Використання гліцину для оцінки метаболізму білків






    Головна сторінка





Дата конвертації04.07.2017
Розмір2.36 Kb.
ТипСтаття

[15 N] гліцин був першим стабільним ізотопом, який застосували для вивчення обміну білка in vivo. Суть методу полягає в тому, що, якщо [15 N] гліцин вводити з постійною швидкістю (d *), зміст 15 N в мочевине сечі досягає постійної величини через 48-72 годину.

Було зроблено припущення, що азот гліцину рівномірно розподіляється в тканинах організму, які представляють собою зони, що відповідають за метаболізм азоту. Отже, частина введеної дози 15 N (і *), яка в підсумку виділяється з організму, дорівнює частині «метаболічного пулу азоту», екскретіруемоі у вигляді сечовини (U): u * / d * = U / Q.
Таким чином, оборот білка в організмі в цілому (Q) можна обчислити, визначаючи зміст 15 N в мочевине сечі за формулою: Q = U / (u * / d *).

Якщо допустити, що вміст азоту в організмі - величина постійна, тоді кількість N, що надходить в загальний пул азоту, тобто сума азоту, що надходить з їжею (I), і азоту, який утворюється при розпаді білка (В), дорівнює кількості N, який залишає пул і матеріалами, що витрачаються як на синтез білка (S), так і на окислення сечовини (U). Значить, B = QI і S = QU.

Гліцин в оцінці метаболізму білків

Навіть з урахуванням точності і чутливості методу изотопной мас-спектрометрії (IRMS), використовуваного для визначення 15 N, є складність оцінки балансу азоту, пов'язані з існуванням ряду недоведених положень.

Наприклад, поняття єдиного «метаболічного пулу азоту» умовно, тому що підтверджено анатомічне та біохімічне поділ загальної кількості азоту гліцину:
(1) оскільки гліцин погано проникає через клітинні мембрани, не можна говорити про рівновагу його рівня в плазмі і тканинах (наприклад, в еритроцитах);
(2) не можна стверджувати, що аміно-N-rpynna гліцину витрачається, розподіляючись серед 20 вільних амінокислот однаковим чином.

Щоб подолати зазначені труднощі, деякі дослідники використовують суміш декількох 15N-мічених амінокислот. Крім того, оскільки метод вимагає збору сечі протягом 48 год, були зроблені спроби використовувати накопичення 15 N в аміаку сечі (іншому кінцевому продукті білкового метаболізму). Поки ж використання будь-якого з попередників призводить до різних значень Q.