середньоквадратичного відхилення. Вихідні дані наведені в абсолютних значеннях, а зміни, які відбулися після введення препаратів, наведені в процентному відношенні до вихідних показників. Статистичну обробку отриманих результатів проводили за критерієм Стьюдента [192]. Відмінності вважалися достовірними при рівні значимості р <0,05, р <0,01 для парних вибірок за критерієм Стьюдента.

ГЛАВА 3 ВПЛИВ селеніту натрію І Селеніти ЦИНКУ НА ЦЕРЕБРАЛЬНУ ГЕМОДИНАМІКУ, СИСТЕМНЕ артеріальний тиск І ЧАСТОТУ серцевих скорочень УМОВАХ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ НОРМИ

Гострі досліди проведені на 90 мишах масою 20 - 22 г і 48 щурах масою 200 - 250 г. Реєстрацію об'ємної швидкості мозкового кровотоку здійснювали методом водневого кліренсу. Системний артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень у решти тварин проводили з використанням одноразових датчиків SP-01 (США) і комп'ютерної програми Bioshell. Досліджувані речовини вводили в дозах 30, 50, 100 мкг / кг внутрішньоочеревинно.

3.1 Вивчення гострої токсичності досліджуваних сполук

Визначення гострої токсичності селеніту натрію, селеніту цинку і розрахунки LD 50 проводили за методом Кербера. Білим мишам (90 особин) масою 20-22 г, обох статей селенит натрію і селеніт цинку вводили в 0,5 мл ізотонічного розчину внутрішньочеревно в дозах 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 мг / кг. Спостереження за поведінкою і станом піддослідних тварин проводилося протягом 7 діб, при цьому відзначали зміна зовнішнього вигляду, поведінкових реакцій і кількість загиблих тварин. Контрольній групі тварин (10 особин) вводили фізіологічний розчин в еквівалентному обсязі.

LD 50 розраховували за формулою:

LD 50 = LD 100 - Σ (Z * D) / m, де

Σ - сума.

Z - половина суми числа тварин полеглих від двох наступних доз;

D - інтервал між кожними двома наступними дозами;

m - число тварин на кожну дозу;

За час спостереження в контрольній групі не загинуло жодної тварини, а також не спостерігалося особливих змін у зовнішньому вигляді і поведінці мишей.

У дослідних групах кількість загиблих тварин в залежності від дози наведено в таблицях 1 і 2.

Таблиця 1 - Вплив різних доз селеніту натрію на виживаність тварин

Доза селеніту натрію мг / кг Загальна кількість тварин в групі Число загиблих тварин Z D Z * D
1 6 0 - - -
2 6 0 0 1 0
3 6 2 1 1 1
4 6 3 3.5 1 3.5
5 6 3 4.5 1 4.5
6 6 5 5.5 1 5.5
7 6 5 7.5 1 7.5
8 6 6 8 1 8

Звідси LD 50 становила:

LD 50 = 8 - (1,0 + 3,5 + 4,5 + 5,5 + 7,5 + 8,0) / 6 = 3 мг / кг

Результати проведених досліджень показали, що згідно з вимогами табуляції класів токсичності селенит натрію відноситься до другого класу токсичності. LD 50 становила 3 мг / кг.


Таблиця 2 - Вплив різних доз селеніту цинку на виживаність тварин

Доза селеніту натрію мг / кг Загальна кількість тварин в групі Число загиблих тварин Z D Z * D
1 6 0 - - -
2 6 0 0 1 0
3 6 0 0 1 0
4 6 2 1 1 1
5 6 4 4 1 4
6 6 4 6 1 6
7 6 5 6.5 1 6.5
8 6 6 8 1 8

Звідси LD 50 становила:

LD 50 = 8 - (1,0 + 4,0 + 6,0 + 6,5 + 8,0) / 6 = 3,75 мг / кг

Результати проведених досліджень показали, що згідно з вимогами табуляції класів токсичності селенит цинку відноситься до другого класу токсичності. LD 50 становила 3,75мг / кг.

3.2 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на мозковий кровотік

Експерименти проведені на 40 білих безпородних щурах, вирощених в стандартних умовах віварію, масою 200,0-230,0 м Як наркозу використовували хлоралгидрат в дозі 300 мг / кг. Речовини вводили внутрішньочеревно, одноразово, у вигляді ізотонічного розчину в дозах 100, 50 і 30 мкг / кг. МК реєстрували методом водневого кліренсу. Отримані результати порівнювали з вихідними значеннями МК.

Внутрішньочеревне введення селеніту натрію в дозі 30 мкг / кг (6 дослідів) викликало достовірне зниження МК з перших хвилин експерименту. Так, на 5 хвилині спостереження ступінь зниження МК склала 25%, а на 15 хвилині - 41,2% по відношенню до вихідного рівня. Надалі МК продовжував знижуватися і на 60 хвилині був нижче вихідного рівня на 53,7 ± 15,8% (таблиця 3).

Таблиця 3 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозі 30 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)

Початкові дані
МК мл / 100г / хв

153,0 ± 66,3

Час після введення фізіологічного розчину % Від вихідних даних
Через 5 хв -25,0 ± 19,4 *
15 хв -41,2 ± 17,1 *
30 хв -46,0 ± 10,6 *
45 хв -52,1 ± 13,7 *
60 хв -53,7 ± 15,8 *

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

Аналогічно змінювався МК після введення селеніту натрію в дозі 50 мкг / кг (6 дослідів), однак ступінь його зниження була менш вираженою. На 5 хвилині спостереження МК був нижче вихідного рівня на 28,1 ± 13,1%, а до кінця спостереження - на 41,3 ± 10,5% (таблиця 4).


Таблиця 4 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозі 50 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)

Початкові дані МК мл / 100г / хв 114,4 ± 30,4
Час після введення фізіологічного розчину % Від вихідних даних
Через 5 хв -28,1 ± 13,1 *
15 хв -28,4 ± 13,7
30 хв -25,3 ± 24,6
45 хв -32,0 ± 8,1 *
60 хв -41,3 ± 10,5 *

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

При введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг (8 дослідів) ефект також наступав з перших хвилин спостереження, при цьому зниження МК було достовірно нижче ніж при введенні селеніту натрію в дозах 30 і 50 мкг / кг. Так, в ранні терміни спостереження мозковий кровотік зменшувався незначно (на 6-14%). До кінця експериментів на 60 хвилині МК був менше вихідного рівня на 20,5 ± 12,7% (таблиця 5).

Таблиця 5 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 8, D%)

Початкові дані
МК мл / 100г / хв

184,6 ± 59,6

Час після введення фізіологічного розчину % Від вихідних даних
Через 5 хв -6,6 ± 4,6 *
15 хв -13,4 ± 6,6 *
30 хв -16,2 ± 15,9
45 хв -22,0 ± 11,1 *
60 хв -20,5 ± 12,7 *

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

Сумарні результати дослідів представлені на малюнку 1.


Малюнок 1 - Динаміка зміни МК у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозах 30 мкг / кг, 50 мкг / кг, 100 мкг / кг

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

По осі абсцис - час спостереження в хвилинах; по осі ординат - зміна мозкового кровотоку у відсотках від вихідного рівня

Внутрішньочеревне введення селеніту цинку в дозі 30 мкг / кг (6 дослідів) викликало достовірне зниження МК з перших хвилин експерименту.Так, на 5 хвилині спостереження ступінь зниження МК склала 18,3%, по відношенню до вихідного рівня. Надалі МК також зберігав тенденцію до зниження. До 30 хвилині спостереження МК був нижче вихідного рівня в середньому на 39,8%. До 45 хвилині МК досвідчених тварин стабілізувався. Зниження по відношенню до вихідного рівня склало 38,6%. На 60 хвилині спостереження МК залишився нижче вихідного рівня на 39,9% (таблиця 6).


Таблиця 6 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозі 30 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)

Початкові дані
МК мл / 100г / хв

149,9 ± 27,1

Час після введення фізіологічного розчину % Від вихідних даних
Через 5 хв -18,3 ± 17,3 *
15 хв -24,3 ± 10,9 *
30 хв -39,8 ± 9,8 *
45 хв -38,6 ± 15,3 *
60 хв -39,9 ± 22,2 *

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

У дослідах з внутрішньоочеревинному введенням селеніту цинку в дозі 50 мкг / кг також відзначалася тенденція до зниження МК. Однак достеменно МК знижувався тільки на 45 хвилині, ступінь його зниження склала в середньому 38,2% (таблиця 7).

Таблиця 7 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозі 50 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)

Початкові дані
МК мл / 100г / хв

86,7 ± 19,1

Час після введення фізіологічного розчину % Від вихідних даних
Через 5 хв -14,6 ± 22,4
15 хв -29,5 ± 21,2
30 хв -32,1 ± 27,2
45 хв -38,2 ± 21,5 *
60 хв -39,8 ± 27,5

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

При введенні селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг (8 дослідів) виражений вазоконстрикторний ефект наступав з перших хвилин спостереження, при цьому ступінь зниження МК до кінця спостереження була нижче, ніж при введенні селеніту цинку в дозах 30 і 50 мкг / кг. Так, на 5 хвилині спостереження відзначалося достовірне зниження МК на 24,0 ± 18,3%. Найбільш виражена вазоконстрикторное реакція спостерігалася на 15 хвилині, коли МК був в середньому на 30,7% нижче вихідного рівня. Надалі величина МК змінювалася (таблиця 8).

Таблиця 8 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 8, D%)

Початкові дані
МК мл / 100г / хв

101,2 ± 22,3

Час після введення фізіологічного розчину % Від вихідних даних
Через 5 хв -24,0 ± 18,3 *
15 хв -30,7 ± 17,1 *
30 хв -29,1 ± 13,2 *
45 хв -25,4 ± 17,3 *
60 хв -27,4 ± 15,0 *

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

Дані про вплив різних доз селеніту цинку на мозковий кровотік представлені на малюнку 2.


Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * - р ≤ 0,05

По осі абсцис - час спостереження в хвилинах; по осі ординат - зміна мозкового кровотоку у відсотках від вихідного рівня

Малюнок 2 - Динаміка зміни МК у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозах 30мкг / кг, 50 мкг / кг, 100 мкг / кг

3.3 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень у решти щурів

Відомо, що зниження рівня артеріального тиску, а отже, і перфузіоннного тиску у хворих з ішемічним інсультом, викликає подальше погіршення ішемізованих областей мозку. Тому нейропротектори не повинні володіти вираженим гіпотензивним ефектом і не викликати істотного зміни ЧСС. У зв'язку з цим наступним етапом нашої роботи було вивчення впливу досліджуваних речовин на САД і ЧСС.

Експерименти проведені на 12 стережуть нормотензівних щурах обох статей, масою 220 - 250г. Попередньо за 24 - 48 годин до початку експерименту під хлоралгідратним наркозом (300 мг / кг, внутрішньоочеревинно) імплантували поліетиленовий катетер в сонну артерію. Реєстрацію даних у решти щурів виробляли з використанням одноразових датчиків SP-01 (США) і комп'ютерної програми "Bioshell 1.00" в реальному масштабі часу на базі персонального комп'ютера IBMAT 486 [202]. Тривалість реєстрації показників становила 60 хвилин з моменту введення досліджуваної речовини. Досліджувані сполуки вводили внутрішньочеревно, одноразово в дозі 100 мкг / кг, оскільки в цій дозі в меншій мірі знижувався мозковий кровотік.

Внутрішньочеревне введення селеніту натрію і селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг (6 дослідів) не викликало достовірного зміни артеріального тиску в порівнянні з вихідним рівнем у решти тварин протягом усього терміну спостереження. Однак необхідно відзначити, що при введенні селеніту натрію відзначалася деяка тенденція до зниження артеріального тиску на 6%, а при введенні селеніту цинку - незначне підвищення артеріального тиску в середньому на 6%.

Результати експериментів представлені на малюнку 3 і в таблицях 9, 10.



Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * - р ≤ 0,05

По осі абсцис - час спостереження в хвилинах; по осі ординат - артеріального тиску у відсотках від вихідного рівня

Малюнок 3 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку (100 мкг / кг) на системний артеріальний тиск у решти щурів (M ± m, n = 6, D%)

Таблиця 9 - Динаміка зміни артеріального тиску у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%) в бадьорому стані

Вихідні дані мм. рт. ст. 108,7 ± 13,6
Час після введення речовини % Від вихідних даних абсолютні значення
Через 5 хв 1,2 ± 6,7 110,0 ± 18,6
10 хв 0,0 ± 5,7 108,7 ± 24,1
15 хв -1,1 ± 5,9 107,5 ± 27,6
20 хв -2,3 ± 7,1 106,2 ± 21,1
25 хв -4,2 ± 6,9 104,2 ± 20,7
30 хв -4,0 ± 7,3 104,3 ± 24,2
35 хв -2,8 ± 7,6 105,7 ± 30,1
40 хв -3,4 ± 9,5 105,0 ± 26,8
45 хв -5,1 ± 10,8 103,2 ± 20,1
50 хв -6,0 ± 11,6 102,2 ± 22,9
55 хв -7,1 ± 11,6 101,0 ± 18,1
60 хв -6,0 ± 13,8 102,2 ± 18,5

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * - р ≤ 0,05

Таблиця 10 - Динаміка зміни артеріального тиску у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%) в бадьорому стані

Вихідні дані мм. рт. ст. 92,0 ± 20,8
Час після введення речовини % Від вихідних даних абсолютні значення
Через 5 хв 6,0 ± 19,1 97,5 ± 18,6
10 хв 3,8 ± 25,2 95,5 ± 24,1
15 хв 4,0 ± 28,9 95,7 ± 27,6
20 хв 5,4 ± 21,7 97,0 ± 21,1
25 хв 7,2 ± 20,9 98,7 ± 20,7
30 хв 0,4 ± 26,2 92,3 ± 24,2
35 хв 0,5 ± 32,6 92,5 ± 30,1
40 хв -4,2 ± 30,4 88,2 ± 26,8
45 хв 4,0 ± 21,0 95,7 ± 20,1
50 хв 1,3 ± 24,6 93,2 ± 22,9
55 хв 8,9 ± 18,0 100,2 ± 18,1
60 хв 6,3 ± 19,0 97,8 ± 18,5

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * - р ≤ 0,05

Внутрішньочеревне введення селеніту натрію і селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг (6 дослідів) не викликало достовірного зміни ЧСС в порівнянні з вихідним рівнем у решти тварин протягом усього терміну спостереження. Однак необхідно відзначити, що при введенні селеніту відзначалася тенденція до деякого збільшення ЧСС в середньому на 6%.

Результати експериментів представлені в таблицях 11, 12.

Таблиця 11 - Динаміка зміни ЧСС у білих стережуть щурів при введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)

Вихідні дані уд / хв 392,3 ± 39,5
Час після введення речовини % Від вихідних даних абсолютні значення
Через 5 хв 2,1 ± 11,2 400,5 ± 45,0
10 хв 2,6 ± 11,0 402,3 ± 44,1
15 хв 1,3 ± 10,6 397,5 ± 42,1
20 хв 5,7 ± 10,3 414,7 ± 42,8
25 хв 4,6 ± 9,8 410,5 ± 40,4
30 хв 6,1 ± 11,1 416,2 ± 46,0
35 хв 5,1 ± 10,9 412,3 ± 44,9
40 хв 3,3 ± 10,4 405,2 ± 42,2
45 хв 4,3 ± 9,9 409,0 ± 40,4
50 хв 4,0 ± 10,2 408,2 ± 41,7
55 хв 5,0 ± 9,2 411,8 ± 37,8
60 хв 2,8 ± 10,6 403,3 ± 42,7

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * - р ≤ 0,05

Таблиця 12 - Динаміка зміни ЧСС у білих стережуть щурів при введенні селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)

Вихідні дані уд / хв 363,0 ± 52,3
Час після введення речовини % Від вихідних даних абсолютні значення
Через 5 хв 4,5 ± 11,9 379,5 ± 45,1
10 хв 6,9 ± 12,6 388,0 ± 49,1
15 хв 8,2 ± 10,1 392,8 ± 39,7
20 хв 5,7 ± 6,6 383,8 ± 25,3
25 хв 11,0 ± 12,6 402,8 ± 50,8
30 хв 5,6 ± 15,9 383,3 ± 60,9
35 хв 0,4 ± 18,7 364,5 ± 68,2
40 хв 2,2 ± 15,2 370,8 ± 56,2
45 хв 5,9 ± 13,4 384,3 ± 51,3
50 хв 4,0 ± 11,8 377,7 ± 44,4
55 хв 3,9 ± 5,7 377,2 ± 21,5
60 хв 6,1 ± 7,4 385,0 ± 28,7

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * - р ≤ 0,05

Висновки до розділу 3:

1.Результати вивчення гострої токсичності показали, що селеніт натрію при введенні в черевну порожнину по К.К. Сидорову відноситься до другого класу токсичності.

2. Гіпс цинку за класифікацією токсичності речовин при введенні в черевну порожнину по К.К. Сидорову відноситься до другого класу токсичності.

3. Гіпс натрію і селеніт цинку в дозах 30 мкг / кг, 50 мкг / кг і 100 мкг / кг достовірно знижують рівень МК у наркотізірованних інтактних щурів. Зі збільшенням дози досліджуваних сполук ступінь зниження МК зменшується.

4. Гіпс натрію і селеніт цинку не роблять істотного впливу на артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень стережуть білих щурів в дозі 100 мкг / кг.

ГЛАВА 4 ВПЛИВ селеніту натрію І Селеніти ЦИНКУ НА ПСИХОНЕВРОЛОГІЧНИЙ СТАТУС ТВАРИН В УМОВАХ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ НОРМИ

Одним з проявів судинної патології мозку є порушення психоневрологічного статусу. Для його відновлення використовують ноотропні препарати. Однак речовини застосовуються в даний час для лікування неврологічного дефіциту, мають ряд обмежень і недоліків. Тому дуже актуальним є вивчити питання про можливість корекції порушень поведінки, пам'яті, емоційного статусу, тривожних розладів за допомогою селеніту натрію і селеніту цинку. На першому етапі дослідження вивчали орієнтовно-дослідницьку, рухову і емоційну активність, мнестические функції і координацію рухів у інтактних тварин.

4.1 Вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на пізнавальну, рухову і емоційну активність

Досліди виконані на 18 білих щурах обох статей масою 200 - 250 г. Гіпс натрію і селеніт цинку вводили у вигляді ізотонічного розчину внутрішньочеревно за 50 - 60 хвилин до проведення експерименту в дозі 100 мкг / кг. У контрольних дослідах, в тих же умовах, вводили фізіологічний розчин. У кожній групі тварин проводилося тестування психоневрологічного статусу. Протягом 3-х хвилин перебування щури в «відкритому полі» реєстрували рухову активність (число пересічених секторів), орієнтовно-дослідницьку активність (вставання на задні лапи) і емоційний статус (кількість стереотипних рухів - грумінг, фекальних болюсов).

Дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після першої ін'єкції досліджуваних речовин. Це дозволило стежити за динамікою змін психоневрологічного статусу ішемізованих тварин. Есперіменталь-ні дані статично оброблені і представлені в таблицях 13 - 15.


Таблиця 13 - Показники психоневрологічного статусу тварин в контрольній серії дослідів

час експерименту

(Добу)

досліджувані речовини

Кількість

пройдених

секторів

Кількість

стійок

дефекація

число

урінаціі

грумінг

Кількість

пройдених

центральних секторів

2 день контроль 16,0 ± 1,6 6,8 ± 1,2 3,7 ± 1,4 0,3 ± 0,3 0,5 ± 0,5 0,7 ± 0,3
4 день контроль 13,5 ± 2,4 4,3 ± 1,0 2,0 ± 1,4 0,5 ± 0,3 1,8 ± 0,5 0,3 ± 0,3
7 день контроль 15,7 ± 2,0 6,8 ± 1,1 1,5 ± 1,0 0,0 ± 0,0 1,7 ± 0,6 0,7 ± 0,2

Таблиця 14 - Показники психоневрологічного статусу в групі тварин з попереднім введенням селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг

час експерименту

(Добу)

досліджувані речовини

Кількість

пройдених

секторів

Кількість

стійок

дефекація

число

урінаціі

грумінг

Кількість

пройдених

центральних секторів

2 день гіпс натрію 15,7 ± 1,2 5,2 ± 0,6 2,7 ± 0,6 0,5 ± 0,3 1,0 ± 0,4 0,3 ± 0,2
4 день гіпс натрію 14,8 ± 1,2 4,7 ± 1,1 2,5 ± 0,8 0,3 ± 0,2 0,8 ± 0,4 0,5 ± 0,3
7 день гіпс натрію 16,2 ± 1,1 5,7 ± 0,9 1,8 ± 0,7 0,3 ± 0,2 1,3 ± 0,6 0,3 ± 0,2

Примітка - достовірно щодо контрольних даних, * р ≤ 0,05


Таблиця 15 - Показники психоневрологічного статусу тварин з попереднім введенням селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг

час експерименту

(Добу)

досліджувані речовини

Кількість

пройдених

секторів

Кількість

стійок

дефекація

число

урінаціі

грумінг

Кількість

пройдених

центральних секторів

2 день гіпс цинку 15,8 ± 1,6 7,0 ± 0,9 3,3 ± 0,6 0,8 ± 0,3 1,5 ± 0,6 0,7 ± 0,4
4 день гіпс цинку 15,0 ± 1,9 4,5 ± 1,0 2,3 ± 0,8 0,5 ± 0,3 1,2 ± 0,5 0,7 ± 0,3
7 день гіпс цинку 16,0 ± 2,1 6,3 ± 0,8 2,0 ± 0,6 0,2 ± 0,2 0,8 ± 0,3 0,7 ± 0,3

Примітка - достовірно щодо контрольних даних, * р ≤ 0,05


Результати проведених досліджень не виявили суттєвих відмінностей між даними контрольної серії дослідів і в тестах з попереднім введенням селеніту натрію і селеніту цинку. В динаміці змін у всіх експериментальних групах відзначається тенденція до зниження рівня емоційної тривожності, при цьому рівень рухової і пізнавальної активності варіював незначно, однак також кілька знижувався. Даний ефект мабуть пов'язаний зі звиканням тварин до обстановки експерименту.

4.2 Вивчення впливу досліджуваних сполук на процеси пам'яті і навчання

Досліди проведені на 18 білих щурах обох статей масою 200 - 250 г. Гіпс натрію і селеніт цинку вводили внутрішньочеревно за 50 - 60 хвилин до проведення експерименту в дозі 100 мкг / кг. У контрольних дослідах в тих же умовах вводили фізіологічний розчин. Навчання тварин проводили за 24 години до першої ін'єкції досліджуваних речовин. У кожній групі з 6 тварин проводили тест на відтворення УРПУ. При приміщенні тварин в експериментальну установку реєстрували латентний період заходу (ЛПЗ) пацюки в темну камеру і час перебування в цій камері протягом 3 хвилин. Для вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на мнестичні функції в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після першої ін'єкції досліджуваних речовин. Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблицях 16 і 17.


Таблиця 16 - Оцінка ЛПЗ у білих щурів

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Латентний період першого заходу щурів в темний відсік в сек.
2 день 4 день 7 день
Фіз. розчин 6 128,3 ± 21,7 115,0 ± 18,3 120,8 ± 15,8
гіпс натрію 100 6 122,5 ± 20,0 117,5 ± 28,3 124,2 ± 37,2
гіпс цинку 100 6 119,2 ± 22,8 120,2 ± 17,5 117,5 ± 25,8

Примітка - достовірно щодо контрольних даних, * р ≤ 0,05

Таблиця 17 - Оцінка часу перебування білих щурів в темному відсіку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Час перебування щурів у темному відсіку в сек.
2 день 4 день 7 день
Фіз. розчин 6 19,2 ± 7,5 20,8 ± 7,8 16,7 ± 8,3
гіпс натрію 100 6 18,3 ± 8,3 20,0 ± 11,7 15,0 ± 11,7
гіпс цинку 100 6 20,0 ± 11,7 20,8 ± 11,1 17,5 ± 10,0

Примітка - достовірно щодо контрольних даних, * р ≤ 0,05

Отримані результати свідчать про те, що досліджувані сполуки в умовах експериментальної норми не роблять істотного впливу на процеси пам'яті і навчання білих щурів.

4.3 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на координацію рухів

В експерименті були використані білі щури обох статей масою 200 - 250 г. Гіпс натрію і селеніт цинку вводили внутрішньочеревно в дозі 100 мкг / кг за 60 хвилин до проведення експерименту. У контрольних дослідах в тих же умовах вводили фізіологічний розчин. У кожній групі тварин проводилася оцінка координації рухів.

Щурів поміщали на горизонтальний стрижень діаметром 4 см, що обертається зі швидкістю 3 об / хв. Нездатність тварин утримувати рівновагу на стрижні протягом трьох хвилин розглядали як прояв порушення координації рухів. Для вивчення координації рухів в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після першої ін'єкції досліджуваних речовин.

Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблиці 18.

Таблиця 18 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку (100 мкг / кг) на координацію рухів білих щурів

досліджувані

речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Кількість тварин, що залишилися на стрижні
2 день 4 день 7 день
Абс. % Абс. % Абс. %
Фіз. розчин 8 4 50,0 5 62,5 5 62,5
гіпс натрію 100 8 5 62,5 6 75,0 6 75,0
гіпс цинку 100 8 4 50,0 5 62,5 5 62,5

Примітка - достовірно щодо контрольних даних, * р ≤ 0,05

Результати проведених досліджень показали, що селеніт натрію і селеніт цинку не роблять істотного впливу на координацію рухів інтактних тварин.

Висновки до розділу 4

1. У тесті «відкрите поле» селенит натрію і селеніт цинку не викликають суттєвих змін рухової, орієнтовно-дослідницької та емоційної активності тварин.

2. В умовах тесту УРПУ встановлено, що досліджувані сполуки не впливають на процеси навчання і пам'яті у інтактних тварин.

3. Гіпс натрію і селеніт цинку не впливають на координацію рухів білих щурів в умовах експериментальної норми.

ГЛАВА 5 ВИВЧЕННЯ протигіпоксичну АКТИВНОСТІ досліджуваних сполук І ЇХ ЕФЕКТИВНОСТІ В УМОВАХ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНИХ РОЗЛАДІВ

У патогенезі органічних ушкоджень головного мозку провідне значення належить циркуляторних розладів. При ішемії головного мозку внаслідок зменшення кровотоку обмежується надходження в тканину кисню. Відбувається порушення дихальної ланцюга мітохондрій з підвищенням рівня восстановленности її компонентів. При цьому різко зростає потік вільних електронів, що приводить до утворення АКФ. Надалі при поглибленні ішемії порушуються всі життєво важливі функції клітини, посилюються процеси вільнорадикального окислення, розвивається стан «оксидантного стресу».

Представляло інтерес вивчити вплив досліджуваних сполук на виживання тварин в умовах нормобаричної гіпоксії з гіперкапнією, а також на стійкість білих щурів до циркуляторної гіпоксії, викликаної білатеральної оклюзії загальних сонних артерій і критичними гравітаційними перевантаженнями.

З огляду на наявність вираженого антиоксидантної дії у селенітів наступним етапом нашого дослідження було вивчення впливу досліджуваних сполук на динаміку розвитку постішеміческіх цереброваскулярних феноменів.

5.1 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість тварин до гіпоксичної гіпоксії

Експерименти проведені на 70 білих безпородних мишах обох статей масою 23 - 25 г, вирощених в стандартних умовах віварію. Критерієм ефективності антигіпоксичної дії була тривалість життя тварин. Досліджувані речовини вводили одноразово внутрішньоочеревинно за 10 - 15 хвилин до початку експерименту в дозах 30, 50 і 100 мкг / кг. Контролем служив фізіологічний розчин, що вводиться в еквівалентному обсязі. Статистика проводилася за допомогою «критерію рангових знаків Уилкоксона» і підтверджена статистикою «критерієм знаків» (таблиця 19).

Таблиця 19 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на тривалість життя мишей в умовах нормобаричної гіпоксії (M ± m, D%)

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Середній час життя
хвилини D% від контролю
Фіз. розчин 10 57,0 ± 9,0 ---
гіпс натрію 30 10 69,5 ± 22,3 * + 21,9% *
50 10 64,5 ± 8,5 ** +13,2% **
100 10 58,5 ± 7,5 + 2,6%
гіпс цинку 30 10 81,5 ± 24,8 * +43,0% **
50 10 67,5 ± 17,0 * + 18,4% *
100 10 59,0 ± 8,8 + 3,5%

Примітка

1 * - достовірно щодо фіз. розчину; ≤ 0,05

2 ** - достовірно щодо фіз. розчину; ≤ 0,01

Отримані результати досліджень дозволяють стверджувати, що селеніт натрію і селеніт цинку достовірно збільшують тривалість життя тварин в умовах нормобаричної гіпоксії в порівнянні з контролем в дозах 30 мкг / кг і 50мкг / кг. Так, при попередньому введенні селеніту натрію в дозі 30 мкг / кг середня тривалість життя мишей збільшилася на 21,9% по відношенню до контролю. У дозі 50 мкг / кг час життя зросла на 13,2% .При введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг тривалість життя білих мишей достовірно не змінювалася в порівнянні з твариною контрольної групи. Більш виражений антигіпоксичний ефект надавав селеніт цинку. Введення селеніту цинку в дозі 30 мкг / кг збільшувало тривалість життя тварин на 43%. Зі збільшенням дози антигіпоксичний ефект селеніту цинку зменшувався. Тривалість життя білих мишей збільшувалася на 18, 4% при введенні селеніту цинку в дозі 50 мкг / кг і практично не змінювалася при його введенні в дозі 100 мкг / кг (малюнок 4).

Примітка

1 * - достовірно щодо фіз. розчину; ≤ 0,05

2 ** - достовірно щодо фіз. розчину; ≤ 0,01

Малюнок 4 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на тривалість життя мишей в умовах нормобаричної гіпоксії, в процентному відношенні до контролю (M ± m, D%)

Таким чином, було встановлено, що селеніт натрію і селеніт цинку збільшують час життя тварин при введенні в дозах 50 мкг / кг і 30 мкг / кг.


5.2 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість тварин до циркуляторної гіпоксії мозку, викликаної білатеральної оклюзії загальних сонних артерій

Експерименти проведені на 24 білих безпородних щурах, обох статей, масою 220 - 250 г, вирощених в стандартних умовах віварію. Критерієм ефективності антигіпоксичної дії була виживаність тварин протягом 72 годин після двосторонньої оклюзії сонних артерій. Досліджувані речовини вводили одноразово внутрішньоочеревинно за 10 - 15 хвилин до початку експерименту в дозах 30, 50 і 100 мкг / кг. Контролем служив фізіологічний розчин в еквівалентному обсязі.

Результати контрольної серії дослідів показали, що більшість тварин загинуло протягом першої доби. Через 72 години після операції в контрольній групі число тих, що вижили тварин склало 25%. Нами встановлено, що досліджувані сполуки мають антигипоксической активністю.

При профілактичному введенні селеніту натрію в дозі 30 мкг / кг за 15 хвилин до ішемії виживаність тварин дещо підвищилася. Через 48 годин виживаність виявилася рівною 50%. Введення селеніту натрію в дозі 50 мкг / кг викликало найбільш виражений антигіпоксичний ефект. Виживання тварин на 2-3 добу склала 62,5%. При збільшенні дози селеніту натрію до 100 мкг / кг антигіпоксичний ефект дорівнював ефекту при введенні сполуки в дозі 30 мкг / кг. У дослідах з попереднім введенням селеніту цинку в дозі 30 мкг / кг через 72 години спостереження вижило 4 щури з 8 і виживаність склала 62,5%. Однаковий антигіпоксичний ефект спостерігався при введенні селеніту цинку в дозах 50 і 100 мкг / кг. Виживання тварин до кінця спостереження склала 62,5%. Таким чином, отримані результати свідчать про те, що селеніт натрію і селеніт цинку володіють антигипоксической активністю, збільшують відсоток виживання тварин при циркуляторної гіпоксії, особливо ефективним виявилося введення селеніту натрію в дозі 50 мкг / кг. Гіпс цинку був активний при його введенні в дозах 50 і 100 мкг / кг. Результати експериментів представлені в таблиці 20 і на малюнку 5.

Таблиця 20 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість білих щурів до циркуляторної гіпоксії (M ± m, D%)

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Кількість тих, що вижили тварин

через

24 години

через

48 години

через

72 години

Абс. % Абс. % Абс. %
Фіз. розчин 8 5 62,5 3 37,5 2 25
гіпс натрію 30 8 5 62,5 4 50 4 50
50 8 6 75 5 62,5 * 5 62,5 *
100 8 5 62,5 4 50 4 50
гіпс цинку 30 8 5 62,5 5 62,5 4 50
50 8 6 75 6 75 5 62,5 *
100 8 6 75 5 62,5 * 5 62,5 *

Примітка - достовірно щодо фіз. розчину; * - р ≤ 0,05

Примітка - достовірно щодо фіз. розчину; * - р ≤ 0,05

По осі абсцис - час експерименту; по осі ординат - виживаність білих щурів у відсотках від вихідного рівня

Малюнок 5 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на виживання білих щурів при циркуляторної гіпоксії (M ± m, D%)

5.3 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість тварин до тотальної ішемії мозку, викликаної критичними гравітаційними перевантаженнями

З огляду на антигипоксическую активність досліджуваних сполук при циркуляторної гіпоксії мозку, викликаної білатеральної оклюзії загальних сонних артерій представляло інтерес вивчити їх дію на стійкість організму білих щурів до критичних гравітаційним перевантажень.

Відомо, що поздовжні гравітаційні перевантаження, створювані центрифугою, викликають порушення кровопостачання головного мозку. При краніокаудальном векторі прискорення (позитивні радіальні прискорення) відбувається переміщення крові в каудальному напрямку, в результаті чого тиск у судинах мозку знижується і виникає його ішемія, вже при перевантаженні 4-5g, тиск в сонних артеріях знижується до нульового рівня. Ступінь прояви цереброваскулярних порушень залежить від величини і тривалості перевантаження, а також від градієнта її наростання і спаду, що дозволяє їх дозувати.

Дослідження проведені на білих щурах одного віку і приблизно однієї маси 220-250г. Білі щури є найбільш придатним об'єктом для таких досліджень, оскільки у них відзначається досить чітка залежність між виживанням і величиною перевантажень.

Тварин поміщали в окремі поздовжні осередку, обсяг осередків відповідав розміру тварин і не давав можливості мимовільно відхилятися від заданого вектора прискорення. В експерименті було використано 36 білих щурів, по 12 в контролі і в дослідах з профілактичним введенням селеніту натрію і селеніту цинку. Досліджувані речовини вводилися внутрішньоочеревинно в дозі 100 мкг / кг за 10-15 хвилин до перевантажень. Дослідження стійкості тварин до гравітаційних перевантажень проводили при краніо-каудальному векторі прискорення.

Центрифугування тварин проводили в 2 етапи. На першому етапі дослідження щури піддавалися впливу перевантажень величиною 16 g протягом 10 хвилин, після чого центрифугу зупиняли на 5 хвилин. На другому етапі досліджень, після закінчення 5 хвилинної перерви, тварини піддавалися перевантажень величиною 21 g протягом 5 хвилин.

В результаті досліджень було встановлено, що більшість тварин загинуло на другому етапі досліджень. Так, в контрольній групі на першій стадії експерименту загинули 2 щури з 12, що склало 16,7%, при повторному центрифугуванні загинули 3 щури, що склало 41,7%. При профілактичному введенні селеніту натрію на першій стадії експерименту з 12 щурів загинула 1, що склало 8,3%, на другому етапі загинули 2 щури, що склало 25%.

Гіпс цинку виявляв більш виражений захисний ефект: на першій стадії експерименту не загинуло жодної тварини. Виживання щурів склала 100%. На другому етапі досліджень загинула 1 щур з 12, що склало 8,3%. Результати проведених досліджень статистично оброблені і наведені на малюнку 6 і в таблиці 21.


Примітка - достовірно щодо фіз. розчину, * - р ≤ 0,05

По осі абсцис - стадія експерименту; по осі ординат - виживаність білих щурів у відсотках від вихідного рівня

Малюнок 6 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість білих щурів до гравітаційних перевантажень в краніокаудальном напрямку

Таблиця 21 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку (100 мкг / кг, внутрішньоочеревинно) на стійкість білих щурів до гравітаційних перевантажень в краніокаудальном напрямку

речовина 1 стадія 2 стадія

кількість тих, що вижили

тварин

% тих, хто вижив

тварин

кількість тих, що вижили

тварин

% тих, хто вижив

тварин

контроль 10 83,3% 7 58,3%
гіпс натрію 11 91,7% 9 75,0%
гіпс цинку 12 100,0% 11 * 91,7%

Примітка - достовірно щодо контролю; * - р ≤ 0,05


Таким чином, в результаті проведених досліджень було встановлено, що селеніт натрію і селеніт цинку в дозі 100 мкг / кг значно збільшують стійкість тварин до гравітаційних перевантажень в краніокаудальном напрямку.

5.4 Вплив досліджуваних сполук на мозковий кровотік у наркотізірованних білих щурів в умовах глобальної ішемії мозку

Експерименти проведені на білих безпородних щурах обох статей, наркотізірованних хлоралгидратом (300 мг / кг). Ішемію мозку моделювали двосторонньої оклюзії сонних артерій при САД рівному 40 мм рт.ст. протягом 10-12 хв.

Після ішемії і реінфузії крові в артеріальну систему тваринного здійснювали реєстрацію швидкості МК методом кліренсу водню на тлі зниження артеріального тиску. Досліджувані сполуки вводилися в дозі 100 мкг / кг, внутрішньоочеревинно.

У контрольних дослідах вихідне значення МК становило 101,4 ± 8,4 мл / 100г / хв. Протягом 15-20 хв після ішемії мозку спостерігалося збільшення МК. На 5 хвилині МК достовірно був вищим від початкового рівня в середньому на 27,8%. До 20 хвилині МК відновлювався і надалі відзначалося його зниження. На 30 хвилині ступінь зниження МК склала 12,7%, а до кінця спостереження (через 60 хв.) - 37,0%. Таким чином в умовах глобальної ішемії мозку яскраво проявляються постішеміческіе цереброваскулярні феномени: фаза реактивної гіперперфузії і фаза гіпоперфузії (відстроченого невідновлення кровотоку).

Попереднє введення (за 15 хв до ішемії) селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг викликало зміна динаміки розвитку цереброваскулярних феноменів в постішемічному періоді (таблиця 22 - 24, рисунок 7). Перша фаза стає менш тривалої і МК збільшується в меншій мірі. Через 5 хвилин після ішемії на тлі селеніту натрію МК був вищим від початкового рівня на 8,8%, а в контрольних дослідах на 27,8%. Починаючи з 15 хвилини і по 60 хвилину спостереження відзначалося зниження МК. Однак ступінь зниження МК на 60 хвилині була значно нижче, ніж в контролі.

Результати дослідження з попереднім введенням селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг і подальшої ішемією мозку (7 дослідів) показали, що в постішемічному періоді фаза гіперперфузії була менш виражена. Так, через 5 хвилин після ішемії МК був вищим від початкового рівня на 2,4% (у контролі - 27,8%). Гіпс цинку послаблював фазу гипоперфузии головного мозку. Якщо в контролі на 60 хвилині постішеміческого періоду МК знижувався на 37,0%, то під впливом попереднього введення селеніту цинку МК знижувався на 19,1%. Таким чином профілактичне введення селеніту натрію і селеніту цинку істотно змінює динаміку розвитку постішеміческіх цереброваскулярних феноменів. Наведені дані про сприятливий вплив досліджуваних сполук на МК в умовах ішемії мозку дозволяють в якійсь мірі пояснити їх захисну дію при циркуляторної гіпоксії, викликаної двосторонньої перев'язкою загальних сонних артерій і критичними гравітаційними перевантаженнями.

Таблиця 22 - Динаміка зміни мозкового кровотоку в постішемічному періоді в контрольних дослідах

Початкові дані
МКМЛ / 100г / хв

101,4 ± 8,4

Час після введення фізіологічного розчину % Від вихідних даних
Через 5 хв +27,8 ± 5,1 *
15 хв +3,2 ± 4,6
30 хв -12,7 ± 2,1 *
45 хв -20,0 ± 2,5
60 хв -37,0 ± 1,9 *

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05


Таблиця 23 - Вплив селеніту натрію (100 мкг / кг) на мозковий кровотік білих щурів в постішемічному періоді, (M ± m, n = 7, D%)

Початкові дані
МКМЛ / 100г / хв

81,8 ± 27,8

Час після введення селеніту натрію % Від вихідних даних
Через 5 хв + 8,8 ± 29,8 *
15 хв -20,7 ± 30,4 *
30 хв -26,9 ± 41,3 *
45 хв -23,1 ± 30,3 *
60 хв -28,3 ± 41,3 *

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

Таблиця 24 - Вплив селеніту цинку (100 мкг / кг) на мозковий кровотік білих щурів в постішемічному періоді, (M ± m, n = 7, D%)

Початкові дані
МКМЛ / 100г / хв

61,6 ± 19,2

Час після введення селеніту цинку % Від вихідних даних
Через 5 хв + 2,4 ± 57,1 *
15 хв + 7,2 ± 54,8 *
30 хв -31,8 ± 32,6 *
45 хв -22,6 ± 26,4 *
60 хв -19,1 ± 24,9 *

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05




Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

По осі абсцис - час спостереження в хвилинах; по осі ординат - зміна мозкового кровотоку у відсотках від вихідного рівня

Малюнок 7 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на динаміку розвитку постішеміческіх цереброваскулярних феноменів


5.5 Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на артеріальний тиск і опір мозкових судин в умовах експериментальної патології

Вимірювання артеріального тиску у тварин проводили за допомогою ртутного манометра, з'єднаного з катетером, попередньо імплантованим в сонну артерію. Для запобігання згортання крові катетер заповнювали розчином гепарину. Опір судин мозку розраховували виходячи з даних АД і МК у ішемізованих тварин.

Артеріальний тиск як в контрольній серії експериментів, так і в групі дослідів з попереднім введенням досліджуваних сполук знижувалося з перших хвилин спостереження. У контрольній серії зниження артеріального тиску було значно менше і до кінця спостереження склало 5,2%. У групі з попереднім введенням селеніту натрію (до ішемії мозку) до 60 хвилині спостереження АТ знизилося на 19,6%. У дослідах з попереднім введенням селеніту цинку зниження артеріального тиску було менш вираженим і склало 14,8% до кінця спостереження.

При розрахунку ССМ було відзначено, що внутрішньоочеревинне введення досліджуваних сполук справляло достовірний вплив на опір мозкових судин в постішемічному періоді. Протягом перших 10-15 хвилин після ішемії відзначалося достовірне зниження опору мозкових судин з найбільш вираженим ефектом на 5 хвилині на тлі селеніту натрію і на 15 хвилині - на тлі селеніту цинку. До 30 хвилині експерименту ССМ починало зростати і на 60 хвилині спостереження було на 12,2% вище вихідного рівня при попередньому введенні селеніту натрію. У меншій мірі до кінця спостереження збільшувалася ССМ. У дослідах з попереднім введенням селеніту цинку ступінь збільшення ССМ була значно нижче, ніж в контролі (+ 5,6% і + 41,1%, відповідно). Результати проведених досліджень статистично оброблені і наведені в таблицях 25 - 27 і на малюнку 8.


Таблиця 25 - Динаміка зміни артеріального тиску і ССМ у білих щурів в контрольній серії дослідів в постішемічному періоді

Початкові дані
АТ

мм рт. ст.

ССМ

мм рт. ст. / мл / 100г / хв

122,6 ± 3,9 1,24 ± 4,0
Час після введення фізіологічного розчину % Від вихідних даних
Через 5 хв -1,1 ± 1,0 -23,2 ± 4,0 *
15 хв -2,9 ± 1,1 * -3,7 ± 6,0
30 хв -7,2 ± 2,2 * +5,6 ± 4,6
45 хв -6,1 ± 2,4 +23 ± 5,7
60 хв -5,2 ± 2,2 * +41,1 ± 9,9 *

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

Таблиця 26 - Динаміка зміни артеріального тиску і ССМ у білих щурів в постішемічному періоді отримували селеніт натрію в дозі 100 мкг / кг перед ішемією мозку (M ± m, n = 7, D%)

Початкові дані

АТ

75,3 ± 8,3

Час після введення селеніту натрію % Від вихідних даних
АТ ССМ
Через 5 хв -3,8 ± 10,3 -5,7 * ± 31,9
15 хв -9,8 * ± 13,5 -15,5 * ± 15,8
30 хв -9,8 * ± 12,6 + 32,7 * ± 24,5
45 хв -17,3 * ± 18,4 + 7,2 * ± 24,3
60 хв -14,8 * ± 14,2 + 5,6 * ± 23,3

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05


Таблиця 27 - Динаміка зміни артеріального тиску і ССМ в постішемічному періоді у білих щурів, які отримували селеніт цинку в дозі 100 мкг / кг перед ішемією мозку (M ± m, n = 7, D%)

Вихідні дані (мл / 100г / хв)

АТ

76,0 ± 10,0

Час після введення селеніту цинку % Від вихідних даних
АТ ССМ
Через 5 хв -8,4 * ± 9,5 -15,8 * ± 43,1
15 хв -7,8 * ± 10,8 + 16,4 * ± 39,8
30 хв -12,0 * ± 13,3 + 20,5 * ± 31,2
45 хв -16,9 * ± 11,5 + 8,2 * ± 41,8
60 хв -19,6 * ± 9,1 + 12,2 * ± 33,8

Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05




Примітка - достовірно щодо вихідних даних, * р ≤ 0,05

По осі абсцис - час спостереження в хвилинах; по осі ординат - зміна ССМ у відсотках від вихідного рівня

Малюнок 8 - Динаміка зміни ССМ в постішемічному періоді у білих щурів отримували селеніт натрію і селеніт цинку перед ішемією мозку


Висновки до розділу 5

1. Гіпс натрію і селеніт цинку в дозах 30 і 50 мкг / кг достовірно збільшують тривалість життя тварин в умовах нормобаричної гіпоксії з гіперкапнією.

2. Гіпс натрію і селеніт цинку збільшували виживаність тварин в умовах циркуляторної гіпоксії мозку в порівнянні з контролем.

3. Гіпс натрію і селеніт цинку в дозі 100 мкг / кг значно збільшують стійкість тварин до тотальної ішемії мозку, викликаної критичними гравітаційними перевантаженнями в краніо-каудальному напрямку.

4. В умовах експериментальної ішемії мозку досліджувані сполуки при їх профілактичному введенні істотно змінюють динаміку розвитку постішеміческіх цереброваскулярних феноменів, зменшують ступінь прояву реактивної гіперемії і гальмують розвиток фази невідновлення мозкового кровотоку.

5. Загальна гіпотензія, характерна для постішеміческого періоду кілька посилювалася при попередньому введенні селеніту натрію і селеніту цинку. Розрахунок ССМ показав, що при введенні селеніту натрію до 60 хвилині спостереження воно було приблизно в 2 рази нижче, ніж в контрольній серії дослідів, а при введенні селеніту цинку до кінця експерименту ССМ було близько до вихідного.


ГЛАВА 6 ВИВЧЕННЯ психотропної активності селеніту натрію І Селеніти ЦИНКУ В УМОВАХ ТОТАЛЬНОЇ ІШЕМІЇ МОЗКУ

При судинної патології мозку в клініці відзначається ряд розладів його діяльності: порушення поведінки, пам'яті (в тому числі, амнезія) емоційного статусу, тривожні розлади. Порушення в онтогенезі нервово-психічних процесів, перш за все когнітивних, можуть проявлятися не відразу, а через тривалий період після патогенетичного впливу. Однак при наданні допомоги пацієнтам практично всі системи лікування спрямовані на ліквідацію вже розвилася патології, хоча часто церебральної катастрофи передує тривалий період оборотних порушень, коли ще можливо превентивний вплив. Формування 50% від остаточного обсягу інфаркту відбувається протягом перших 90 хвилин з моменту розвитку інсульту, 80% - протягом 360 хвилин, в зв'язку з чим перші 3-6 годин отримали назву «терапевтичного вікна», всередині якого лікувальні заходи можуть бути найбільш ефективними . Час «доформування» інфарктних змін після НМК в кожному випадку індивідуально і становить від 3 до 7 діб [1].

Згідно з даними літератури (М.В. Біленко, 1989, В.Б. Семенютін і співавт. 1997) оклюзія артерій мозку супроводжується значною варіабельністю ішемічних ушкоджень і ступенем неврологічного дефіциту. Відомо, що поздовжні гравітаційні перевантаження при краніокаудальном векторі прискорення викликають порушення кровопостачання головного мозку. Ступінь прояви цереброваскулярних порушень залежить від величини і тривалості перевантаження, а також від градієнта її наростання і спаду, що дозволяє їх дозувати. Поряд зі змінами показників мозкової гемодинаміки у тварин, які зазнали впливу гіпергравітації, відзначаються зміни неврологічного статусу, поведінкової активності та рівня емоційної тривожності.

Відомо, що антиоксиданти мають ноотропні властивості. З огляду на виражену антигіпоксичну активність селеніту натрію і селеніту цинку представляло інтерес вивчити їх вплив на здатність до навчання і процеси пам'яті, на рухову, орієнтовно-дослідницьку, емоційну активність і координацію рухів у тварин, які зазнали тотальної ішемії мозку.

6.1 Вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на психоневрологічний статус білих щурів, які зазнали впливу гравітаційних перевантажень (профілактичне введення)

Поздовжні гравітаційні перевантаження створювалися центрифугою. В експерименті використовувалися білі щури масою 220-250г, що вижили після перевантажень. Тварини були розділені на три досліджувані групи. Контрольну групу склали 7 щурів, які отримували ізотонічний розчин, другу групу - щури, яким профілактично до перевантажень вводили селеніт натрію в дозі 100 мкг / кг (8 тварин). Третій групі тварин (11 щурів) за 10-15 хвилин до ішемії вводили селеніт цинку в дозі 100 мкг / кг. Надалі в кожній групі тварин проводилася оцінка психоневрологічного статусу.

Оцінку впливу селеніту натрію і селеніту цинку на рухову, орієнтовно-дослідницьку та емоційну активність тварин проводили в тесті «відкрите поле». Установка являє собою коло діаметром 80 см, з бортиком 20 см, розділений на 8 радіальних секторів і одним в центрі. Тестоване тварина поміщали в центральний сектор, спиною до експериментатору. Протягом 3 хвилин спостереження реєстрували число пересічених секторів (рухова активність), вставання на задні лапи і число пересічених центральних секторів (орієнтовно-дослідницька активність), кількість стереотипних рухів (грумінг), емоційну активність (дефекація, уринация).

Дослідження проводили на другий, четвертий і сьомий день після перенесених перевантажень. Це дозволило стежити за динамікою змін психоневрологічного статусу ішемізованих тварин.

Результати проведених досліджень показали, що в постішемічному періоді в контрольних дослідах відзначалося зниження рухової активності, про що свідчить зменшення числа пересічених секторів, зниження пізнавальної активності (зменшення числа вертикальних стійок) щурів і їх емоційного стану (зменшення актів грумінгу і число дефекацій). Ці порушення найбільш яскраво виявлялися протягом перших днів після ішемії, а в наступну добу кілька слабшали. Гіпс натрію і селеніт цинку при їх попередньому до ішемії введення підвищували рухову активність щурів, які перенесли ішемію мозку. Більш виражений ефект надавав селеніт цинку, під впливом якого значно збільшувалася кількість пересічених тваринами секторів. Профілактичне введення селеніту натрію зменшувало у щурів число вертикальних стійок, стереотипних рухів і не змінювало число дефекацій в порівнянні з контролем, що свідчить про деяке зниження дослідницької та емоційної активності. Гіпс цинку підвищував орієнтовно-дослідницьку активність (збільшував число стійок) і знижував рівень емоційного стану (зменшував акти грумінг і дефекацій) щурів в постішемічному періоді.

Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблицях 28 - 30.


Таблиця 28 - Показники психоневрологічного статусу контрольної групи тварин в постішемічному періоді

час експерименту

(Добу)

досліджувані речовини

Кількість

пройдених

секторів

Кількість

стійок

дефекація

число

урінаціі

грумінг

Кількість

пройдених

центральних секторів

2 день фіз. розчин 12,0 ± 2,6 7,9 ± 2,7 2,4 ± 1,5 0,9 ± 0,7 2,6 ± 1,1 0,0 ± 0,0
4 день фіз. розчин 10,6 ± 3,6 4,7 ± 2,5 2,9 ± 2,1 0,7 ± 0,6 3,4 ± 0,7 0,0 ± 0,0
7 день фіз. розчин 13,0 ± 2,6 7,0 ± 7,0 1,9 ± 1,3 0,3 ± 0,5 2,3 ± 0,7 0,2 ± 0,2

Таблиця 29 - Показники психоневрологічного статусу у тварин в постішемічному періоді попереднім введенням селеніту натрію (100 мкг / кг)

час експерименту

(Добу)

досліджувані речовини

Кількість

пройдених

секторів

Кількість

стійок

дефекація

число

урінаціі

грумінг

Кількість

пройдених

центральних секторів

2 день гіпс натрію 10,8 ± 1,9 4,1 ± 1,0 * 2,3 ± 1,3 0,3 ± 0,6 1,0 ± 1,0 0,1 ± 0,3
4 день гіпс натрію 12,4 ± 3,3 5,4 ± 2,2 3,3 ± 2,2 1,3 ± 0,3 1,3 ± 0,8 * 0,1 ± 0,3
7 день гіпс натрію 14,4 ± 2,0 6,4 ± 1,2 1,3 ± 1,0 0,1 ± 0,3 1,6 ± 0,8 0,3 ± 0,4

Примітка - достовірно щодо контролю, * р ≤ 0,05


Таблиця 30 - Показники психоневрологічного статусу у тварин в постішемічному періоді з попереднім введенням селеніту цинку (100 мкг / кг)

час експерименту

(Добу)

досліджувані речовини

Кількість

пройдених

секторів

Кількість

стійок

дефекація

число

урінаціі

грумінг

Кількість

пройдених

центральних секторів

2 день гіпс цинку 15,4 ± 3,9 8,0 ± 3,1 1,6 ± 1,1 0,3 ± 0,4 0,5 ± 0,6 * 0,3 ± 0,4
4 день гіпс цинку 14,2 ± 2,2 11,3 ± 2,8 * 2,8 ± 2,3 0,5 ± 0,6 1,0 ± 0,7 * 0,3 ± 0,4
7 день гіпс цинку 17,3 ± 2,4 * 8,7 ± 2,3 1,5 ± 1,2 0,2 ± 0,3 0,9 ± 0,8 * 0,4 ± 0,5

Примітка - достовірно щодо контролю, * р ≤ 0,05


Таким чином, отримані експериментальні дані свідчать, про те, що одноразове введення селеніту натрію і селеніту цинку до ішемії зробило позитивний вплив на організм тварин в постішемічному періоді. У дослідах з попереднім введенням досліджуваних речовин зменшився рівень емоційної тривожності, збільшилася рухова активність, а на тлі селеніту цинку підвищувалася і пізнавальна активність тварин в порівнянні з контрольною групою.

Для вивчення впливу досліджуваних сполук на різні фази пам'яті - навчання білих щурів проводили через 24 години після ішемії в методиці умовного рефлексу пасивного уникнення в модифікації Буреш, Бурешова. У кожній групі тварин проводили тест на відтворення УРПУ. При приміщенні щурів в експериментальну установку реєстрували латентний період заходу (ЛПЗ) пацюки в темну камеру і час перебування (ВП) в цій камері протягом 3 хвилин. Для вивчення ЛПЗ та ВП в темному відсіку в динаміці - дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після навчання тварин.

Оскільки навчання тварин проводилося після ішемії, а введення досліджуваних сполук проводили до ішемії - це дозволило судити про ступінь неврологічних порушень ішемізованих тварин. В ході експериментів було встановлено, що в контрольній групі тварин зазначалося погіршення процесів навчання і процесів відтворення пам'ятного сліду. Ці ефекти найбільш яскраво виявлялися в перші дні спостереження і кілька слабшали дня сьомого спостереження. Гіпс натрію і селеніт цинку значно збільшували ЛПЗ та ВП. Однак вираженість ефекту селенітів була різною. Найбільш активним виявився селеніт цинку. Досліджувані сполуки у інтактних тварин сприяли збереженню навички УРПУ. Ці дані дозволяють зробити висновок, що порушення пам'яті щурів, мабуть, пов'язано з погіршенням процесів фіксації навчання або консолідації пам'яті (перехід короткочасної пам'яті в довготривалу). Отримані експериментальні дані статистично оброблені і представлені в таблицях 31 - 34.

Таблиця 31 - Оцінка ЛПЗ у білих щурів отримували селеніт натрію і до ішемії мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Латентний період першого заходу щурів в темний відсік в сек.
2 день 4 день 7 день
Фіз. розчин 7 88,6 ± 30,2 122,1 ± 41,0 153,6 ± 24,5
гіпс натрію 100 9 120,6 ± 30,7 127,8 ± 40,2 147,2 ± 34,8

Примітка - достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05

Таблиця 32 - Оцінка ЛПЗ у білих щурів отримували селеніт цинку до ішемії мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Латентний період першого заходу щурів в темний відсік в сек.
2 день 4 день 7 день
Фіз. розчин 7 88,6 ± 30,2 122,1 ± 41,0 153,6 ± 24,5
гіпс цинку 100 11 155,5 ± 31,2 145,9 ± 22,6 150,0 ± 27,3

Примітка

1 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), * - р ≤ 0,05

2 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05

3 достовірно щодо селеніту цинку (інтактні щури), $ - р ≤ 0,05


Таблиця 33 - Оцінка часу перебування білих щурів в темному відсіку у білих щурів, які отримували селеніт натрію до ішемії мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Час перебування щурів у темному відсіку в сек.
2 день 4 день 7 день
Фіз. розчин 7 20,0 ± 10,0 11,4 ± 7,8 3,6 ± 4,1
гіпс натрію 100 9 9,4 ± 6,2 5,0 ± 5,0 4,2 ± 4,0

Примітка

1 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), * - р ≤ 0,05

2 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05

3 достовірно щодо селеніту цинку (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05

Таблиця 34 - Оцінка часу перебування білих щурів в темному відсіку у білих щурів, які отримували селеніт цинку до ішемії мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Час перебування щурів у темному відсіку в сек.
2 день 4 день 7 день
Фіз. розчин 7 20,0 ± 10,0 11,4 ± 7,8 3,6 ± 4,1
гіпс цинку 100 11 1,8 ± 2,6 6,8 ± 5,3 4,1 ± 4,5

Примітка

1 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), * - р ≤ 0,05

2 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05

3 достовірно щодо селеніту натрію (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05

Наступним етапом дослідження була оцінка координації рухів в тесті «обертовий стрижень». Гіпс натрію і селеніт цинку вводили внутрішньочеревно, одноразово, за 10-15 хвилин до проведення експерименту в дозі 100 мкг / кг. У контрольних дослідах в тих же умовах вводили фізіологічний розчин.

Щурів поміщали на горизонтальний стрижень діаметром 4 см, що обертається зі швидкістю 3 об / хв. Нездатність тварин утримувати рівновагу на стрижні протягом трьох хвилин розглядали як прояв порушення координації рухів. Для вивчення координації рухів в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після ішемії. Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблиці 35 і 36.

Таблиця 35 - Вплив профілактичного введення селеніту натрію на координацію рухів білих щурів перенесли тотальну ішемію мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

щурів

Кількість тварин, що залишилися на стрижні
2 день 4 день 7 день
Абс. % Абс. % Абс. %
Фіз. розчин 7 3 42,9 4 57,2 3 42,9
гіпс натрію 100 9 4 44,4 $ 3

33,3

&

6

66,7

Примітка

1 достовірно щодо вихідних даних з речовиною, інтактні щури, & ≤ 0,05

2 достовірно щодо селеніту цинку (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05

Таблиця 36 - Вплив профілактичного введення селеніту цинку на координацію рухів білих щурів перенесли тотальну ішемію мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

щурів

Кількість тварин, що залишилися на стрижні
2 день 4 день 7 день
Абс. % Абс. % Абс. %
Фіз. розчин 7 3 42,9 4 57,2 3 42,9
гіпс цинку 100 11 2

18,2

# *

3

27,3

# $

6

54,5

&

Примітка

1 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05

2 достовірно щодо селеніту натрію (щури перенесли ішемію мозку), * - р ≤ 0,05

3 достовірно щодо селеніту натрію (інтактні щури), $ - р ≤ 0,05

Проведені експерименти показали, що в постішемічному періоді в групі контрольних тварин зазначалося погіршення координації рухів. Гіпс цинку і селеніт натрію значно послаблювали викликане ішемією порушення координації рухів, що проявлялося в збільшенні часу утримання щурів на обертовому стрижні. Так, в контрольних дослідах кількість тварин, утримати на обертовому стрижні протягом 3-х хвилин, склало 42,9%. При попередньому введенні селеніту натрію і селеніту цинку значно підвищувався відсоток щурів, утримати на стрижні, і до кінця тижня ці показники склали відповідно: 62,5% і 54,6%

Таким чином, після ішемії відзначалися значні порушення координації рухів тварин. Одноразове профілактичне введення селеніту натрію або селеніту цинку позитивно впливало на даний показник в постішемічному періоді.

6.2 Вивчення терапевтичної дії досліджуваних сполук на психоневрологічний статус тварин, які зазнали впливу гравітаційних перевантажень

Поздовжні гравітаційні перевантаження, величиною 9g протягом 10 хв. створювалися центрифугою. В експерименті використовувалися білі щури масою 220-250г. Тварини були розділені на три досліджувані групи, по 6 тварин у кожній. У контрольній групі - щури, що отримували ізотонічний розчин. Друга і третя група - щури, яким через 50 - 60 хвилин після перевантажень внутрішньочеревно вводили селеніт натрію і селеніт цинку в дозі 100 мкг / і потім протягом тижня за 30-40 хвилин до експерименту.

Оцінка впливу селеніту натрію і селеніту цинку на орієнтовно дослідну та рухову активність тварин проводили в тесті «відкрите поле». Протягом 3 хвилин спостереження реєстрували число пересічених секторів (рухова активність), вставання на задні лапи і число пересічених центральних секторів (орієнтовно-дослідницька активність), кількість стереотипних рухів (грумінг), емоційну активність (дефекація, уринация).

Дослідження проводили на другий, четвертий і сьомий день після перенесених перевантажень. Це дозволило стежити за динамікою змін психоневрологічного статусу ішемізованих тварин. Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблицях 37-39.

Результати проведених досліджень показали, що в постішемічному періоді в контрольних дослідах відзначено зниження рухової активності, про що свідчить зменшення числа пересічених секторів, зниження пізнавальної активності (зменшення числа вертикальних стійок) щурів і їх емоційного стану (зменшення актів грумінгу і числа дефекацій).


Таблиця 37 - Показники психоневрологічного статусу тварин контрольної групи тварин в постішемічному періоді

час експерименту

(Добу)

досліджувані речовини

Кількість

пройдених

секторів

Кількість

стійок

дефекація

число

урінаціі

грумінг

Кількість

пройдених

центральних секторів

2 день фіз. розчин 13,0 ± 4,0 5,7 ± 4,3 3,0 ± 1,7 0,3 ± 0,4 0,8 ± 0,6 0,3 ± 0,6
4 день фіз. розчин 12,2 ± 3,2 6,5 ± 2,5 3,0 ± 1,0 0,3 ± 0,4 0,8 ± 0,8 0,3 ± 0,4
7 день фіз. розчин 11,8 ± 5,4 6,0 ± 3,7 3,2 ± 1,8 0,7 ± 0,7 & 1,0 ± 0,7 0,3 ± 0,4

Таблиця 38 - Вплив селеніту натрію (100 мкг) на показники психоневрологічного статусу тварин, які перенесли тотальну ішемію мозку (лікувального введення)

час експерименту

(Добу)

досліджувані речовини

Кількість

пройдених

секторів

Кількість

стійок

дефекація

число

урінаціі

грумінг

Кількість

пройдених

центральних секторів

2 день гіпс натрію 12,5 ± 3,3 5,5 ± 2,8 2,7 ± 1,8 0,8 ± 0,8

2,0 ± 1,0

# $

0,3 ± 0,4
4 день гіпс натрію

11,5 ± 2,3

*

5,7 ± 2,9 2,5 ± 2,2 0,5 ± 0,7

0,7 ± 0,7

#

0,5 ± 0,7
7 день гіпс натрію

10,3 ± 3,3

# $

6,5 ± 3,7 1,8 ± 1,8 0,2 ± 0,3 1,2 ± 0,6 0,2 ± 0,3

Примітка

1 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05

2 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05

3 достовірно щодо селеніту цинку (щури перенесли ішемію мозку), * - р ≤ 0,05


Таблиця 39 - Вплив селеніту цинку (100 мкг) на показники психоневрологічного статусу тварин, які перенесли тотальну ішемію мозку (лікувального введення)

час експерименту

(Добу)

досліджувані речовини

Кількість

пройдених

секторів

Кількість

стійок

дефекація

число

урінаціі

грумінг

Кількість

пройдених

центральних секторів

2 день гіпс цинку 18,7 ± 5,7 7,2 ± 4,9 3,7 ± 1,8 0,8 ± 0,8 1,5 ± 1,2 1,0 ± 1,0
4 день гіпс цинку

17,0 ± 4,0

*

7,2 ± 2,9 2,7 ± 1,7 0,5 ± 0,7 1,2 ± 0,9 0,7 ± 0,7
7 день гіпс цинку

17,2 ± 4,5

*

3,5 ± 2,2

#

2,3 ± 2,3 0,7 ± 0,7 0,5 ± 0,5 0,8 ± 0,8

Примітка

1 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05

2 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05

3 достовірно щодо селеніту натрію (щури перенесли ішемію мозку), * - р ≤ 0,05


Ці порушення найбільш яскраво виявлялися протягом перших днів після ішемії, а в наступну добу кілька слабшали. Гіпс натрію і селеніт цинку, що вводяться після ішемії мозку, підвищували рухову активність щурів. Більш виражений ефект надавав селеніт цинку, під впливом якого достовірно збільшувалося число пересічених тваринами секторів. Лікувальна введення селеніту натрію зменшувало число вертикальних стійок, стереотипних рухів і не змінювало число дефекацій в порівнянні з контролем, що свідчить про деяке зниження дослідницької та емоційної активності. Гіпс цинку підвищував орієнтовно-дослідницьку активність (збільшував число стійок) і знижував рівень емоційної напруги (зменшував акти грумінг і дефекацій) щурів в постішемічному періоді.

Для з'ясування впливу досліджуваних сполук на мнестичні функції проводили тест на відтворення УРПУ.Експериментальні тварини були розділені на 3 групи по 6 тварин. Навчання білих щурів здійснювали за 24 години до ішемії за описаною раніше методикою умовного рефлексу пасивного уникнення. При приміщенні тварин в експериментальну установку реєстрували латентний період заходу (ЛПЗ) пацюки в темну камеру і час перебування (ВП) в ній. Для вивчення координації рухів в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після ішемії.

Під впливом ішемії, пацюки забували ситуацію і частіше заходили в темний відсік установки, при цьому збільшувався час перебування в ньому. В ході експериментів було встановлено, що досліджувані сполуки у тварин, які перенесли ішемію мозку, сприяли збереженню навички УРПУ, що проявлялося в збільшенні ЛПЗ та ВП в темній камері. Однак вираженість ефектів селенітів була різною. Найбільш активним виявився селеніт натрію.

Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблицях 40 і 41.


Таблиця 40 - Оцінка ЛПЗ у білих щурів отримували селеніт натрію і селеніт цинку після ішемії мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Латентний період першого заходу щурів в темний відсік в сек.
2 день 4 день 7 день
Фіз. розчин 6

76,7 ± 30,0

#

85,8 ± 36,1

105,8 ± 33,9

гіпс натрію 100 6

83,3 ± 43,9

#

98,3 ± 54,4

110,8 ± 46,1

гіпс цинку 100 6 81,7 ± 56,7 102,5 ± 42,5 112,5 ± 45,8

Примітка - достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05

Таблиця 41 - Оцінка ВП в темному відсіку білих щурів отримували селеніт натрію і селеніт цинку після ішемії мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Час перебування щурів у темному відсіку в сек.
2 день 4 день 7 день
Фіз. розчин 6 15,8 ± 7,8 14,2 ± 7,2 11,7 ± 6,7
гіпс натрію 100 6 14,2 ± 6,1 10,0 ± 6,7 # 7,5 ± 5,8 #
гіпс цинку 100 6 15,0 ± 11,7 14,2 ± 9,2 10,0 ± 8,3

Примітка - достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05

Під впливом ішемії, неврологічні порушення в контрольній групі тварин було значно. Одноразове введення селеніту натрію або селеніту цинку надавали позитивний вплив на «якість» життя тварин в постішемічному періоді. Таким чином, селеніт натрію і селеніт цинку надавали позитивний вплив на процеси відтворення пам'ятного сліду в постішемічному періоді.

Для оцінки координації рухів щурів поміщали на горизонтальний стрижень діаметром 4 см, що обертається зі швидкістю 3 об / хв. Нездатність тварин утримувати рівновагу на стрижні протягом трьох хвилин розглядали як прояв порушення координації рухів. Для вивчення показників в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після ішемії.

Результати проведених досліджень показали, що в постішемічному періоді в групі контрольних тварин зазначалося погіршення координації рухів. Гіпс цинку достовірно послаблював викликане ішемією порушення координації рухів, що проявлялося в збільшенні часу утримання щурів на обертовому стрижні. Так, в контрольних дослідах кількість тварин, утримати на обертовому стрижні протягом 3-х хвилин, склало 66,7%. При лікувальному введенні селеніту цинку підвищувався відсоток щурів, утримати на стрижні, і до кінця тижня ці показники становив 83,3%. Менш активним виявився селеніт натрію, координація рухів на його тлі практично не відрізнялася від контролю.

Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблицях 42 і 43.

Таблиця 42 - Тест на координацію рухів білих щурів отримували селеніт натрію після ішемії мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Кількість тварин, що залишилися на стрижні
2 день 4 день 7 день
Абс. % Абс. % Абс. %
Фіз. розчин 6 3 50,0 3 50,0 4 66,7
гіпс натрію 100 6 3 50,0 4 66,7 $ 4 66,7

Примітка - достовірно щодо селеніту натрію (інтактні щури), $ - р ≤ 0,05


Таблиця 43 - Тест на координацію рухів білих щурів отримували селеніт цинку після ішемії мозку

досліджувані речовини

дози,

мкг / кг

Кількість

тварин

Кількість тварин, що залишилися на стрижні
2 день 4 день 7 день
Абс. % Абс. % Абс. %
Фіз. розчин 6 3 50,0 3 50,0 4 66,7
гіпс цинку 100 6 2 33,3 3 50,0 5 83,3

Таким чином селеніти в надавали позитивний вплив на відновлення координації рухів в постішемічному періоді.

Виводи ди по главі 6

1. Гіпс натрію в дозі 100 мкг / кг при профілактичному і лікувальному введенні підвищує горизонтальну і помірно знижує вертикальну активність, зменшує рівень емоційної напруги білих щурів в постішемічному періоді. Гіпс цинку підвищує рухову, орієнтовно-дослідницьку і знижує рівень тривожності щурів перенесли тотальну ішемію мозку при його профілактичному введенні.

2. Досліджувані сполуки в дозі 100 мкг / кг істотно впливають на процеси вироблення УРПУ: збільшували тривалість латентного періоду заходу в темний відсік і час перебування в ньому. Поліпшення мнестичних функцій зазначалося як при профілактичному, так і при лікувальному введенні.

3. Гіпс натрію і селеніт цинку в дозі 100 мкг / кг покращують координацію рухів білих щурів, які зазнали впливу критичних гравітаційних перевантажень, при їх профілактичному введенні.


ВИСНОВОК

Незважаючи на досягнуті успіхи практичної кардіології в боротьбі з виникненням і наслідками серцево-судинної патології проблеми фармакологічної корекції кардіологічних захворювань залишається однією з актуальних проблем медицини. У структурі серцево-судинних захворювань одне з провідних місць займають судинні ураження мозку.

Останнім часом в практиці лікування хворих з порушеннями мозкового кровообігу набули широкого поширення антиоксиданти. Застосування антиоксидантів використовується в терапії ішемічного інсульту з метою оптимізації окислювально-відновлювальних процесів. У проведених експериментальних і клінічних дослідженнях високу антиоксидантну активність показав селенит натрію.

За даними С.М. Миколаєва селенит натрію охороняє міокардіальні клітини від руйнування, обмежує периинфарктную зону, зменшує розміри рубців. М.Д. Савіної і А.Н. Кудріним виявлено антиаритмічний ефект селеніту натрію на експериментальних моделях аритмій.

Висока ефективність селеніту натрію пов'язана з його здатністю підвищувати активність GPX. Цей фермент сприяє накопиченню глютатіону, який припиняє або обмежує процеси ПОЛ і його поширення.

Накопичено великий досвід застосування селенсодержащих з'єднань в якості харчових добавок. Однак їх дію на системний артеріальний тиск, мозковий кровотік досі не вивчено. З огляду на той факт, що селеніти є вираженими антиоксидантами, представляло інтерес вивчити їх дію на показники системної гемодинаміки і оцінити доцільність застосування в якості нейропротекторів.

Досліджувані сполуки - селеніт натрію і селеніт цинку були синтезовані на кафедрі фармацевтичної хімії ПятГФА, під керівництвом професора О.М. Вергейчік.

Предметом наших досліджень стало експериментальне вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на об'ємну швидкість МК, артеріальний тиск і ЧСС, рухову активність і емоційні реакції щурів в тесті «відкрите поле», координацію рухів тварин і на здатність до навчання в методиці пасивного уникнення.

Оскільки дослідження, що проводяться в нормальних умовах регуляції мозкового кровотоку, не завжди відповідають інтересам клініки, частину дослідів виконана при експериментальної патології. Вивчено вплив досліджуваних сполук на стійкість тварин до різних видів гіпоксії, а також на неврологічний статус і кровопостачання головного мозку в умовах його гострої ішемії.

Дослідження проведені на 236 білих щурах обох статей, масою 200 - 250 г, а також на 154 мишах масою 20 - 25 г. Як наркозу використовували хлоралгидрат в дозі 300 мг / кг.

Результати вивчення гострої токсичності показали, що ЛД 50 селеніту натрію становить 3 мг / кг, селеніту цинку - 3,75 мг / кг.

Досліджувані сполуки у вигляді водних розчинів вводили внутрішньочеревно, в дозах 30, 50, 100 мкг / кг (1/100, 1/60, 1/30 від LD 50 для селеніту натрію і 1/125, 1/75, 1/38 від LD50 для селенита цинку).

Об'ємну швидкість мозкового кровотоку реєстрували методом водневого кліренсу за допомогою платини електрода, розташованого на поверхні сагиттального синуса в області стоку синусів.

Реєстрацію АТ і ЧСС у решти тварин проводили з використанням одноразових датчиків SP-01 (США) і комп'ютерної програми Bioshell.

Рухову активність і емоційні реакції щурів вивчали в тесті «відкрите поле». Виробляли умовний рефлекс пасивного уникнення і реєстрували його відтворення. Координацію рухів оцінювали за часом утримання на обертовому стрижні.

Для створення патологічного фону, на якому вивчалася ефективність досліджуваних сполук, використовувалися різні моделі циркуляторних гіпоксій. В одній з них циркуляторную гіпоксію відтворювали двосторонньої перев'язкою загальних сонних артерій. Критерієм ефективності антигіпоксичної дії була виживаність тварин протягом 72 годин.

Другу модель ішемії мозку створювали критичними гравітаційними перевантаженнями в краніо-каудальному положенні тварин.

Нормобарической гіпоксію з гіперкапнією викликали шляхом приміщення мишей в герметично закриті банки (т.зв. «баночна гіпоксія»). У всіх випадках реєстрували час виживання тварин.

Для оцінки дії досліджуваних препаратів на динаміку розвитку постішеміческіх цереброваскулярних феноменів відтворювали ішемію мозку шляхом двосторонньої оклюзії сонних артерій протягом 10-12 хв. при зниженні САД до 40 мм рт. ст. Після ішемії і реінфузії крові в артеріальну систему тваринного здійснювали реєстрацію швидкості МК методом кліренсу водню.

Результати наших досліджень показали, що під впливом селеніту натрію кровотік в судинах мозку помітно знижується.На даному малюнку зображено динаміку зміни МК після введення селеніту натрію в дозах 30, 50, 100 мкг / кг. Плавне зниження МК спостерігається з перших хвилин введення і триває до кінця спостереження в усіх досліджуваних дозах. Найбільш виражений ефект спостерігається при введенні селеніту натрію в дозі 30 мкг / кг. Ступінь зниження кровотоку до 60 хвилині склала в середньому 53,7 ± 15,8%.

Аналогічний ефект викликає селенит цинку. Відразу після введення відзначається стійке зниження мозкового кровотоку. Зі збільшенням дози селеніту цинку ступінь зниження мозкового кровотоку зменшувалася. Так, в дозі 30 мкг / кг на 60 хвилині мозковий кровотік був нижче вихідного рівня в середньому на 39,9%, а в дозі 100 мкг / кг - на 27,4%.

Відомо, що зниження рівня артеріального тиску, а отже, і перфузіоннного тиску у хворих з ішемічним інсультом, викликає подальше погіршення ішемізованих областей мозку. Тому нейропротектори не повинні володіти вираженим гіпотензивним ефектом і не викликати істотного зміни ЧСС. У зв'язку з цим представляло інтерес з'ясувати дію селеніту натрію і селеніту цинку на АД І ЧСС.

Наші дослідження показали, що селеніт натрію і селеніт цинку не роблять істотного впливу на артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень у решти тварин. Зазначалося тенденція до зниження артеріального тиску під впливом селеніту натрію і деяке збільшення артеріального тиску при введенні селеніту цинку. Однак зміни були недостовірними.

При оцінці орієнтовно-дослідницької активності тварин в тесті «відкрите поле» нами встановлено, що при профілактичному введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг протягом 7 днів відзначалося зниження рівня емоційної тривожності, про що свідчить зменшення кількості стереотипних рухів - грумінг і болюсов. Дослідницька і рухова активність білих щурів при веденні селеніту натрію практично не змінювалася. Аналогічні результати отримані в дослідах з попереднім введенням селеніту цинку.

В ході експериментів з відтворенням (УРПУ) умовної реакції пасивного уникнення досліджувані сполуки не викликали статистично значимий вплив на процеси навчання і пам'яті у інтактних тварин. Гіпс натрію і селеніт цинку не впливають на координацію рухів у білих щурів.

Для характеристики дії фармакологічних засобів на кровообіг головного мозку при різних патологічних станах важливе значення мають дані про їх вплив на стійкість тварин до різних видів гіпоксії. Нами було вивчено вплив селеніту натрію і селеніту цинку в дозах 30, 50, 100 мкг / кг на виживаність тварин в умовах гіпоксичної гіпоксії. Отримано результати, згідно з якими селеніт натрію і селеніт цинку мають виражений атнігіпоксіческім ефектом. Найбільшу активність селеніти проявляли в дозі 30 мкг / кг. Так, селеніт натрію підвищував виживаність тварин в середньому на 22% в, а гіпс цинку на 43% порівняно з контролем.

У патогенезі органічних ушкоджень головного мозку провідне значення належить циркуляторних розладів. Представляло інтерес вивчити вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість білих щурів до циркуляторної гіпоксії, викликаної білатеральної оклюзії загальних сонних артерій. Гіпс натрію і селеніт цинку вводили внутрішньочеревно в дозах 30, 50, 100 мкг / кг за 15 хвилин до ішемії. На даному малюнку представлені дані про вплив селеніту натрію і селеніту цинку на стійкість білих щурів до циркуляторної гіпоксії в процентному відношенні до контролю. Результати контрольної серії дослідів показали, що більшість тварин загинуло протягом першої доби. Через 72 години після операції в контрольній групі число тих, що вижили тварин склало 37,5%. Нами встановлено, що досліджувані сполуки мають антигипоксической активністю.

Гіпс натрію ефективніший при його введення в дозі 50 мкг / кг (виживаність тварин до кінця спостереження склала 62,5%, що перевищує контрольні значення на 25%). Аналогічний ефект виявляв селенит цинку.

З огляду на антигипоксическую активність селеніту при циркуляторної гіпоксії представляло інтерес вивчити їх дію на стійкість організму тварин до критичних гравітаційним навантаженням, краніокаудальном вектор яких викликає порушення кровопостачання головного мозку, що протікає по типу ішемічної гіпоксії.

Центрифугування тварин проводили в 2 етапи. На першому етапі дослідження щури піддавалися впливу перевантажень величиною 16 g протягом 10 хвилин, після чого центрифугу зупиняли на 5 хвилин. На другому етапі досліджень, після закінчення 5 хвилинної перерви, тварини піддавалися перевантажень величиною 21 g протягом 5 хвилин.

При профілактичному введення селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг на 1 етапі досліджень кількість тих, що вижили тварин перевищувало контроль на 12,5%. На другому етапі на 20%.

Гіпс цинку виявляв більш виражений захисний ефект: на першій стадії експерименту не загинуло жодної тварини. Виживання щурів склала 100%. На другому етапі досліджень кількість тих, що вижили тварин перевищувало контроль 40%.

У кожній групі тварин в подальшому проводилося тестування психоневрологічного статусу.

Протягом 3 хвилин перебування щури в «відкритому полі» реєстрували рухову активність (число пересічених секторів), орієнтовно-дослідницьку активність (вставання на задні лапи) і емоційний статус (кількість стереотипних рухів - грумінг, дефекацій, урінаціі, а також число відвідувань центрального сектора ).

Дослідження проводили на другий, четвертий і сьомий день після перенесених перевантажень. Це дозволило стежити за динамікою змін психоневрологічного статусу ішемізізованних тварин. Отримані експериментальні дані представлені в таблиці.

У постішемічному періоді в контрольних дослідах відзначалося зниження рухової активності, про що свідчить зменшення числа пересічених секторів, зниження пізнавальної активності (зменшення числа вертикальних стійок) щурів і їх емоційного стану (зменшення актів грумінгу і числа дефекацій). Ці порушення найбільш яскраво виявлялися протягом перших днів після ішемії, а в наступну добу кілька слабшали. Гіпс натрію і селеніт цинку підвищували рухову активність щурів, які перенесли ішемію мозку. Більш виражений ефект надавав селеніт цинку, під впливом якого значно збільшувалася кількість пересічених тваринами секторів. Профілактичне введення селеніту натрію зменшувало у щурів число вертикальних стійок, стереотипних рухів і не змінювало число дефекацій в порівнянні з контролем, що свідчить про деяке зниження дослідницької та емоційної активності. Гіпс цинку підвищував орієнтовно-дослідницьку активність (збільшував число стійок) і знижував рівень емоційної напруги (зменшував акти грумінг і дефекацій) щурів в постішемічному періоді. Кращим виразом зменшення страху у тварин є відвідування ними центрального сектора, яке в наших дослідах поступово ставало більш інтенсивним від досвіду до досвіду.

При виробленні УРПУ після ішемії мозку відзначалося погіршення здатності до навчання щурів, що виражалося в зменшенні латентного періоду заходу в темний відсік і в збільшенні тривалості перебування в ньому. Гіпс натрію і селеніт цинку при профілактичному введенні роблять позитивний вплив на процеси навчання і відтворення пам'ятного сліду: значно збільшують латентний період заходу в темний відсік і зменшують час перебування в ньому.

Наступним етапом досліджень була оцінка координації рухів щурів пробою з «обертовим стрижнем». Нездатність тварин утримувати рівновагу на стрижні протягом трьох хвилин розглядали як прояв порушення координації рухів. Для вивчення координації рухів в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після ішемії.

Проведені експерименти показали, що в постішемічному періоді в групі контрольних тварин зазначалося погіршення координації рухів. Гіпс цинку і селеніт натрію значно послаблювали викликане ішемією порушення координації рухів, що проявлялося в збільшенні часу утримання щурів на обертовому стрижні. Так, в контрольних дослідах кількість тварин, утримати на обертовому стрижні протягом 3-х хвилин, склало 42,9%. При попередньому введенні селеніту натрію і селеніту цинку значно підвищувався відсоток щурів, утримати на стрижні, і до кінця тижня ці показники склали відповідно: 62,5% і 54,6%.

Таким чином, результати аналізу психоневрологічного статусу в постішемічному періоді показали, що у тварин спостерігається зміна всіх компонентів поведінки: зниження горизонтальної та вертикальної рухової активності, дефіцит емоційності, недостатність мнестичних функцій і порушення координації рухів. Досліджувані сполуки при профілактичному введенні надають нейропротекторну дію в умовах гострого порушення мозкового кровообігу, знижують смертність тварин, позитивно впливають на рухову і дослідницьку активність, зменшують тривожність, мають антиамнестичну ефектом, покращують координацію рухів.

При введенні досліджуваних сполук після ішемії мозку (лікувальна дія) нами також встановлена ​​їх здатність усувати неврологічний дефіцит і покращувати вищі інтегративні функції ЦНС в постішемічному періоді. Однак лікувальні дози були менш ефективними, ніж профілактичні.

Відомо, що в постішемічному періоді яскраво проявляються цереброваскулярні феномени: спочатку спостерігається короткий період гіперперфузії, а потім мозковий кровотік падає значно нижче норми.

Особливий інтерес представляє друга фаза постішеміческого періоду. За даними В.А. Неговського, В.Г. Красильникова фаза невідновлення мозкового кровотоку може посилювати пошкодження мозкової тканини.

Гіпс натрію істотно змінює динаміку розвитку постішеміческіх цереброваскулярних феноменів, зменшує ступінь прояву 1 фази і гальмує розвиток фази невідновлення мозкового кровотоку. Однаковою за характером і величиною була реакція судин мозку на введення селеніту цинку.

Таким чином, в порівняльному аспекті обидва з'єднання представляють безсумнівний інтерес в якості засобів, для корекції церебральних ишемий - найпоширенішого зараз виду судинної патології мозку. Особливості їх захисної дії, ймовірно, обумовлені поєднанням в спектрі фармакологічної активності ряду ефектів - антиоксидантної, антигіпоксичної, анксиолитического і ноотропного.


ЗАГАЛЬНІ ВИСНОВКИ

1. Гіпс натрію і селеніт цинку викликають зниження мозкового кровотоку у наркотізірованних тварин. Зі збільшенням дози сполук ступінь зниження кровотоку зменшується

2. Досліджувані сполуки не роблять істотного впливу на системний артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень у решти тварин

3. Тривале профілактичне введення селеніту натрію і селеніту цинку викликає зниження рівня емоційної тривожності і не впливає на рухову і дослідницьку активність, координацію рухів і процеси навчання і пам'яті у інтактних тварин

4. Гіпс натрію і селеніт цинку мають виражений антигипоксическим ефектом: підвищують стійкість тварин до гіпоксичної і циркуляторної гіпоксії

5. В умовах гострої судинної патології мозку селенит натрію і селеніт цинку знижують смертність тварин, підвищують рухову і дослідницьку активність, зменшують тривожність, покращують процеси навчання і пам'яті, координацію рухів.

6. Попереднє введення селеніту натрію і селеніту цинку до ішемії мозку зменшує ступінь прояву фази гіперперфузії і гальмує розвиток фази невідновлення мозкового кровотоку


СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ

1. Скворцова, В.І. Лікування і профілактика ішемічного інсульту / Скорцова В.І., Стаховська Л.В. // Діагностика і терапія в клініці внутрішніх хвороб: лекції для практикуючих лікарів, 10 Рос. нац. конгр. - М., 2004. - С. 142-160.

2.Кузнецов, Г.П. Клінічне значення селенодефеціта у хворих з серцево-судинними захворюваннями самарського регіону і його корекції препаратом «Cелена» / Г.П. Кузнецов, П.Л. Лебедєв // т фіз. і клинич. фармакологія. - 1995. - Т.58, №5. - С. 26-28.

3. Миколаїв, С.М. Вплив селеніту натрію на перебіг експериментального інфаркту міокарда / С.М. Миколаїв // 3 Всерос. з'їзду фармацевтів (3, 1975, Свердловськ). - Свердловськ, 1975. - С. 346-347.

4. Савіна, М.Д. Перспектива пошуку антиаритмічнихзасобів з протиішемічну ефектом, серед селенсодержащих речовин / М.Д. Савіна, А.Н. Кудрін // Фармація. - 1992. - Т.12, №1. - З 39 - 46.

5. Stryer, L. Biochemistry / L. Stryer - 4th ed San Francisco: Freeman, 1995. - P. 731

6. Tarp, U. Selenium in rheumatoid arthritis: a review / U.Tarp // Analist. - 1995. Vol. 120. - P. 877-881

7. Artbur, JR New metabolic roles for selenium / JR Artbur // Proc. Nutr. Soc. -1994. - Vol. 53. - P 615-624.

8. Блінова, А.М. Регуляція мозкового кровообігу / А.М. Блінова, М.Є Маршак // Фізіологічні механізми регуляції мозкового кровообігу. - Л., 1963. - С. 2-41.

9. Верещагін, Н.В. Патологія вертобазіллярних систем і порушення мозкового кровообігу / Н.В. Верещагін. - М .: Медицина, 1980. - 311 с.

10. Гаєва, М.Д. Фармакологія мозкового кровообігу / М.Д. Гаєв. - М .: Медицина, 1980. - 190 с.

11. Демченко, І.Т. Кровопостачання спить мозку / І.Т. Демченко. - Л .: Наука, 1983. - 174 с.

12. Воробйова, Е.А. Анатомія і фізіологія: Учеб. для учнів мед. і фармац. інститутів / Воробйова Є.А., Губарь А.В., Сафьяннікова Є.Б. - М .: Медицина, 1981. - 416 с.

13. Москаленко, Ю.Є. Про взаємозв'язок мікро - та макрорівні в функціональної організації діяльності судинної системи головного мозку / Ю.Є. Москаленко // фізіолого. журн. СРСР ім. Сеченова. - 1984. - Т. 70, №11. - С. 1484-1497.

14. Мотавкін, П.А. Гістофізіологія судинних механізмів мозкового кровообігу / Мотавкін П.А., Черток В.М. - М .: Медицина, 1980. - 188 с.

15. Угрюмов, В.М. Регуляція мозкового кровообігу / Угрюмов В.М., Теплов С.І., тиглі Г.С. - Л .: Медицина, 1984. - 54 с.

16. Колоссовскій, Б.Н. Циркуляція крові в мозку / Б.М. Колоссовскій. - М .: Медгиз, 1951. - 372 с.

17. Мчедлішвілі, Г.І. Механізми регуляції мозкового кровообігу / Г.І. Мчедлішвілі // Успіхи фізіолого. наук. - 1980. - Т. 12, №3. - С. 75-83.

18. Фізіологія ЦНС: Учеб. допомога. - Ростов н / Д: Фенікс, 2000. - 450 с.

19. Davis Reginald, J. Role of oxigen free radicals in focal brain ischemia / Davis Reginald J., Burcley Gregory B., Traysman Richard J. // Cerebral Hyperemia and Ischemia: From Standpoint Cerebral Blood Vol .: Proc. Sattelsump., Brain Sec. 4 th Word Congr. Microcirc., Osaca, 1-2 Aug., 1987. - Amsterdam, 1988. - P. 151-155.

20. Балуєва, Т.В. До питання про центральну норадренергічну регуляції мозкового кровообігу / Т.В. Балуєва // фізіолого. журн. СРСР ім. Сеченова. - 1983. - №7. - С. 913-917.

21. Анатомія людини: У 2 т. / Под ред. М.Р. Сапіна. - М .: Медицина, 1987. - Т.2. - 479 с.

22. Бородуля, А.В. Холинергическая іннервація судин підстави головного мозку / А.В. Бородуля, Є.К. Плечкова // Журн. Невропатол. і психіатрії. - 1976. - №7. - С. 707-714.

23. Красильников, В.Г. Адренергічні механізми в регуляції артеріальної і венозної частини судинного русла головного мозку / В.Г. Красильников // Міжнар. сімпоз. по регуляції ємнісних судин (3; 1977; Москва): тез. доп. - М., 1977. - С. 74-80.

24. Купріянов, В.В. Нервовий апарат кровоносних судин головного мозку / Купріянов В.В., Жіца В.Т. - Кишинів: Штмінца, 1975. - 225 с.

25. Мірзоян, Р.С. Нейрохімічний контроль мозкового кровообігу / Р.С. Мірзоян // Фармакологія та токсикологія. - 1983. - №4. - С. 5-15.

26. Москаленко, Ю.Є. Реактивність мозкових судин: фізіологічні основи, критерії оцінки, інформативна значимість / Ю.Є. Москаленко // фізіолого. журн. СРСР ім. Сеченова. - 1986. - Т. 72, №8. - С. 1115-1122.

27. Мчедлішвілі, Г.І. Фізіологічні механізми регулювання мікроциркуляції в корі мозку / Г.І. Мчедлішвілі, Д.Г. Бералідзе // фізіолого. журн. СРСР ім. Сеченова. - 1984. - Т. 70, №11. - С. 1476-1483.

28. Таша, Ш.С. Про адаптивної функції симпатичної іннервації мозкових судин при швидких змінах системного артеріального тиску / Ш.С. Таша // Бюл. ЕКСПІР. біології і медицини. - 1980. - Т. 90, №11. - С. 543-546.

29. Siesje, BK Mechanisms of ischemic damage to neurons, glial cells and vascular tissue / BK Siesje, Maj-Lie. Smith // Regul. Mech. Neuron. Vessel Commun. Brain: Prog. NATO Adv. Res. Workshop, Salo, sepr. 3-8, 1988. - Berlin, 1989. - P. 209-223.

30. Порівняльна характеристика деяких гемодинамічних і біохімічних показників постішеміческого періоду в залежності від режимів аутогемоперфузіі мозку / М.Д Гаєв [и др.] // фізіолого. журн. СРСР ім. Сеченова. - 1991. - №77. - С. 76-80.

31. Burnstoer, X. Comprative studies of purinergic nerves / X. Burnstoer // J. Exp. Zool. - 1975. - Vol. 194, № 1. - P. 103-133.

32. Демченко, І.Т. Метаболічні фактори регуляції / І.Т. Демченко // Фізіологія кровообігу. Регуляція кровообігу. - Л .: Наука, 1986. - С. 167-193.

33. Faraci, FM Myogenic mechanisms in the cerebral circulation / FM Faraci, GL Bumbach, DD Heisad // J. Hypertens. - 1989. - Vol. 7, № 4. - P. 61-64.

34. Mechanisms of drug-induced vasodilatation / Gurney Alison M. [et al.] // J. Pharm. and Pharmacol. - 1994. - Vol. 46, № 4. - P. 242-251.

35. Москаленко, Ю.Є. Принципи вивчення судинної системи головного мозку людини / Москаленко Ю.Є., Хилько В.А. - Л .: Наука, 1984. - 68 с.

36. Москаленко, Ю.Є. Мозковий кровообіг: фізико-хімічні прийоми вивчення / Москаленко Ю.Є., Бекетов О.І., Орлов Р.С. - Л .: Наука, 1988. - 159 с.

37. Mc. Calden, T. The role of the carotid chemoreceptors in the cerebrovascular hypercapnic dilatation / T. Mc. Calden, C. Rosendorff // Acta Neurol. Scand. - 1977. - Vol. 56, № 64. - P. 292-293.

38. Бархатова, В.П. Нейротрансмітерної організація рухових систем головного і спинного мозку в нормі та патології / В.П. Бархатова, І.А. Завалишин // Журн. неврології та психіатрії. - 2004. - №8. - С. 77-82.

39. Кулинский, В.І. Предача і трансдукція гормонального сигналу в різні частини клітини / В.І. Кулинский // Соровский освітній журн. - 1997. - №8. - С. 14-19.

40. Ткачук, В.А. Молекулярні механізми нейроендокринної регуляції / В.А. Ткачук // Соровский освітній журн. - 1998. - №6. - С. 16-20.

41. Скулачов, В.П. Явища запрограмованої смерті. Мітохондрії, клітини і органи: роль активних форм кисню / В.П. Скулачов // Соровский освітній журн. - 2001. - Т. 7, №6. - С. 4-10.

42. Ковальов, Г.В. Пошук речовин, що активують ГАМК-ергічні систему, новий напрямок у створенні антигіпертензивних засобів / Г.В. Ковальов, І.М. Тюренков // Фармакологія та токсикологія. - 1989. - №1. - С. 5-11.

43. Тюренков, І.М. Роль ГАМКергіческой системи мозку в регуляції кровообігу / І.М. Тюренков, В.І. Перфілова // т фіз. і клинич. фармакологія. - 2001. - Т. 664, №6. - С. 68-72.

44. Baranano, DE Atipical neural messengers / DE Baranano, CD Ferris, SH Snyder // Treds Neurosci. - 2001. - Vol. 24. - P. 99-106.

45. Bunin, MA Paracrine neurotransmission in the CNS: involment of 5-HT / MA Bunin, RM Wightman // Treds Neurosci. - 1999. - Vol. 22. - P. 377-382.

46. ​​Кулинский, В.І. Нейротрансмітери і головний мозок / В.І. Кулинский // Соросівський освітній журн. - 2001. - Т. 7, №6. - С. 11-16.

47. Саратіков, А.С. Експериментальна та клінічна фармакологія мозкового кровообігу / Саратіков А.С., Белоспасов В.В., Плотніков М.В. - Томськ: Вид-во Томс. ун-ту, 1979. - 248 с.

48. Сіхарулідзе, Н.В. Роль ацидозу в розвитку постішеміческого набряку мозку у кроликів / Н.В. Сіхарулідзе, Г.І. Мчедлішвілі // Патол. фізіологія і т фіз. терапія. - 1987. - №3. - С. 47-49.

49. Alberti, K. The hydrogen ion normal metabolism: a review // Metabolic acidosis. (Ciba found. Symposium 87) / Alberti K., Cuthbert C. - London, 1982. - P. 1-19.

50. Meyer, JS Central neurogenic control of cerebral blood flow / JS Meyer, T.Teraura, K. Secamoto // Neurology. - 1971. - Vol. 21. - P. 247-262.

51. Мірзоян, Р.С. Нейрохімічний контроль мозкового кровообігу / Р.С. Мірзоян // Фармакологія та токсикологія. - 1983. - №4. - С. 5-15

52. Корабльов, М.В. Протигіпоксичну кошти / Корабльов М.В., Лукієнко П.І. - Мінськ: Білорусь, 1976. - 128 с.

53. Плотніков, М.В. Антиокислювальні ефекти антигипоксантов при ішемії мозку / М.В. Плотніков, Е.А. Кобзєва, Т.М. Плотникова // Бюл. ЕКСПІР. біології і медицини. - 1992. - №5. - С. 504-506.

54. Потапов, А.А. Результати масспектрометріческіх досліджень напруги кисню, вуглекислого газу і кровотоку в тканини мозку у нейрохірургічних хворих / Потапов А.А., Сіровскій Е.Б., Маневич О.З. // Зап. нейрохірургії. - 1979. - №1. - С. 20-26.

55. Салаликін, В.І. Гіпоксія головного мозку (клініка і лікування) / Салаликін В.І., Арутюнов В.В. - М .: Медицина, 1978. - 196 с.

56. Mellander, S. Myogenic mechanisms in local vascular control / S. Mellander // Int. Congr. Physiol. Sci. "31, 1989, Helsinki". - Oulu, 1989. - P. 7-8.

57. Березовський, В.А. Гіпоксія і індивідуальні особливості організму / В.А. Березовський - Київ: Наук. думка, 1978. - 279 с.

58. Петров, І.Р. Кисневе голодування мозку (експериментальні матеріали) / І.Р. Петров - Л .: Медгиз, 1949. - 48 с.

59. Динаміка розвитку постішміческіх цереброваскулярних феноменів в умови перфузії мозкових судин стабільним обсягом крові / М.Д. Гаєв [и др.] // Патол. фізіологія і т фіз. терапія. - 1982. - Вип. 4. - С. 61-64.

60. Орлов, Р.С. Механізми розслаблення гладких м'язів судин / Р.С. Орлов // Актуальні питання фізіології кровообігу. - Сімферополь, 1980. - С. 117-123.

61. Evans, MC The effect of local changes in calcium concentration on hypotalamic blood flow in the anastesiel rabbit / MC Evans, RA Linton, IG Cameron // Cereb. blood flow and metabolism. - Munskgaard, 1977. - P. 388- 389.

62. Weibenger, J. Cerebral blood flow in the evolution of infarction following unilateral carotid artery oclusion in mongolian gerbils / J. Weibenger, Nieves-Rosa J. // Stroke. - 1987. - Vol. 18, № 3. - P. 612-615.

63.Мітагварія, Н.П. Функціональне значення окремих ланок механізму регуляції мозкового кровообігу / Н.П. Мітагварія // Фізіолологія, патофізіологія та фармакологія мозкового кровообігу: тез. доп. 2 Всесоюз. конф. 10-12 нояб., 1988 г. - Тбілісі, 1988. - С. 123.

64. Мотавкін, П.А. Гістофізіологія судинних механізмів мозкового кровообігу / Мотавкін П.А., Черток В.М. - М .: Медицина, 1980. - 188 с.

65. Напруга кисню і локальний кровотік в мозку тварин при зміні складу дихальної суміші / А.І. Селівра [и др.] // Фізіологія, патофізіологія та фармакологія мозкового кровообігу .: тез. доп. 2 Всесоюз. конф. 10-12 нояб., 1988 г. - Тбілісі, 1988. - С. 165.

66. Порівняльна характеристика деяких гемодинамічних і біохімічних показників постішеміческого періоду в залежності від режимів аутогемоперфузіі мозку / М.Д. Гаєв [и др.] // фізіолого. журн. СРСР ім. Сеченова. - 1991. - №77. - С. 76-80.

67. Іванов, К.П. Успіхи і спірні питання у вивченні мікроциркуляції / К.П. Іванов // фізіолого. журн. СРСР ім. Сеченова. - 1995. - Т. 81, №6. - С. 1-21.

68. Теплов, С.І. Гормональні фактори регуляції кровообігу / С.І. Теплов // Фізіологія кровообігу - Л., 1986. - С. 94-110.

69. Неретін, В.Я. Гормональна регуляція мозкового кровотоку / В.Я Неретін, С.В. Котов, Г.С. Молчанова // Журн. Невропатол. і психіатрії. - 1990. - Т. 90, №7. - С. 41-43.

70. Азин, А.Л. Амінергіческій контроль артерій головного мозку / А.Л. Азин // Успіхи фізіолого. наук - 1983. - Т. 14, №2. - С. 98-116.

71. Балуєва, Т.В. Про симпатическом тонусі мозкових судин / Т.В. Балуєва, Н.І. Гірс, С.І. Теплов // фізіолого. журн. СРСР ім. Сеченова. - 1982. - №5. - С. 596-600.

72. Lee, T. Direct evidence against acetylcholine as the dilatator transmitter in the cat cerebral artery / T. Lee // Europ. J. Parmacol. - 1980. - Vol. 58 - P. 393-397.

73. Mаtsuda, M. Effect of acetylcholine on cerebral circulation / M. Mаtsuda, J. Meyer, V. Deshmukh // J. Neurosung. - 1976. - Vol. 45. - P. 423-431.

74. Мітагварія, Н.П. Нейрогенний контроль регуляції мозкового кровообігу і спряженість кровотік-метаболізм-функція / Н.П. Мітагварія // фізіолого. журн. СРСР ім. Сеченова. - 1989. - Т. 75, №11. - С. 1473-1480.

75. Dopaminergic action on brain vessels. / Z. Edvinsson [et al.] // Intern. Catecholamine sump. (4; 1979, New York): abstr .... - New York, 1979. - P. 1494-1496.

76. Edvinsson, Z. Neurogenic mechanisms in the cerebrovascular bed; Autonomic nerves, amine receptors and their effects on cerebral blood flow / Z. Edvinsson // Acta physiol. Scand. - 1975. - Vol. 96, Suppl. 427. - P. 1-35.

77. Meuller, S. Effect of sympatetic nerves on cerebral vessels during seizures / S. Meuller, DD Heistand, M. Marcus // Amer. J. Physiolog. - 1979. - Vol. 237, № 2. - P. H178-H184.

78. Purves, MJ The physiology of cerebral circulation / MJ Purves - Cambridge, 1972. - 252 p.

79. Karninski, LP Potential role of Cl-HCO3 exchange in regulating vascular tone / LP Karninski // Hypertension. - 1989. - Vol. 15, № 15 - P. 104-106.

80. Логінов А.В. Фізіологія з основами анатомії людини: Підручник для фарм. інститутів / А.В. Логінов - М .: Медицина, 1983.- 495 с.

81. Селен в організмі людини / В.А. Тутельян [и др.] - М .: РАМН, 2002. - 224 с.

82. Сидельникова, В.Д. Геохімія селену в біосфері / В.Д. Сидельникова // Проблеми біогеохімії та геохімічної екології. М ..: Наука, 1999. - Т. 23.- С. 81-99.

83. Єрмаков, В.В. Біологічне значення селену / Єрмаков В.В., Ковальський В.В. - М .: Наука, 1974. - 58 с.

84. Єрмаков, В.В. Геохімічна екологія як наслідок системного вивчення біосфери / В.В. Єрмаков // Проблеми біогеохімії та геохімічної екології. - М .: Наука, 1999. - Т. 23. - С 152-182.

85. Alftban, G. The effects of selenium fertilization on glutathione peroxidase and selenoprotein PI Finland / G. Alftban // Proc. 7th Nordic Symp. On trace elements in human health and disease. Espoo, 1999. - P. 39.

86. Robinson, MF The moonstone: more about selenium / MF Robinson // J. Hum Nutr. - 1976. - Vol. 30. - P. 79-91.

87. Artbur, JR Roles of selenium in type I iodithyronine 5'-deiodinase and in thyroid hormone and iodine metabolism / Artbur JR Becrett GJ // Selenium in biology and human health / Ed. RFBurk. - New York: Springer-Verlag, 1994. - P. 93-115.

88. Reiter, R. Selenium and drug metabolism. I. Multiple modulations of mous liver enzymes / R. Reiter, A. Wendel // Biochem. Pharmacol. - 1983. - Vol. 32. - P. 3063-3067.

89. Crystal structure of formate dehydrogenase H: Catalysis involving Mo, molybdopterin, selenocysteine ​​and an Fe4S4 cluster / JC Boyington [et al.] // Science - 1997. - Vol. 275. - P. 1305-1308.

90. Molecular biology of selenium and its role in human health / BJ Lee [et al.] // Mol. Cells. - 1996. - Vol. 6. - P. 509-520.

91. Testosterone mediates expression of the selenoprotein PHGPx by induction of spermatogenesis and not by direct transcriptional gene activation / M. Maiorino [et al.] // FASEB J. - 1998. - Vol. 12. - P. 1359-1370.

92. Beck, C. The selen-mediated de-ionisation of iodophenenols: A selenium model for the mechanism of 5'-thyronine de-iodinase / C. Beck, SB Jensen, J. Reglinski // Thyroid. - 1994. - Vol. 4. - P. 1353-1356.

93. Gladysbev, VN DL-selenoprotein containg proteins in mammals / VN Gladysbev // J. Biomed. Sci. - 1999. - Vol. 6, N 3. - P. 151-166.

94. Levander, O. Selenium / O. Levander, RF Burk // Present knowledge in nutrition / Eds. EE Ziegler, LJ Filer. NY: Acad. Press, 1998. - Vol. 20. - P. 4492-4500.

95. Selenocysteine ​​lyase, a novel enzyme that specifically acts on selenocysteine: mammalian distribution and purification and properties of pig liver enzyme / N. Esaki [et al.] // J. Biol. Chem. - 1982. - Vol. 257. - P. 4386-4391.

96. Gantber, HE Metabolism of hydrogen selenide and methylated serenades / HE Gantber // Advanced in nutritional research / Ed. HH Draper. New Yeark: Plenium, 1979. - Vol. 2. - P. 107-128.

97. Mozier, NM S-adenosil-L-methionine: tioether S-methiltransferase a new enzyme in sulfur and selenium metabolism / NM Mozier, KP McConnell, JW Hoffman // J. Bol. Chem. - 1988. - Vol.263. - P. 4527-4531.

98. Bopp, BA Metabolitic rate of selected selenium compounds in laboratory animal and man / BA Bopp, RC Sonders, JW Kesterson // Drug Metab. Rev. - 1982. - Vol. 13. - P. 271-318.

99. Berri, MJ Cloning and expression of the human selenium donorprotein, the homolog of prokaryotic / MJ Berri, [et al.] // FASEB J. - 1995. - Vol. 9. - P. 286

100. Salbe, AD Selenium content of rat hair nails and other tissues is affected by concurrent exposure to toxic elements / AD Salbe, VC Morris, OA Levander // Nutr. Res. - 1993. - Vol. 13. - P. 31-36.

101. Human [74Se] selenomethionine metabolism: a kinetic model / CA Swanson [et al.] // Am. J. Clin. Nutr. - 1991. - Vol. 54. - P. 917-926.

102. Evidence for intestinal release of absorbed selenium in a form with hepatic extraction / T. Kato [et al.] // Am. J. Physiol. - 1992. -Vol. 262. - PG854-G858.

103. Gantber, HE Selenotrisulfides. Formation by the reaction of thiols with selenious acid / HE Gantber // Biochemistry. - 1968. - Vol. 7. - P. 2898.

104. Direct measurement of selenium absortion in vivo: triple-lumen gut perfusion in the concious dog / PG Reasbeck [et al.] // Proc. New Zealand Workshop on Trace Elements Dunedin, 1981. - P. 107.

105. m-RNA stability and selenocysteine ​​insertion sequence efficiency rank gastrointestinal glutathione peroxidase high in the hierarchy of selenoproteins / K. Wingler [et al.] // Eur. J. Biochem. - 1999. - Vol. 259, N 1-2. - P. 149-157.

106. Combs, GF Selenium in nutrition / GF Combs / Encyclopedia of human biology. 2nd ed. New Yeark: Acad. Press. - 1997. - Vol. 7. - P. 743-754.

107. Studies in the distribution and characteristics of new mammalian selenium-containing proteins / D. Bebne [et al.] // Analyst. - 1995. - Vol. 120. - P. 823-825.

108. Thomson, CD Selenium speciation in human body fluids / CD Thomson // Ibid. - 1998. - Vol. 123. - P. 827-831.

109. Adsorption of selenite and selenomethionine from ligatid digestive tract segments in rats / PD Wbanger [et al.] // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. - 1976. -Vol. 153. - P. 295.

110. Burk, RF Selenium in nutrition / RF Burk // World Rev. Nutr. Diet. - 1978. - Vol. 30. - P. 88-106.

111. Studies of safe maximal daily dietary selenium intake in a seleniferous area in China. I. Selenium intake and tissue selenium levels of the inhabitants / G. Yang [et al.] // J. Trace Elem. Electrolytes Health Dis. - 1989. - Vol. 3. - P. 77-87.

112. Use of selenium concentration in whole blood, serum, toenails or urine as a surrogate measure of selenium intake / MP Lonnecker [et al.] // Epidmiology. - 1996. - Vol. 7. - P. 384-390.

113. Селенобогащённие дріжджі Saccaromyces cerevisiae / Н.А. Голубкіна [и др.]. // Біотехнологія. - 1996. - № 75. - С. 52-57.

114. Effects of selenium supplementation for cancer prevention in patients with carcinoma of the skin / LC Clark [et al.] // JAMA. - 1996.- Vol. 276, N 26. - P. 1957-1963.

115. Rosenfeld, I. Selenium: geobotany, biochemistry, toxicity and nutrition / Rosenfeld I., Beath OA - NY: Acad. Press, 1964.

116. Studies of safe maximal daily dietary Se- intake in a seleniferous area in China. II. Relation between Se- intake and the manifestation of clinical signs and certain biochemical alterations in blood and urine / G. Yang [et al.] // Ibid. - 1976. - P. 123-130.

117. Yang, G. Human selenium requirements in China / G. Yang, L. Zbu, S. Liu // Selenium in biology and medicine. - Westport: AVI, 1987. - P. 589-607.

118. Studies on the relations of selenium and Keshan disease / X. Cben [et al.] // Biol. Trace Elem. Res. - 1980. - Vol. 2. - P. 91-107.

119. Burk, RF Selenium in nutrition / RF Burk // World Rev. Nutr. Diet. -1978. - Vol. 30. - P. 88-106.

120. Jobnson, RA An accidental case of cardiomyopathy and selenium deficiency / RA Jobnson, SA Bker, JT Fallon // N. Engl. J. Med. - 1981. -Vol. 304. - P. 1210-1212.

121. Association between cardiovascular death and myocardial infarction and serum selenium in a matched-pair longitudinal study / JT Salonen [et al.] // Lancet. - 1982. - Vol. 2. - P. 175-179.

122.Changes in smoking, serum cholosterol and blood pressure levels during a community-based cardiovascular death prevention program - the North Karelia Project / JT Salonen [et al.] // Am.J. Epidemiol. - 1981. - Vol. 114. - P. 81-94.

123. Iodine and selenium deficiency associated with cretinism in northern Zaire / JBVanderplas [et al.] // Am. J. Clin. Nutr. - 1990. - Vol. 52. - P. 1087-1093.

124. Selenium dependent and selenium non-dependnt GSHPx in the patients suffering from Balkan endemic nephropathy / G. Grubo-Lajsic [et al.] // Proc. Int. Symp. «Selenium in geochemistry, biology and medicine». Belgrad, 1996. - P. 69.

125. Moxon, AL Selenium poisoning / AL Moxon, MA Rbian // Physiol. Rev. - 1943. - Vol. 23. - P. 305.

126. Palmer, IS Toxicity of various selenium derivatives to chick embryos / IS Palmer, RL Arnold, CW Carlson // Poultry Sci. - 1973. - Vol. 52. - P. 1841-1844.

127. Levander, OA Dietary selenium levels needed to maintain balance in North American adults consuming self-selected diets / OA Levander, VC Morris // Am. J. Nutr. - 1984. - Vol. 39. - P. 809-815.

128. Essentiality versus toxicity some considerations in the risk assessment of essential trace elements / CO Abernatby [et al.] // Hazard assessment of chemicals / Ed. J. Saxena. Vol. 8. Washington: Taylor and Francis, 1993. - P. 81-113.

129. Про радіозахисні властивості селенсемікарбазіда / Г.Б. Абдуллаєв [и др.] // Селен в біології. - Баку, 1976. - 236 с.

130. Якубенко, А.В. Променева хвороба / А.В. Якубенко - Л., 1966. - 269 с.

131. Голубкіна, Н.А. Селен в сировоткі крові і пухлини у хворих з доброякісними і злоякісними новоутвореннями / Н.А. Голубкіна, М.Д. Алієв, Н.Є. Кушлінскій // Питання мед. хімії. - 1995. - Т. 41, №4. - С. 50 - 54.

132. Протипухлинна активність похідних селенабіціклоніда / Б.М. Бутін [и др.] // хім.-фармац. журн. - 1995. - Т. 29, №8. - С. 18-19.

133. Синтез і радіозахисний ефект похідних тіазіазолов, тіадізолінов і їх селенових аналогів / Л.П. Петров [и др.] // хім.-фармац. журн. - 1994. - Т. 28. №2 - С. 19-22.

134. Taylor EW Selenium and cellular immunity // Biol. Trace. Res. - 1995. - Vol. 49. - P. 85-89.

135. Porter JM Antioxidant therapy in the prevention of organ dysfunction syndrome and ihfection complications after trauma: early results of a prospective randomized study // Am. Surg. - 1999. - Vol. 65, N 5. - P. 478-483.

136. Про можливість регуляції вільнорадикального стану сітківки ока сполуками селену / Г.Б. Абдуллаєв [и др.] // Селен в біології. - Баку, 1974. - 159 с.

137. Абдуллаєв, Г.Б. Вивчення впливу селенсодержащих харчових екстрактів на зорову функцію при дистрофії сітківки / Г.Б. Абдуллаєв [и др.] // Селен в біології. - Баку, 1976. - 250 c.

138. Наздрюха, Л.Р. Біологічна роль мікроелементів в організмі тварин і людини / Л.Р. Наздрюха - М .: Наука. - 1977. - 184с.

139. Кудрін, А.Н. Фармакотерапія препаратами селену експериментального гепатиту / Кудрін О.М., Левшин Б.І., Мехтієв М.А. - Баку, 1982. - 221 с.

140. Венцславская, Т.А. Протиаритмічна активність нового селенопроізводного препарату / Т.А. Венцславская, Л.Л. Стажадзе, В.В. Коржова // Фармакологія та токсикологія. - 1984. - №2. - С. 38 - 41.

141. Selenium glutathione peroxidase, and platelet functions / D. Vitoux [et al.] // Ann. Biol. Clin. - 1996.-Vol. 54. - P. 181-187.

142. The enzyme glutathione peroxidase in arachidonic acid metabolism of human platelets / G. Guidi [et al.] // J. Lab. Clin. Med. - 1984. - Vol. 104. - P. 574-577.

143. Vader, CR Pulmonary prostaglandin metabolism during normobaric hyperoxia / CR Vader, MM Matbias, CL Scbatte // Prostagland. Med. - 1981. - Vol. 6. - P. 101-105.

144. Effect of sodium selenite on in vitro interactions between platelets and endothelial cells / MM Ricetti [et al.] // Int. J. Clin. Lab. Res. - 1999. - Vol. 29, N 2. - P. 80-84.

145. Левшин, Б.І. Вплив препаратів селену на деякі показники білкового жирового і вуглеводного обміну у тварин з токсичним гепатитом / Б.І. Левшин // Актуальні питання фармації Вип. 2: Зб. науч. тр. - Ставрополь, 1974. - С. 363 - 364.

146. Левшин, Б.І. Нові гепатопртекторние речовини з препаратів селену / Б.І. Левшин // Актуальні проблеми фармакології та фармації: Зб. науч. тр. - М., 1971. - С. 90 - 97.

147. Левшин, Б.І. Експериментальна фармакотерапія препаратами селену і тазолідіна токсичного пошкодження печінки: Афтореф. дис. ... д-ра. мед. наук / Б.І. Левшин - Харків, 1973. - 43 с.

148. Selenium in acute infection / K. Sammalkorpi [et al.] // Infection. - 1988. -Vol. 16, N 4. - P. 222-224.

149. Шаріпов, К.О. Роль органічних похідних селену в регуляції антиокислювальних процесів в печінці при експериментальному токсичному гепатиті / К.О. Шаріпов // Зап. біолог. мед. і фармац. хімії. - 2002. - №3. - С. 40 - 44.

150. Модуляція інфекційного процесу препаратами бромокриптина, соматотропіну і селену у мишей, аналогічний зв'язок між тяжкістю інфекційного захворювання (вірусний гепатит) і рівнями селену, соматотропіну, пролактину в крові хворих людей / Н.А. Голубкіна [и др.] // Імунологія. - 1997. - №6. - С. 27-29.

151. Ефект збагачення раціонів селеном і вітаміном Е на деякі показники імунітету у щурів / Е.Н. Трушина [и др.] // Бюл. експери. біології і медицини. - 1995. - Т. 11. №3 - С. 317-319.

152. Бернштейн, Т.Ф. Вплив молібдену і селену на деякі показники природного імунітету у кроликів / Т.Ф. Бернштейн, Т.А. Кардовіч, З.С. Клевановіч / Зб. наук. праць Вітебського мед. ін-ту, вип. 13, кн. 2. - Вітебськ, 1969. - С. 285 - 289.

153. Selenium in the testis of the rat: studies on its regulation and its importance for the organism / D. Bebne [et al.] // Ibid. - 1982. - Vol. 112. - P. 1682-1686.

154. Effect of selenium, vitamin E end antioxidants on testicular function in rats / AS Wu [et al.] // Biol. Reprod. - 1973. - Vol. 8. - P. 625-629.

155. Нежданов, А.Г. Вплив селеніту натрію на стероїдогенез у тварин / А.Г. Нежданов, С.А. Власов // Тез. докл .: наук. конф. «Мікроелементи в біології та їх застосування в сільському господарстві та медицині». - Самарканд, СамГУ, 1990. - С. 374-375.

156. Екологічні проблеми порушення сперматогенезу у спортсменів і молоді / Р.Д. Сейфуль [и др.] // Зб. науч. тр. ВНІФК. - М., 1997. - С. 322-333.

157. Levander, OA Scientific rational for the тисяча дев'ятсот вісімдесят дев'ять recommended dietary allowance for selenium / OA Levander // J. Am. Diet Ass. - 1989 - Vol. 91, N. 12. - P. 1572-1576.

158. Djujic, IS Redistribution of selenium among tissues effected by radiation / IS Djujic, O. Jozanov-Stankov // Biol. Trace Elem. Res. - 1992. - Vol. 33. - P. 197-204.

159. Кулагін, О.Л. Гепатопротекторну дію карсила, масла розторопші плямистої, препарату «Селена» при токсичному гепатиті / О.Л. Кулагін, Е.В. Кантор // Розробка, дослідження і маркетинг нової фармацевтичної продукції: Зб. науч. тр. - ПятГФА. Вип.60. - П'ятигорськ, - 2005. - С. 364 - 366.

160. Kralick, FA Method for the inhibition of the proliferation of cancer cells in a tumorsensitive to treatment with a selenodithiol by the injecthiol into the tumor of a selenodithiol such as selenodiglutathione / FA Kralick, WB Parrisb, DNWillett // USA Patent. - 1992. - N 5. - P. 852.

161. Carcinogen-induced chromosomal breakage decreased by antioxidants / RJ Sbamberger [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1973. - Vol. 70. - P. 1461-1463.

162. Rosin, MP Assessment of the use of the Salmonela mutagenesis assay to determine the influence of antioxidants on carcinogen-induced mutagenesis / MP Rosin, HF Sticb // Int. J. Cancer. - 1979. - Vol. 23. - P. 722-727.

163. Sbamberger, RJ Antioidats reduce he mutagenic effectof malonaldehyde and βpropiolacone. Partix, antioxidas and cancer / RJ Sbamberger [et al.] // Mutat. Res. - 1979. - Vol. 66. - P. 349-355.

164. Rosin, MP Inhibition of spontaneous mutagenesis in yeast cultures b selenite, selenate and selenide / MP Rosin // Cancer Lett. - 1981. - Vol. 13. - P. 7-14.

165. Lawson, T. Enhancement of the repain of carcinogen-inducted DNA damage in the human lymphocytes / T. Lawson, DF Birt // Hereditas. - 1983. -Vol. 98. - P. 249-252.

166. Combs, G. The role of selenium in nutrition / Combs G., Combs S. - New Yeark .: Acad. Press, 1986. - P. 123.

167. Clayton CC Diet and azo dye tumors: effect of diet during a period when the drug is not fed / CC Clayton, CA Baumann // Cancer Res. - 1949. - Vol.9. - P. 575.

168. Scbrauser, GN Cancer mortality correlation studies. IV. Associations with dietary intakes and blood levels of certain trace elements, notable Se-antagonists / GN Scbrauser, DA Wbite, CJ Scbneider // Bioiorg. Chem. - 1977. - Vol. 7. -P. 35.

169. Scbrauser, GN Cancer mortality correlation studies. III. Statistical association with dietary selenium intakes / GN Scbrauser, DA Wbite, CJ Scbneider // Bioiorg. Chem. - 1977. - Vol. 7. - P. 23.

170. Sbamberger, RJ Selenium distribution of human cancer mortality / RJ Sbamberger, CE Willis // Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. - 1971. - Vol. 2. - P. 211.

171. Willett, W. Prediagnostic serum selenium and risk of cancer / W. Willett, B. Polk, S. Morris // Lancet. - 1983. - Vol. 2. - P. 130-134.

172. Risk of cancer in relation to serum concentrations of selenium and vitamins Amand E / JT Salonen [et. al.] // Br. Med. J. - 1985. - Vol. 290. - P. 417-420.

173. Plasma selenium and skin neoplasma / LC Clark [et al.] // Nutr. Cancer. -1984. - Vol. 7. - P. 743-754.

174. Effect on an aqueous extract of selenium-enriched garlic on in vitro markers and in vivo efficacy in cancer prevention / J. Lu [et al.] // Carcinogenesis. - 1996. - Vol. 17. - P. 1903-1907.

175. Вплив b-каротину на засвоєння селену в нормі та патології / Голубкіна М.А. [И др.] // «Харчування і здоров'я. Біологічно активні добавки до їжі ». Тез. докл: Міжнар. Сімпоз. - М., 1996. - С. 36.

176. Кудрявцева, Л.А. Вплив селеніту натрію і вітаміну Е на тварин: Афтореф. дис. ... д-ра. мед. наук / Л.А. Кудрявцева - М., 1967. - 21 с.

177. Welsb, SO The protective effect of vitamin E and selenium against methylmercury toxicity in the Japanese quail / SO Welsb, JH Soares // Nutr. Rep. Int. - 1976. - Vol. 13. - P. 43.

178.Вплив селену на ферменти метаболізму ксенобіотиків печінки щурів / Л.В. Кравченко [и др.] // Зап. мед. хімії. - 1991. - т.37, вип. 5. - С. 73 - 76.

179. Вплив селену на освіту канцерогенних N- нітрозомінов / В.П. Дєрягіна [и др.] // Зап. живлення. - 1996. - №3. - С. 31-33.

180. Інгібіруещее дію селену на ендогенний синтез N- нитрозосоединений / С.А. Хотіміченко [и др.] // Зап. живлення. - 1997. - №4. - С. 16-18.

181. Вплив селену на ендогенний синтез нитрозоаминов і токсичну дію нітритів у щурів / О.М. Мамаєва [и др.] // Зап. живлення. - 1994. - №4. - С. 32-34.

182. Burcк, RF Ethane production and liver necrosis in rats afther administration of drags and other chemicals / RF Burcк, JM Lane // Toxicol. Appl. Pharmacol. - 1979. - Vol. 50. - P. 467.

183. Parizek, J. The protective effect of smoll amounts of selenite in sublimate intoxication / J. Parizek, I. Ostadalova // Separatum Experientia. - 1967. - Vol. 23. - P. 143.

184. Selenium relation to decreased toxicity of methylmercury added to diets containing tuna / HE Gantber [et al.] // Science. - 1972. - Vol. 23. - P. 1122.

185. Sell, JL Influence of selenium on toxicity and metabolism of methylmercury in chicks and quail / JL Sell, FG Horani // Ibid.- 1987 - Vol. 14. - P. 439.

186. El-Begearmi, MM A mutual protective effect of mercury and selenium in Japanese quail / MM El-Begearmi, ML Sunde, HE Ganter // Poultry Sci.- 1977. - Vol. 56. - P. 313.

187. Holmberg, RE Interrelationships of selenium, cadmium and arsenic in mammalian teratogenesis / RE Holmberg, VH Ferm // Arch. Environ. Health.- 1969. - Vol. 18. - P. 873.

188. Moxon, AL The effect of arsenic on the toxicity of seleniferous grains / AL Moxon // Science. - 1938. - Vol. 88. - P. 81.

189. Cban, S. The role of copper, molybdenum, selenium and zink in nutrition and health / S. Cban, B. Gerson, S. Subramaniam // Clin. Lab. Med. - 1998. -Vol. 18, N 4. - P. 673-685.

190. Amer, MA Supplemental copper and selenium for calves: effects upon ceruloplasmin activity and liver copper concentration / MA Amer, GJ St. Laurent, GJ Brisson // Can. J. Physiol. Pharmacol. - 1973. - Vol. 51. - P. 649.

191. Дослідження антиканцерогенних властивостей мікроелемента селену в санітарно-гігієнічному експерименті / В.А. Книжників [и др.] // Гиг. і сан. - 1993. - №7. - С.54-57

192. Керівництво з експериментального (доклінічного) вивчення нових фармакологічних речовин / Под ред. В.П. Фісенко [и др.] - М .: ІАА «Ремедіум», 2000. - С. 220 - 224.

193. виміряти, Н.Ф. Параметри токсикометрії промислових отрут при одноразовому впливі: Довідник / виміряти Н.Ф., Саноцкий І.В., Сидоров К.К. - Л .: Медицина, 1977. - С. 196 - 197.

194. Демченко, І.Т. Вимірювання органного кровотоку за допомогою водневого кліренсу / І.Т. Демченко // фізіолого. журн. -1981. - Т.67, №1. -З. 178-183.

195. Гаєва, М.Д. Фізіологія, патофізіологія та фармакологія мозкового кровообігу / М.Д. Гаєв. - Єреван, 1984. - С. 40-41.

196. Івашов, М. Н. Вивчення центральної гемодинаміки з використанням комп'ютерної програми «BEAT» / М.Н. Івашов, Т.А. Лисенко, В.А. Коршунов // Людина і ліки: Тез. доп. 4 Ріс. нац. конгр. 2-6 квіт. 1997р. - М, 1997. - С. 263.

197. Багаторазові вимірювання параметрів системної гемодинаміки у решти щурів / О.С. Медведевх [и др.] // фізіолого. журн. СРСР. - 1986. - Т.72, №2. - С. 253-256.

198. Маркель, А.Л. До оцінки основних характеристик поведінки щурів в тесті "відкрите поле" / А.Л. Маркель // Журн. вищ. нервн. діяльності. - 1981. - Т.31, вип. 2. - С.433-443.

199. Маркель А.Л. Метод комплексної реєстрації поведінкових і вегетативних реакцій у щурів при проведенні тесту "відкрите поле" / А.Л. Маркель, Р.А. Хусаїнов // Журн. вищ. нервн. діяльності. - 1976. - Т.31, вип. 6. - С.345-353.

200. Маркель, А.Л. Факторний аналіз поведінки щурів в тесті відкритого поля / А.Л. Маркель, Ю.К. Галактіон, В.М. Єфімов // Журн. вищ. нервн. діяльності ім. Павлова. - 1988. - Т.33, Вип.5. - С. 855-863.

201. сірчаної, Л.Н. Елементи експериментальної фармакології / сірчаної Л.Н., Гацура В.В. - М., 2000. - 352 с.

202. Гацура, В.В. Методи первинного фармакологічного дослідження біологічно активних речовин / В.В. Гацура - М .: Иностр. лит., 1974.- 142 С.

203. Буреш, Я Методики і основні експерименти з вивчення мозку і поведінки / Буреш Я., Бурешова О., Х'юстон Дж. П. - М .: Вища. шк., 1991. - 398 с.

204. Гаєва, М.Д. Використання гравітаційних перевантажень в якості скринінгової методики дослідження нових біологічно активних речовин / М.Д. Гаєв // Фармакологія та токсикологія. - 1986. - №3. - С. 101 - 102.

:)

  • Висновки до розділу 4
  • АТ мм рт. ст. ССМ

  • Скачати 220.49 Kb.