Генетично модифіковані миші в вивченні серцево-судинних захворювань. трансгенні миші






    Головна сторінка





Дата конвертації04.10.2017
Розмір4.02 Kb.
ТипСтаття

Технологія створення генетично модифікованих мишей внесла величезний внесок у дослідження патогенезу ССЗ. Миша - невелика тварина з коротким гестаційним періодом (21 день); між людиною і мишею виявлено разючу подібність молекулярних процесів, які регулюють розвиток і функцію серцево-судинної системи.

У обох видів в розвитку серця і судин беруть участь одні й ті ж гени і сигнальні шляхи. У зв'язку із завершенням розшифровки геномів миші і людина,) стали можливими порівняльні генетичні дослідження. Генетично модифіковані миші є основною експериментальною моделлю для вивчення генетики ССС, біології розвитку і її фізіології.

Звичайно, є певні обмеження для використання мишачої моделі у вивченні ССЗ, проте завдяки простоті генетичних маніпуляцій З мишами модель вважається стандартною стартовим майданчиком для перевірки гіпотез, і ото випереджує експерименти на більших тварин. У цьому розділі коротко викладено чотири принципові підходи до генетичної модифікації мишей: трансгенні миші; миші з делецией гена, або нокаутпие миші; умовно нокаутні миші і дослідження по фізіології миші.

трансгенні миші

Створення трансгенних мишей відбувається за чотири етапи: клонування обраного гена; злиття цього гена з транскрипционной регуляторної послідовністю, в якій запрограмована його експресія в усіх тканинах миші або тільки в певних тканинах; мікроін'єкції очищеного трансгена в чоловічій пронуклеус зиготи; реимплантация ін'єктувати ембріона ложноберемеппой сурогатної матері.

Введений трансгени випадковим чином вбудовується в хромосому заплідненого ембріона, в результаті розвивається первинне трансгенну тварина лінії, яка експрессірует введений трансгени і перелається його 50% свого потомства. Порівняльні дослідження можна проводити між трансгенних мишей і однопометнимі нетрансгеннимі тваринами, службовцями контролем. Отримання первинних трансгенних мишей в даний час стало рутинною процедурою в багатьох лабораторіях, яка зазвичай виконується менш ніж за 1 міс. Аналогічні підходи застосовують для створення трансгенних кроликів, щурів і свиней.

Удосконалення описаних методів допомогло створити більш складні моделі трансгенних мишей. Якщо клітинно специфічні промотори програмують експресію трансгена виключно в кардіоміоцитах (КМЦ), енлотеліальних і судинних ГМК, то можна створити трансгенну миша з обмеженою експресією перенесеного тепа в ССС.

Надлишкова експресія трансгена підсилює функції, але існує можливість усунення функції якого-небудь одного гена за рахунок надлишкової експресії домінантно-негативного мутанта цього гена, оскільки кодований ним білок буде перешкоджати функціонуванню білка дикого типу. За допомогою простого лікарського препарату типу тетрациклін і системи tet-operon можна включати або вимикати експресію трансгена.
На таких моделях трансгенних мишей можна визначати точний час експресії, а також порівнювати фенотип трансгени у включеному і вимкненому стані на одному і тому самому тварину.

- Читати далі "Методи відключення гена. Умовно нокаутні миші"


Зміст теми "Генна терапія серцево-судинних захворювань":
1. Протеоміка. хроматографія білків
2. Генетично модифіковані миші в вивченні серцево-судинних захворювань. трансгенні миші
3. Методи відключення гена. Умовно нокаутні миші
4. Вивчення серця на лабораторних мишах. Перенесення генів - трансфекція генів
5. Вектори для перенесення генів. Ретровіруси і аденовіруси як векторів
6. Адено-асоційований вірус (AAV). Катіонні ліпіди в якості векторів
7. Вивчення серцево-судинних захворювань на тварин. Перенесення генів в соматичні клітини тварин
8. Генна терапія серцево-судинних захворювань. Дослідження генної терапії в кардіології
9. Генетичні чинники серцево-судинних захворювань. Спадкова схильність в кардіології
10. Аномалії хромосом людини. анеуплоїдія

  • Створення трансгенних мишей
  • Введений трансгени
  • Удосконалення описаних методів
  • Надлишкова експресія трансгена