Фармацевтична хімія стероїдних гормонів






    Головна сторінка





Скачати 111.38 Kb.
Дата конвертації26.03.2017
Розмір111.38 Kb.
Типдиплом

зміст

Вступ

Глава 1. Стероїдні гормони

1.1 Поняття і синтез

1.2 Ефіри стероїдних гормонів

1.3 Похідні стероїдних гормонів

Глава 2. Андрогенние гормони

2.1 Історія

2.2 Тестостерон-пропіонат

2.3 Тестостерон-енантат

2.4 Метилтестостерон

2.5 метиландростендіол

2.6 Визначення дійсності препаратів андрогенів

Глава 3. Естрогенні гормони

3.1 Історія

3.2 Естрадіол-монобензоат

3.3 Естрадіол-дипропіонат

3.4 Визначення дійсності препаратів естрогенів

Глава 4. Гестагенні гормони

4.1 Історія

4.2 Прогестерон

4.3. прегнин

4.4 Визначення дійсності препаратів гестагенів

Глава 5. Кортікостероїдниє гормони

5.1 Характеристика

5.2 Дезоксикортикостерону-ацетат

5.3 Кортизон-ацетат

5.4 Похідні і аналоги кортизону

5.5 Гидрокортизон

5.6 Альдостерон

5.7 Преднизон

5.8 Преднізолон

5.9 Дексаметазон

5.10 Визначення дійсності препаратів кортикостероїдів

висновки

Список використаної літератури



Вступ

Стероїдні гормони - група фізіологічно активних речовин (статеві гормони, кортикостероїди та ін.), Що регулюють процеси життєдіяльності у тварин і людини.

Стероїдні гормони - один з головних класів гормональних сполук всіх видів хребетних і багатьох видів безхребетних тварин. Вони є регуляторами фундаментальних процесів життєдіяльності багатоклітинного організму - координованого зростання, диференціювання, розмноження, адаптації, поведінки.

У хребетних стероїдні гормони синтезуються з холестерину в корі надниркових залоз, клітинах Лейдіга сім'яників, в фолікулах і жовтому тілі яєчників, а також в плаценті. Характерна особливість синтезу стероїдних гормонів - ряд послідовно протікаючих процесів гідроксилювання молекул стероїдів, що відбуваються в мітохондріях і мікросомах.

Стероїдні гормони містяться в складі ліпідних крапель у цитоплазмі у вільному вигляді. У зв'язку з високою ліпофільність стероїдні гормони відносно легко дифундують через плазматичні мембрани в кров, а потім проникають в клітини-мішені.

Дія стероїдних гормонів на клітини-мішені здійснюється, головним чином, на рівні регуляції транскрипції генів. Воно опосередковується утворенням комплексу гормону зі специфічним регуляторним білком - рецептором, який дізнається певні ділянки ДНК в генах, регульованих даним гормоном. Таким чином, рецептори всіх стероїдних гормонів - ліганд-залежні фактори транскрипції. Для них характерне значне схожість амінокислотних послідовностей, ідентична доменна структура і подібний механізм дії.

Дані речовини є дуже важливою частиною в організмі, так як виконують безліч функцій. Однією з найбільш важливою функцією, є регуляція періоду вагітності у жінок, а так само регуляція вуглеводного і водно-сольового обміну в організмі. У чоловіків, завдяки стероїдів відбуваються такі процеси як; еякуляції і сперматогенез. Дані речовини беруть участь у багатьох процесах в організмі. З кожним роком, в медицині, виявляються функції, за які відповідають стероїдні гормони. Багатогранність в функціональності цих гормонів пояснюється тим, що це результат взаємодії даних гормонів з багатьма різними рецепторами в організмі.

Про те, що за допомогою стероїдних гормонів можна лікувати різного роду недуги повідав всьому світу всім відомий вчений Джеймс Райт. Саме він став першою людиною, який почав вивчати вплив певної кількості цих препаратів на організм при наявності у людини того чи іншого захворювання.

Внаслідок своєї багатофункціональності, використання їх в медицині в якості засобів лікування будь-яких захворювань дуже широко. Вони по-різному використовуються в медицині - в першу чергу, як протизапальні і протизаплідні засоби.

До гормонів коркового шару наднирників відносяться такі гормони як кортикостероїди: Гідрокортизон, Кортизон, Кортикостерон, Преднізолон, прегнан. До статевих гормонів чоловіків ставляться; Андростерон, Тестостерон, Метилтестостерон. До жіночих статевих гормонів відносяться; Естрон, Естрадіол, Естріол, Етінілестрадіол.

В даний момент існує безліч препаратів стероїдних гормонів, тому аналіз їх якості є досить актуальною проблемою.




Глава 1. Стероїдні гормони



1.1 Поняття і синтез

Cтероідние гормони - це жиророзчинні (ліпідні) гормони, які є по структурі стероїдами, але здатні проникати через клітинну мембрану і вибірково взаємодіючи зі специфічними ядерними рецепторами викликати зміни в генетичному апараті клітини, тобто здійснюють гормональну регуляцію в організмі людини.

Виділяють чотири найбільш загальні групи стероїдних гормонів: мінералкортікоіди, глюкокортикоїди, андрогени і естрогени.

Основними представниками цих кожної з цих груп є альдостерон, кортизол, тестостерон і естрадіол відповідно.

Крім того, виділяють групу прогестагенів, основним представником якої є прогестерон.

Додатково поділяють стероїдні гормони з цих п'яти груп на дві умовні групи: статеві гормони (прогестагени, андрогени і естрогени) і кортикостероїди (мінералкортікоіди і глюкортікоіди).

Синтез різних стероїдних гормонів з холестерину здійснюється послідовними ферментативними реакціями. Основний шлях стероидогенеза, що приводить до утворення мінералокортикоїдів, глюкокортикоїдів, андрогенів і естрогенів, представлений на наведеному малюнку. Перша стадія на шляху перетворення холестерину в прегненолон є реакцією, яка відбувається у всіх стероїд-продукують тканинах. Ця стадія, лімітує швидкість синтезу стероїдних гормонів. Наступні ферментативні реакції стероїдогенезу відбуваються тільки в певних тканинах.

В організмі людини не існує ніякого механізму, що сприяє накопиченню стероїдних гормонів в клітинах. Тільки гормональний попередник в формі ефірів холестерину накопичується в стероїд-продукують клітинах в значних кількостях. Синтезовані ж в них стероїдні гормони швидко потрапляють через клітинну мембрану в кров'яне русло, і, здійснюючи свою гормональну регуляцію, поступово виводяться з організму (в активній формі стероїдні гормони мають відносно малий період напіввиведення).



Регуляція синтезу стероїдних гормонів здійснюється за допомогою пептидних гормонів, що виробляються гіпоталамусом і гіпофізом. Кортикотропін, що виробляється гіпофізом, стимулює секрецію кортикостероїдів (минералкортикоидов і глюкокортикоїдів). Гонадотропіни (фоллітропін і лютеотропін), що виробляються передньою долею гіпофіза, стимулюють синтез андрогенів і естрогенів. У свою чергу, гонадоліберину, що виробляється гіпотоламуса контролює синтез і звільнення гіпофізно гонадотропінів.

Вироблення пептидних гормонів гіпоталамусом і гіпофізом залежить від концентрації контрольованих гормонів в крові і регулюється за принципом зворотного зв'язку. Попадання в організм екзогенних стероїдних гормонів зі швидкістю, що перевищує швидкість синтезу відповідних ендогенних стероїдних гормонів, практично повністю пригнічує вироблення стимулюючих пептидних гормонів, що призводить до пригнічення механізмів синтезу відповідних ендогенних гормонів, і в результаті порушується загальний гормональний баланс в організмі.



1.2 Ефіри стероїдних гормонів

Ефір являє собою ланцюжок з атомів вуглецю, водню і кисню, яка приєднується до молекули стероїду (зазвичай на місце атома водню в 17-ій позиції), утворюючи ефір стероїду. Ефіри стероїдів мають підвищену жиророзчинні і знижену водорастворимость, в результаті чого вони надовго затримуються в організмі і повільніше надходять в кров з місця ін'єкції.

Стероїд з приєднаним до нього складним ефіром є неактивним і не здатний зв'язуватися з рецепторами. Активація стероїду відбувається при відщепленні ефіру від стероїду під дією ферменту естераза (з відновленням водню для формування гідроксильної групи в 17-ій позиції, якщо ефір був приєднаний до неї), після чого стероїд здатний взаємодіяти з рецепторами. Властивостей самого стероїду ефір не змінює - після його відщеплення стероїд діє як зазвичай і виводиться з організму зі швидкістю залежить від власного періоду напіввиведення (напіврозпаду) цього стероїду з організму.

Як правило, чим довше ефірна ланцюжок, тим менше водорастворимость ефіру стероїду, він повільніше починає діяти, але має більший період напіврозпаду. Крім того, чим важче ланцюжок, тим більше її частка в загальній вазі ефіру стероїду, а значить, відносна концентрація самого стероїду нижче.

Таблиця 1

Список основних ефірів стероїдів

Назва ефіру і його період напіврозпаду в організмі, в добі

Існуючі ефіри стероїдів

Препарати, до складу яких входить ефір стероїду

Ацетат (Acetate)

Формула: C2H4O2Масса: 60.0524 г / моль Темп. плавлення: 16.6 ° C

3

Метенолона Ацетат (Methenolone Acetate)

Примоболан

Primobolan

Стенболона Ацетат (Stenbolone Acetate)

Анотрофін, Стенболон

Anatrofin, Stenbolone

Тестос Терона Ацетат (Testosterone Acetate)


Тренболона Ацетат (Trenbolone Acetate, Trembolone Acetate)

Тренбол, Фінаджекта, Фінаджет, Фінаплікс Finaject, Finajet, Trenbol

Бензонат (Benzonate)

6

Естрадіолу Бензоат (Estradiol Benzonate)

Естандрон Estandron

Бутират (Butyrate)

6

Тестостерону Бутират (Testosterone Butyrate)


Валерат (Valerate)

7.5

Естрадіолу валерат (Estradiol Valerate)


Гексагідробензілкарбонат (Hexahydrobenzylcarbonate)

Маса: 130.1864 г / моль

12

Тренболона Гексагідробензілкарбонат (Trenbolone Hexahydrobenzylcarbonate, Trembolone Hexahydrobenzylcarbonate)

Параболан Parabolan

Гексаноат (Hexanoate)

9

Тестостерону гексаноат (Testosterone Hexanoate)

омнадрен Omnadren

Гексілоксіфенілпропіонат (Hexyloxyphenylpropionate)

12

Нандролона Гексілоксіфенілпропіонат (Nandrolone Hexyloxyphenylpropionate)

Анадур

Гептаноат (Heptanoate)

10.5

Тестостерону Гептаноат (Testosterone Heptanoate)


Гептілат (Heptylate)

10

Тестостерону Гептілат (Testosterone Heptylate)

Тестостерон терамекс Testosterone Teramex

Деканоат (Decanoate)

Формула: C10H20O2 Маса: 172.24 г / моль

15

Тестостерону Деканоат (Testosterone Decanoate)

Сустанон Sustanon

Нандролона Деканоат (Nandrolone Decanoate)

Анаболін, Дека-Дуболін, Дека-дураболін, Дека-Дурабол, Еболан, Нурецан, Ретаболил, Стероболін, Туринабол Депо, Ціремілон, Екстраболін, Елпіхормо

Anaboline, Jebolan, Deca-Durabolin, Deca-Durabol, Deca-Durabolin, Elpihormo, Extraboline, Nurezan, Retabolil, Sterobolin, Turinabol Depot, Ziremilon

Изогексаноата (Isohexanoate)

9

Тестостерону изогексаноата (Testosterone Isohexanoate)

омнадрен Omnadren

Ізокапроат (Isocaproate)

Формула: C6H12O2 Маса: 116,14 г / моль

9

Тестостерону Ізокапроат (Testosterone Isocaproate)

Сустанон, Омнадрен (новий), Естандрон

Sustanon, Omnadren, Estandron

Капроат (Caproate)

Формула: C6H12O2Масса: 116,14 г / моль

9

Тестостерону капроат (Testosterone Caproate)

Омнадрен (новий)

Omnadren

Лаурат (Laurate)

Формула: C12H24O2 Маса: 200,29 г / моль

17

Нандролона лаурат (Nandrolone Laurate)

Лаураболін

Нонаноат (Nonanoate)

13.5



Октаноат Octanoate)

12



Пропионат (Propionate)

Формула: C3H6O2 Маса: 74.0792 г / моль

4.5

Андростенедиол дипропіонату (Androstenediol Di-Propionate)

Дролбан, Мастабол, майстер, Мастерід, Мастізоль, Майстрував, Мастерон, Метолон, Пермастріл

Drolban, Mastabol, Masterid, Masteril, Masteron, Masterone, Metholone, Permastril

Дромастанолона дипропіонату (Dromastanolone Di-Propionate)

Дростанолона Пропионат (Drostanolone Propionate)

Нандролона Пропионат (Nandrolone Propionate)


Тестостерону Пропионат (Testosterone Propionate)

Аговірін, Андролан, Андрофон-Рихт, Вірормон, Нео-Номбреол, Омнадрен, Прімотестон Депо, Сустанон, Тестенон, Тестовірон Депо, Тестостерон пропіонікум, Тестовірон, Тестопін, Тестенат, Естандрон

Метіландростенедіола дипропіонату (Methylandrostenediol Di-Propionate)

Аквеоус, метандриола

Acverous, Methandriol

Ундеканоат (Undeconoate)

Формула: C11H22O2Масса: 186,26 г / моль

16.5

Тестостерону ундеканоат (Testosterone Undeconoate)

Нандролона ундеканоат (Nandrolone Undeconoat e)

Андриол, Віріген, Пантестон, Равзін, Рестандол, Ундестор

Дінаболон, Псіхоболон

Ундесіленат (Undecylenate)

Формула: C11H20O2Масса: 186.2936 г / моль

13

Болденона Ундесіленат (Boldenone Undecylenate)

Болдебал, Болденон, Венобол, ганабол, Пейс, Сіболін, еквипойз Boldebal, Boldenon, Equipoise, Ganabol, Pace, Sybolin, Vebonol

Фенилпропионат (Phenylpropionate)

Формула: C9H10O2 Маса: 150.174 г / моль Темп. плавлення: 20 ° C

4.5

Нандролона Фенилпропионат (Nandrolone Phenylpropionate)

Активін, Анаболін, Андролон, Дубол, Дураболин, Нандроболін, Нероболін, Суперанаболін, Туринабол, Ферболіко, Феноболин, Еквіболін, Естандрон

Норетандролона Фенилпропионат (Norethandrolone Phenylpropionate)

Дурандрон, Омнадрен, Сустанон

Durandron, Omnadren, Sustanon

Тестостерону Фенілпоропіонат (Testosterone Phenylpropionate)

Естрадіолу Фенилпропионат (Estradiol Phenylpropionate)

Естандрон Estandron

Форміат (Formiate, Formate)

1.5

Тестостерону Форміат (Testosterone Formiate, Testosterone Formate)

Андроціп, Андронад, Деп Андро, Д-Тест, Деп-Тест, Деп-Тестостерон, Депотест, Дуратест, Малоджек Сип, Тесту-С, Тестаціп, Тестекс Лео пролонгатум, Тестодіета-Депо, Тестоджект, Тестред Ципионат,

Ципионат (Cypionate)

Формула: C8H14O2 Маса: 132.1184 г / моль

12

Тестостерону Ципионат (Testosterone Cypionate)

Оксаболона Ципионат (Oxabolone Cypionate)

Естрадіолу Ципионат (Estradiol Cypionate)

Стеранабол Депо, стерону

Steranabol Depo, Steranabol Depot, Steranabol Ritardo, Steron

Енантат (Enanthate)

Формула: C7H14O2 Маса: 130.1864 г / моль

10.5

Метенолона Енантат (Methenolone Enanthate)

Примоболан Депо Primobolan Depot

Тестостерону енантат (Testosterone Enanthate)

Андротардія, Депо-тестостерон, Дура-Тестостерон, Прімотестон Депо, Тестостерон Депо, тести, Тестостерона Пролонгат, Тестостовірон Депо, Тісто-енантему, Епармон-Депот, Тестостерон енантат



1.3 Похідні стероїдних гормонів

Похідні стероїдних гормонів отримують шляхом структурних змін в молекулі взятого за основу стероїду. Таким чином, отримують стероїди мають високу ступінь спорідненості з узятим за основу стероїдів, але зі зміненими в потрібну сторону параметрами.

Алкилированием (алькілірованіем) називається введення в молекули сполук алкила, наприклад, метилу CH3 (метилювання) або етилу C2H5 (етилування). Більшість оральних стероїдів алкілірованние по 17-альфа: до 17-ї позиції молекули приєднана метилова група (СН3), що охороняє стероїд від швидкого руйнування в печінці (при цьому надаючи токсичну дію на неї), збільшуючи період напіврозпаду стероїду до декількох годин.

Залежно від характеру біологічної активності похідні стероїдних гормонів поділяють на три групи: кортікоідние (кортикостероїди), анаболічні андрогенні (анаболічні андрогенні стероїди, ААC, АС) і естрогенні стероїдні гормони. Однак в організмі, багато похідні стероїдних гормонів подвережени ферментативним реакцій в стероїд-продукують тканинах, і можуть перетворюватися в інші стероїдні гормони, будучи в цьому випадку одночасно і прогормонов (прекурсорами).

Різні похідні стероїдних гормонів можуть застосовуватися перорально (у вигляді таблеток або капсул), у вигляді внутрішньом'язових ін'єкцій, а також у вигляді мазей (кремів або гелів) і інгаляційно (у вигляді спреїв).


Глава 2. Андрогенние гормони



2.1 Історія

Ще в 1849 р Бертольдом було встановлено, що у птахів при кастрації настає атрофія гребеня і що, навпаки, при пересадці сім'яників молодим кастрованим петушкам у них відновлюються вторинні статеві ознаки, т. Е. Зростання гребінця, голос, поведінка. Звідси був зроблений висновок, що в сім'яниках птахів містяться якісь активні речовини, що зумовлюють статеві відмінності і статеву діяльність. Кох і Мур і інші автори приготували перші активні андрогенні екстракти, для визначення активності яких пропонувалися різні методи. У 1927 р було виявлено, що активний початок андрогенів міститься не тільки в сім'яниках, а й в сечі чоловіків. За Вальтеру і Пецарду, тест півнячого гребеня заснований на регенерації втрачених у каплунів характерних ознак. За Галахер і Коху, півнячої, або Каплун одиницею називається то кількість речовини, яке, через 5 днів при щоденному ін'єкційному введенні масляного розчину, збільшує довжину гребеня на 5 мм. Одиницею дії також вважають те найменшу кількість речовини, яка викликає зростання гребеня на 15-20% ( «півняча одиниця»). Леве і Восс запропонували і інший тест, заснований на зростанні насіннєвих пухирців у кастрованих гризунів. Дегенеровані після кастрації бульбашки знову виростають при ін'єкції гормону і таким чином, секреторна діяльність відновлюється.

Першим андрогенів гормоном, виділеним Бутенандтом і Чернінгом в 1931 р з чоловічої сечі, був андростерон. Він виявився оксікетоном. Незабаром Бутенандту, Данненбауму і іншим авторам вдалося виділити ще один активний неграничний кетон складу З 19 Н 28 О 2. З 5 мг сечі Бутенандту вдалося виділити 15 мг чоловічого гормону. На підставі даних аналізу, наявності окси- і кетогруппу, а також припущення про генетичний зв'язок гормону, названого андростерона (I), з холестерином йому було встановлено будова андростанол-З-вона-17 (I). У 1934 р Ружичка підтвердив цю споруду синтезом і визначив його просторову конфігурацію, отримавши ацетат андростерона, окисленням 3α-ацетату холестанол (II), в свою чергу отриманого з холестанона (III):



Надалі Бутенандтом був запропонований більш ефективний метод отримання андростерона з дегідроепіандростерона (IV). Взаємодією останнього з пятихлористого фосфором було отримано 3-хлоркетон (V), який після гідрування (VI) і обмінної реакції з ацетатом калію перетворювався в ацетат андростерона (VII):



Незважаючи на доступність андростерона, він майже не знайшов практичного застосування, так як в 1935 рЛакер (Нідерланди) було показано, що в сім'яниках бугаїв (і інших тварин) міститься більш активний чоловічий гормон, названий тестостероном (VIII):

Тестостерон активніше андростерона в 7 разів. Перший синтез тестостерону був здійснений також Бутенандтом. При гідруванні ацетату дегідро- епіандростерона (IX) воднем в присутності скелетного нікелевого каталізатора був отриманий 3-ацетат-Δ 5 -андростендіола-3β, 17β (Х), який бензоілірованіем в присутності піридину перетворений в 3β-ацетат-17-бензоат-Δ 5 -андростендіола (XI), а потім частковим гідролізом ацетильной групи при температурі не вище 11 ° в 17-бензоат-Δ 5 -андростендіол-Зβ, 17β (ХII).



Окисленням хромовим ангідридом, в присутності оцтової кислоти (XI), після попереднього захисту подвійного зв'язку бромування і подальшого дебромірованія цинком отриманий в результаті гідролізу тестостерон (VIII):



У літературі описаний ряд варіантів синтезу тестостерону з дегідроепіандростерона (IV), андростендіону (XIII) і іншого вихідної сировини. За методом Мамолі, дегідроепіандростерон (IV) окислюють по Оппенауеру в андростендион (XIII), який під впливом дріжджових грибків відновлюють до тестостерону:


При використанні в якості вихідного продукту андростендиона його відновлюють літій-алюміній-гидридом до андростендиола і потім окислюють перекисом марганцю в нейтральному розчині. Цей реагент окисляє селективно лише аллільних спирти, в результаті чого утворюється тестостерон (VIII):



В якості вихідної сировини для синтезу тестостерону використана також Δ 5 -3-оксіетіохоленовая кислота.

За допомогою хлористого ції 3-ацетат її перетворюється в хлорангидрид 3-ацетоксіетіохоленовой кислоти, потім азидом натрію (в сухому толуолі) і обробкою 60% -ної сірчаної кислотою - в амін. Після захисту подвійного зв'язку бромування гідроксильна група при С 3 окислюється хромової кислотою, бром отщепляется цинком і за допомогою диазотирования нітритом натрію і розкладання нестійкого діазосполуки, в присутності оцтової кислоти, він перетворюється в тестостерон:

Тестостерон - дрібний білий кристалічний порошок, т. Пл. 166- 171 ° не розчинний у воді, розчиняється в спирті, ефірі, хлороформі. Застосовують зазвичай у вигляді складних ефірів - пропионата або енантата.

При синтезі стероїдних гормонів велике значення має доступність вихідної сировини; в цьому відношенні β-ситостерин, що отримується з відходів виробництва паперу, є вельми перспективним.



Як показали дослідження Д.М. Халецкого з співр., Технологія виробництва стероїдних гормонів з β-ситостерин мало відрізняється від їх виробництва з холестерину. Тим часом, холестерин є дорогим сировиною тваринного походження, в той час як β-ситостерин - недефіцитним і дешевим.

Тестостерон і його напівсинтетичні аналоги мають здатність надавати стимулюючу дію на синтез білків в організмі (анаболічний ефект). Анаболізму проявляють тестостерон, його ефіри, метилтестостерон. Однак у них цей ефект набагато менш виражений, ніж андрогенна активність. Метандриола (метиландростендіол), який є проміжним продуктом синтезу метилтестостерона, проявляє слабку андрогенну і відносно вищу анаболическую активність. Ще більш виборчим анаболічним дією володіє метандіенон (метандростенолон).

Вперше Мішером, Ветштейном і Шоппом було знайдено, що андрогенну дію тестостерону посилюється жирними кислотами (1936 г.); аналогічну дію спостерігається і в присутності вищих спиртів, наприклад Стеариловий спирту. Подальші дослідження показали, що дія тестостерону підвищується також при його етерифікації. У зв'язку з цим Ружичка і Ветштейном були синтезовані ефіри мурашиної, оцтової, пропіонової, масляної та ізомасляной кислот, а також пальмітинової і стеаринової; виявилося, що перші три ефіру виявляють активність (на півнячому гребені) вже в дозах 20 другі два - в дозах 60-70γ, а останні два в дозах 1000γ. Слабкіше діють ароматичні ефіри, наприклад бензойної кислоти - 100γ. На підставі цих даних в медицину був введений тестостерон-пропіонат.




2.2 Тестостерон-пропіонат

Testosteronum рropionicum. Testosteroni propionas. Тестостерон-пропіонат. Δ 4 -андростен-3-он-17 (р) ол-17-пропіонат. З 22 Н 32 О 3. М = 314,50



Синоніми: Homosteron, Perandren, Testoviron і ін. Одержують нагріванням тестостерону з пропіоновим ангідридом при 110-114 °, з подальшою перекристалізацією з метилового спирту:



Тестостерон-пропіонат - білий або білий з кремовим відтінком кристалічний порошок, т. Пл. 158-123 °, розчиняється в воді, розчиняється в спирті, ефірі, рослинних маслах; питомий показник поглинання при довжині хвилі 241 ммк не нижче 465 (з = 0,001, 95% спирт). При гідролізі препарату 1% -ним спиртовим розчином їдкого калі і подальшої нейтралізації соляної кислотою виділяють тестостерон з т. Пл. 150-153 °. При нагріванні зі спиртовим розчином хлоргідрату гидроксиламина, в присутності ацетату натрію, виділяють оксим тестостерон-пропіонату з т. Пл. 166-171 °:



Чистоту препарату визначають за відсутністю втрати у вазі при висушуванні і прожаренні.

Бережуть з пересторогою (список Б), в добре закупорених банках, в сухому місці, захищеному від дії світла. Вища разова і добова дози - 0,05 м Застосовується при статевому недорозвиненні, чоловічому клімактерії, нервових розладах по 0,025 г; у жінок - при нервових розладах, пухлинах молочної залози, маткових кровотечах і ін. по 0,005-0,01 р

Випускають у вигляді 1,2,5 і 5% -ного розчину в маслі (в ампулах).




2.3 Тестостерон-енантат

Testosteronum aenanticum. Тестостерон-енантат. Δ 4 -андростен-3-он-17-ол-17-енантат. З 20 Н 40 О 3. М = 400,6


Отримують за схемою:



Енантового кислоту, т. Кип. 116-118 °, при 14 мм рт. ст. за допомогою хлористого ції перетворюють в хлорангидрид, т. кип. 65-66 ° при 14 мм рт. ст. і останній взаємодією з тестостероном (в сухому піридині і бензолі) при 50-55 ° в тестостерон-енантат. Для видалення надлишку хлорангидрида енантового кислоти суміш перемішують з Діетиламіноетанол і виливають в розчин розведеної соляної кислоти. Після відгону бензолу отримують енантат тестостерону, т. Пл. 36-37,5 °, питоме поглинання 390. При гідролізі спиртовим розчином їдкого калі, з подальшим очищенням ацетоном, температура плавлення виділеного тестостерону 151-153 °. Чистоту препарату визначають за відсутністю сульфатної золи і енантового кислоти. Домішка останньої визначають алкаліметріческім титруванням в спиртовому середовищі в присутності індикатора фенолфталеїну (зміст її не повинно перевищувати 0,15%).

Бережуть з пересторогою (список Б)

Застосовують для тих же цілей, що і тестостерон-пропіонат; володіє більш сильним і більш тривалим андрогенну дію. Вводять внутрішньом'язово у вигляді 5% -ного масляного розчину по 1 мл.

Фізіологічна дія андрогенів залежить від характеру кисневих заступників, але ще більшою мірою від їх просторової конфігурації та характеру зчленування кілець в молекулі. Так, андростандіон-3,17 (I) володіє активністю 130γ, майже рівній активності андростерона, а андростандіол-3α, 17ß (II) - активністю в 20-25γ. З іншого боку, епіандростерон (III) в 5-6 разів менш активний, ніж андростерон, а ізомер останнього - тестанол-3-он-17 (IV) з цис-зчленуванням кілець А і В взагалі неактивний:



Аналогічно 17-ізотестостерон (V) в 20 разів слабкіше тестостерону, а Δ 4 -андростендіон (VI) слабкіше його лише в 5-6 разів. Дигідротестостерон (VII) не відрізняється за силою дії від тестостерону, а 5-епімер андростандіона- 3,17 (VIII) з цис-зчленуванням кілець А і В неактивний:



Високу андрогенную активність виявляють дітестостерон-бурштиновий і глутаровий ефіри (1949), а також глікозиди і ацетали тестостерону. Отриманий з тестостерон-пропіонату і пропандиола-1,3 в присутності толуол сульфокислоти тестостерон-пропіонат пропандіол- (Г, 3 ') ацеталь виявив пролонговану дію; в дозах 100у він діє 22 дня на півнячий гребінь, в той час як тестостерон 15 днів. Як показали Ружичка і КЕГІ (1937), 17-р-тестостерон в 15-25 разів менш активний, ніж його 17-а-ізомер; виняток становить Д б -андростен-3-а-17-Рдіол, який лише в 5 разів менш активний, ніж його транс-аналог.



2.4 Метилтестостерон

Меlтеsтosтеrоnum. Метилтестостерон. 17-α-метилтестостерон. 17-α-метил -Δ 4 -андростен-3-он-17-ол. З 20 Н 30 О 2. М = 302,4



Синоніми: Androral, Oraviron, Testoral і ін.

Отримують дією магнійбромметіла на 3-ацетатдегідроепіандростерона-17 в ефірі, з подальшим окисленням утворився 17-метиландростендіол-3,17 за Оппенауеру (циклогексанон в присутності ізобутілата алюмінію і толуолу):



17-Метилтестостерон - білий або білий з кремовим відтінком кристалічний порошок, т. Пл. 161-167 °, без запаху, не розчинний у воді, розчиняється в спирті, ефірі, ацетоні, мало розчинний в рослинних оліях. Питома показник поглинання від 520 до 540 = 0,001, 95% -ний спирт) при довжині хвилі 240 ммк. На повітрі злегка гігроскопічний. При ацетилюванні оцтовим ангідридом в присутності піридину, утворює 17-ацетат-17α-метилтестостерона т. Пл. 173-176 °.

При оксімірованіі гідрохлоридом гідроксиламіну, в присутності ацетату натрію в середовищі метилового спирту, утворює 3-оксим 17-метилтестостерону, т. Пл. 210-216 °.

Чистоту препарату визначають по втраті у вазі (не більше 1,5%) при висушуванні до постійної ваги при 100-105 ° і відсутності сульфатної золи (не більше 0,1%).

Бережуть з пересторогою (список Б), в добре закупорених банках, захищених від дії світла.

Вища разова доза - 0,05 г, добова - 0,1 г.

Застосовують при статевому недорозвиненні і функціональних порушеннях статевої сфери, а також при маткових кровотечах в передклімактеричному і клімактеричному періодах. Для більшого ефекту дії рекомендують результаті застосування; таблетку метилтестостерону затримують під язиком до повного розсмоктування.

Випускають в таблетках по 0,005 р



2.5 метиландростендіол

Methylandrostendiolum. Methandriolum. Метиландростендіол. 17-α-метил-Δ 5 -андростен-3β-17β-діол. З 20 Н 32 О 2. М = 304,48.



Синоніми: Androdiol, Metandiol, Notandron, Testodiol і ін.

Чи є проміжним продуктом при синтезі 17-метилтестостерону. 17-метиландростендіол - білий кристалічний порошок. Не розчинний у воді і мало в спирті, розчиняється в хлороформі, піридині і киплячому метиловий спирт, т. Пл. 202-206 °. Розчин препарату в 80% -ної оцтової кислоти в присутності концентрованої сірчаної кислоти дає на кордоні шарів помаранчеву смугу і потім зеленувато-жовту флуоресценцію. При ацетилюванні оцтовим ангідридом, в присутності піридину, утворюється ацетильную похідне, т. Пл. 133-136 °.

Чистоту препарату визначають за відсутністю кетостероидов (0,002 г препарату розчиняють в 1 мл 95% -ногоспірта і додають 1 мл 95% -ного розчину м-динітробензолу і 1 мл 15% -ного розчину їдкого натру - через 1 год розчин не повинен бути темнішим суміші 1 мл 95% -ного спирту з тими ж реактивами).

Бережуть з пересторогою (список Б), в сухому місці, захищеному від дії світла. Застосовують сублінгвально для посилення білкового анаболізму у реконвалесцентів після важких травм, операцій, інфекційних та інших захворювань по 0,025-0,05 г на прийом у вигляді таблеток. Володіючи значно меншою андрогенної активністю, ніж метилтестостерон, препарат може застосовуватися і в жіночій практиці з метою підвищення анаболізму, а також для зменшення активності фолікулярного гормону в клімактеричному періоді (і при раку молочної залози).

При тривалому застосуванні іноді спостерігається посилений ріст волосся на обличчі та тулубі і збільшення сальності шкіри.

Кувада і Мнгасака (1938) синтезували різні ефіри 17-метилтестостерону, але не отримали цікавих для медицини препаратів. Недіяльному виявився 17-аллілтестостерон, синтезований Бутенандтом і Петерсом (1938 г.).

При окисленні Δ 4 -Подвійний зв'язку тестостерону перекисом водню отримано з'єднання будови:



що не володіє андрогенної активністю. Аналогічні і інші поліоксісоедіненія, як андростантріол-3,5,6-он-17, андростантріон-3,16,17-ол-5, Δ 5 -андростентріон-3,4,17 і андростантріол-3,14,17 - виявилися неактивними. Навпаки, андростентріон-3,6,17 і 6-оксотестостерон в дослідах на кастрованих пацюках (самках) викликали течку, т. Е. Проявляли активність жіночого гормону. 3-Галогенопохідні дегідроепіандростерона неактивні, але 17-хлор-Δ 5 -андростенол-3-ацетат досить активний (Вестфаль); слабкою біологічною активністю володіють 17-Амінопохідні андростан.



Заміна пятичленного кільця D на шестичленное призводить до незначного зменшення актівнрсті D-гомотестостерона (20-30γ). Він отриманий з ціангідріна дегідроепіандростерона (I), який при відновленні дає оксіамін (II), а при дії на нього азотної кислоти перегруповуються по Демьянову з розширенням кільця в D -гомоаналог д ЄДІ дроепіандростерона (III) і за методом Мамолі перекладається в D-гомо- тестостерон (IV):


Отриманий з Зα-окси-D-гомоандростерона 4,5-гомодігідротестостерон діє в дослідах на щурах аналогічно дигидротестостерону.

Для прояву андрогенної активності необов'язково присутність З 19 -метільной групи; 19-нортестостерон також володіє андрогенної активністю. Він виходить з естрону (V) через метиловий ефір естрадіолу, з подальшим відновленням ароматичного кільця літієм і спиртом в рідкому аміаку в метоксікарбінол (VI); останній при кислотному гідролізі переходить в 19-нортестостерон (VII):




2.6 Визначення дійсності препаратів андрогенів

Найбільш вірогідно справжність лікарських речовин можна підтвердити рекомендованим ФС і МФ методом ІЧ-спектроскопії. ІК-спектр випробуваного речовини, знятий в вазеліновій олії в області 3700-400 см -1, повинен мати повний збіг з смугами поглинання спектра ДСО або доданого до ФС малюнка спектра.

Для випробування автентичності використовують реакції утворення складних ефірів та інших похідних зазначених речовин, які мають стабільну температуру плавлення. Так, при дії оцтовим ангідридом отримують моноацетати метилтестостерона (т. Пл. 173-176 ° С) і метандриола (т. Пл. 174-180 ° С):



Тестостерону пропіонат і метилтестостерон, содержашийся в положенні 3 кетонну угруповання, при дії гідроксиламіном утворюють оксим и з температурою плавлення відповідно 166-171 ° С і 210-216 ° С. Оксим метилтестостерона утворюється за схемою:



Метандиенон ідентифікують за освітою гідразону (пофарбованого в оранжево-червоний колір) при взаємодії з 2,4-дінітрофенілгідразіном: Аналогічну кольорову реакцію дає тестостерону пропіонат з ізоніазидом (гідразидом ізонікотиновоїкислоти). Утворюється пофарбований в жовтий колір ізонікотіноілгідразон. Реакцію використовують для фотоколориметричного визначення лікарських форм тестостерону пропіонату.


Тестостерону пропіонат можна ідентифікувати по складноефірного угрупованню, використовуючи реакцію омилення з подальшою перевіркою температури плавлення виділяється тестостерону (150-156 ° С):



Можна застосувати також реакцію освіти пофарбованої комплексної солі заліза (III) і пропіоногідроксамовой кислоти:



За допомогою цієї реакції можна відрізнити тестостерону пропіонат від лікарських речовин, які не є ефірами.

Для випробування на справжність застосовують (ФС) кольорову реакцію на стероїдні сполуки з концентрованої сірчаної кислотою. Метилтестостерон і мегандріол утворюють при цьому жовто-оранжеве забарвлення з характерною зеленою флуоресценцією, а метандіенон - червоне забарвлення. Справжність тестостерону пропіонату і метилтестостерону по МФ встановлюють за допомогою ТШХ на адсорбенті кизельгур Р-1, в якості проявника використовують розчин 4-толу- олсульфоновой кислоти в етанолі. Метод ТШХ рекомендований ФС для випробування справжності тестостерону пропіонату шляхом порівняння з ДСО. У тих же умовах визначають домішки сторонніх стероїдів в чотирьох зазначених лікарських речовинах. Випробування виконують на пластинках «Силуфол УФ-254», використовуючи розчини аналізованих і стандартних зразків речовин-свідків (або ДСО) в хлороформі. Хроматограми після висушування переглядають в УФ-світлі при 254 нм. Наявність допустимих кількостей домішок (не більше 1%) оцінюють за сукупністю величин і інтенсивності плям випробуваного лікарського речовини і свідка. У Метандіеноном встановлюють наявність домішки селену (не більше 0,01%) методом спалювання в кисні з подальшою спектрофотометрією продукту взаємодії селену з 3,3-діамінобензідіна тетрагідрохлорідом в толуольного витягу при довжині хвилі 413 нм.

Метод УФ-спектрофотометрії ФС і МФ рекомендують для випробування справжності та кількісного визначення андрогенних і анаболічних лікарських речовин. Розчини в етанолі мають максимуми поглинання у тестостерону пропіонату при довжині хвилі 240 нм, метилтестостерона - при 241 нм, метандієнону - при 245 нм. У метандриола визначають світлопоглинальні домішки, вимірюючи оптичну щільність (не більше 0,5) 0,5% -ного розчину випробуваного речовини в етанолі при довжині хвилі 240 нм. Відповідно до вимог ФС в максимумах поглинання виконують спектрофотометрическое визначення зазначених лікарських речовин, використовуючи розчинник етанол, який служить також розчином порівняння. Розрахунок змісту виконують по питомій показнику поглинання (метилтестостерон - 540; метандіенон - 516) або по ДСО (тестостерону пропіонат).

Метандриола кількісно визначають (по ФС) поляриметричним методом. Вимірюють величину кута обертання спиртового розчину навішення і розраховують вміст метандриола за величиною питомого обертання.

Для надійної ідентифікації андрогенних і анаболічних стероїдів були використані Н-ЯМР і мас-спектри. Виявлено хімічні зрушення стандартних синглетних сигналів протонів С-18 і С-19, а також основні і характеристичні іони мас-спектрів, отриманих методом електронного удару. Для кількісного визначення застосований також метод ВЕРХ (Е.С. мати, А.П. Арзамасцев).

Андрогенні та анаболічні стероїдні лікарські речовини зберігають за списком Б, в добре закупореній тарі, оберігаючи від дії світла і вологи, під впливом яких вони можуть поступово розкладатися.

Тестостерону пропіонат застосовують як андрогенное лікарський засіб при клімактеричних, судинних і нервових розладах, а також для лікування раку молочної залози і яєчників у жінок. Призначають його у вигляді 1% -них або 5% -них масляних розчинів підшкірно і внутрішньом'язово. Метилтестостерон має аналогічну, але в 2-3 рази менш активним андрогенну дію. Він ефективний при прийомі всередину і під'язиковому застосуванні. Випускають метилтестостерон в таблетках по 0,005 і 0,01 г. Метандиенон і метандриола володіють анаболічним дією, призначають їх при порушеннях білкового обміну внаслідок важких травм, при коронарної недостатності, виразковій хворобі, інфаркті міокарда і т. Д. Випускають таблетки метандієнону по 0,005 г і метандриола по 0,25 г.

Глава 3. Естрогенні гормони




3.1 Історія

Естрогенні або жіночі статеві гормони виділяються яєчниками. В останніх секретируются два типи гормонів: фолікулярні, або естрогенні, що виробляються клітинами дозріває фолікула і прогестенальний гормон (прогестерон), секретується клітинами жовтого тіла, що утворюється на місці фолікула, що розірвався. Естрогенні гормони забезпечують розвиток жіночих статевих органів, викликають періодичне настання овуляції, розростання слизової оболонки матки, підготовку її до сприйнято яйця і розвитку плода. Естрогенні гормони викликають також розвиток вторинних жіночих статевих ознак. У тварин естрогенні гормони викликають течку. Тічка викликається також введенням кастрованим тваринам (мишам) екстрактів яєчника, і на цьому явищі заснований найважливіший метод випробування активності жіночих статевих гормонів, розроблений Алленом і Дойзі (1923 р). У мишей і щурів окремі стадії статевого циклу розпізнаються при розгляданні під мікроскопом мазка, взятого з піхви, що містить ороговілі епітеліальні клітини. За методикою авторів, досліджувана речовина розчиняють в олії і вводять підшкірно трьома порціями протягом 24 ч. Однією мишачої одиницею (ME) називають найменшу кількість речовини, яке у 70% мишей викликає явища еструса. За міжнародною угодою 1939 року для стандартизації жіночих гормонів використовується кристалічний препарат, під назвою естрон, 0,1γ якого є 1 міжнародну одиницю (1 ME) естрогенної активності. Чутливість методу дозволяє визначити 0,1γ естрону; чутливість підвищується при інтравагінальному введенні.

Виділення жіночого гормону довгий час було великі труднощі, так як екстракти з яєчників, поряд з гормонами, містять велику кількість домішок. Більш придатний джерело естрогенних гормонів був знайдений Цондека в 1927 р, коли було встановлено, що естрогени містяться в значній кількості в сечі вагітних жінок. Дослідженнями Бутенандт з співр. (1939) і Онесона з співр. (1952) знайдено, що в сечі вагітних естрон міститься у вигляді сульфату (I) і частково у вигляді глюкуроніду (II):



Отримання естрону Бутенандтом проводилося шляхом гідролізу сечі соляною кислотою і подальшого вилучення гормону ефіром. Після нейтралізації ефірного екстракту розчином бікарбонату натрію екстракт упарюють і екстрагували толуолом. З толуолу гормони витягувалися 0,1 н. розчином їдкого натру. З 2 т сечі було виділено близько 25 мг естрону.

Надалі, коли було знайдено, що жіночі гормони в значно більших кількостях містяться в сечі лошат кобил і в сечі жеребців або меринів, були розроблені виробничі методи отримання естрону.

За методом М.Н. Лапінера (1936) гідролізований сеча лошат кобил витягується хлороформом і після відгону розчинника залишок розподіляється між ефіром і розчином лугу; кристалізацією зі спирту отримують естрон з домішкою еквіліна (III) і еквіленіна (IV):


При очищенні велику допомогу надали реактиви Жирара Т і Р:



які завдяки перетворенню гормону в розчинний з'єднання сприяли його ізолювання. При подальшому підкисленні соляною кислотою виділявся кетон, який екстрагували відповідним розчинником. Таким чином, Бутенандтом були виділені з сечі естрадіол (V) і естріол (VI). При нагріванні естріолу з бісульфатом калію був виділений естрон, ніж підтверджено будову останнього; так як естріол містить три гідроксильні групи, то, отже, дві з них розташовані поруч. При сплаві естріолу з їдким калі отримана дикарбонових кислот (VII), яка при нагріванні дала ангідрид (VIII), а не кетон, що вказувало на наявність у молекулі естріолу (і, отже, естрону) пятичленного кільця:



При нагріванні кислоти (VII) з селеном було виділено 1,2-діметілфенантрол-7 (VIIIa), будова якого було підтверджено синтезом:


ространственное будова естрону було доведено синтезом з дегідроепіандростерона (IX) естрадіолу (XV) (Інгоффен) за схемою:



Важливим доказом у цій схемі будови естрадіолу стало бромування (XII) і отримання дібромпроізводного (XIII), який опинився транс-кетоном.Транс-кетони такого типу на відміну від цис-ізомерів броміруются в положенні 2 і 4, а цис-кетони тільки в положенні 4.

Освіта інших продуктів (X, XI, XII, XIV і XV) ясно зі схеми.

Естрогенні гормони притаманні тваринам організмам, але вони знайдені і в рослинах, наприклад естрон, в витяжці з кокосових горіхів і в жіночих квітках верби.

Спочатку, коли хімія стероїдних естрогенів була недостатньо розвинена, застосовувалися різні препарати: фолликулин - водний розчин, який отримують з очищених екстрактів сечі жеребців, вагітних жінок та ін., Консервований Трикрезол, масляний розчин фолликулина (Folliculinum oleosum), приготований з кристалічних препаратів суміші естрону і його дигідропохідних; масляний розчин естрону, що містить в 1 мл 0,5-1 мг кристалічного гормону, масляний розчин естрону, що містить в 1 мл 0,5-1 мг кристалічного гормону, масляний розчин бензоату фолликулина (Folliculinum benzoatum s. Solutio Folliculim benzoati oleosa).

В даний час ці препарати відсутні в ГФ і використовуються лише більш ефективні, до яких належать естрадіол-монобензоат і естрадіол-дипропіонат, що застосовуються у вигляді масляних розчинів.




3.2 Естрадіол-монобензоат


Estradiolum monobenzoicum. Естрадіол-монобензоат. 3-монобензойний ефір β-естрадіолу. З 25 Н 23 О 3. М = 376,5.

Отримують бензоілірованіем естрадіолу хлористим бензоилом за схемою:



Продукт реакції промивають розчином їдкого натру і перекрісталлізовивают зі спирту.

Естрадіол-монобензоат - білий або жовтуватий кристалічний порошок, без запаху, т. К. 191-196 °, легко розчинний в спирті і ацетоні, малорастворим в рослинних оліях, не розчинний у воді. Концентрованої сірчаної кислотою забарвлюється в зеленувато-жовтий колір з блакитною флуоресценцією; при додаванні води забарвлення переходить в бледножелтой. Чистоту препарату визначають за відсутністю естрону (спиртовий розчин при нагріванні зі спиртовим розчином м-динітробензолу і наступному дії їдкого калі не повинен забарвлюватися в червоний колір).

Кількісне визначення препарату виробляють біологічним шляхом. 1 мг його повинен містити 10000ЕД (допускається відхилення від зазначеної активності ± 25 ° о). Бережуть з пересторогою (список Б), в добре закупорених склянках, в сухому місці, захищеному від дії світла.

Естрадіол є природним гормоном, так як утворюється в організмі жінки разом з естрону. Будучи ефіром естрадіолу, він повільно всмоктується і має пролонговану дію.

Випускають в ампулах по 1 мл 0,1% -ного розчину в маслі для ін'єкцій.




3.3 Естрадіол-дипропіонат

Estradiolum dipropionicum. Естрадіол-дипропіонат. Ефір естрадіолу і пропіонової кислоти. З 23 Н 31 О 4. М = 371,25.



Синоніми: Progynon, Synformon і ін.

Отримують етерифікацією естрадіолу пропіоновим ангідридом або хлорангідридом пропіонової кислоти:


Естрадіол-дипропіонат - білий кристалічний порошок, не розчинний у воді, розчиняється в спирті, ефірі, рослинних маслах. При лужному гідролізі утворює естрадіол, т. Пл. 191-196 °, і дає всі реакції, характерні для останнього. Чистоту препарату і кількісний вміст його визначають аналогічно естрадіол-бензоату.

Препарат має уповільненим і тривалим естрогенним дією.

Бережуть з пересторогою (список Б), в захищеному від світла місці.

Застосовують для тих же цілей, як і естрадіол-бензоат, у вигляді 0,1% -ного масляного розчину в ампулах по 1 мл 2-3 рази на тиждень.

Слід згадати, що сам естрадіол існує у вигляді двох епімерних діолів, з т. Пл. 178 ° і т. Пл. 223 °. Низкоплавкий ізомер має більш рухомий гідроксильною групою і йому приписується 17β-конфігурація (I); він активніше свого 17α-епімер (II) приблизно в 40 разів і в 8-10 разів активніше естрону:



При обробці метилового ефіру естрадіолу (I) літієм в рідкому аміаку в присутності спирту (по Берча) відновлюється ароматична ядро ​​і утворюється вініловий ефір (II), який після гідролізу переходить в неграничні кетон -нортестостерон (III), який є одним з активних андрогенів:



Таким чином, перетворення ароматичного ядра в циклогексанового супроводжується зникненням естрогенної і виникненням андрогенної активності. З іншого боку, руйнування кільця D, при сплаві естрону (IV) з їдким калі, призводить до монокарбонової дойзіноловой кислоті (V), яка настільки ж активна, як і естрон:



Отже, і без кільця D молекула здатна володіти естрогенної активністю.



3.4 Визначення дійсності препаратів естрогенів

Для встановлення справжності використовують кольорову реакцію з концентрованої сірчаної кіслотоі в присутності етинілестрадіолу розчин набуває оранжево-червоне забарвлення з жовтувато-зеленою флуоресценцією. Після додавання отриманого розчину до 10 мл води забарвлення змінюється до фіолетової і випадає фіолетовий осад местранола з концентрованої сірчаної кислотою утворює криваво-червоне забарвлення з аналогічною флуоресценцией. Естрадіолу дипропіонат під дією концентрованої сірчаної кислоти гідролізується з утворенням естрадіолу і пропіонової кислоти. Подальше нагрівання в присутності етанолу веде до утворення етилового ефіру пропіонової кислоти, що має характерний запах:



Естрадіолу дипропіонат ідентифікують за освітою естрадіолу (т. Пл. 173-179 ° С) після лужного гідролізу з подальшим очищенням його від домішок.

Наявність фенольного гідроксилу в молекулі етинілестрадіолу підтверджують реакцією освіти бензоату етинілестрадіолу, що має т. Пл. 199-202 ° С:



УФ-спектр поглинання розчину етинілестрадіолу в суміші етанолу і гідроксиду натрію в області 220-330 нм має максимуми поглинання при 241 і 299 нм і мінімуми поглинання при 226 і 271 нм, а розчин в етанолі - максимум поглинання при 280 нм. Етинілестрадіол можна відрізнити за питомою показником поглинання 0,005% -ного спиртового розчину при довжині хвилі 280 нм. Він повинен бути рівний 65-69. Естрадіолу дипропіонат ідентифікують по УФ-спектру 0,01% -ного розчину в етанолі, який в області 220-350 нм повинен мати два максимуми поглинання (при 269 і 276 нм). Местранола (0,005% -ний розчин в етанолі або метанолі) при довжині хвилі 279 нм має питомий показник поглинання від 59 до 64.

Справжність етинілестрадіолу, местранола і естрадіолу дипропіонату підтверджують по ІЧ-спектрами, знятим в вазеліновій олії в області від 4000 до 200 см -1. Вони не повинні відрізнятися від малюнків спектрів, які додаються до ФС. В результаті проведених систематичних досліджень розроблена уніфікована методика ідентифікації стероїдних естрогенів методом ВЕРХ.

Домішки сторонніх стероїдів визначають методом ТШХ на пластинках Силуфол УФ-254. В якості свідків використовують зовсім естрону, естрадіолу і ін. ФС допускає сумарний вміст домішок стероїдів - не більше 2%, в т. Ч. В етинілестрадіолу не більше 1% естрону.

Етинілестрадіол кількісно визначають методом непрямої нейтралізації так само, як норетістерон. Як розчинник використовують очищений від перекисних сполук тетрагідрофуран. Виділилася після додавання нітрату срібла азотну кислоту титрують 0,1 М розчином гідроксиду натрію потенциометрическим методом зі скляним індикаторним електродом. Етинілестрадіол утворює з нітратом срібла подвійну сіль, яка складається зі срібної солі етинілестрадіолу і шести молекул нітрату срібла:



За МФ визначення етинілестрадіолу виконують спектрофотометричним методом в середовищі безводного етанолу при довжині хвилі 281 нм. Фотоколориметричні методика визначення етинілестрадіолу заснована на використанні діазореактивом (суміш сульфаниловой кислоти, нітриту натрію і соляної кислоти). У лужному середовищі утворюється забарвлене бісазосоедіненіе:


Для кількісного визначення естрадіолу дипропіонату використовують реакцію лужного гідролізу точно відміреною кількістю 0,1 М спиртового розчину гідроксиду калію, надлишок якого титрують 0,1 М розчином соляної кислоти (індикатор фенолфталеїн):



Для ідентифікації, встановлення наявності домішок сторонніх стероїдів і кількісного визначення стероїдних естрогенів (в т. Ч. Етинілестрадіолу, местранола, естрадіолу дипропіонату) використаний комплекс фізико-хімічних методів: ТШХ, ВЕРХ, мас-спектрометрія (Родіонова PA, Тугунтаев Г.І., арзамасцев А.П.). Ряд розроблених методик включений в ФС.

Похідні естрадіолу зберігають за списком Б. Етінілестрадіол зберігають в добре закупорених банках оранжевого скла, а местранол і естрадіолу дипропіонат - в сухому, захищеному від світла місці.

Застосовують як естрогенних засобів. З огляду на пролонговану дію естрадіолу дипропіонату, його вводять внутрішньом'язово по 1 мл 0,1% -ного розчину в маслі 2-3 рази в тиждень. Етинілестрадіол призначають всередину у вигляді таблеток по 0,00001 і 0,00005 г. местранола є одним з компонентів таблеток інфекундін (Infecundin) - активного перорального контрацептиву, що містить 0,0001 г местранола і 0,0025 г норетінодрела. Етинілестрадіол входить до складу таких протизаплідних засобів, як марвелон, ноновлон, овидон, що застосовуються у вигляді таблеток.


стероїдний гормон синтез тварина людина

Глава 4. Гестагенні гормони



4.1 Історія

Назва «гестагенні» гормони походить від латинського слова - gestatio, т. Е. Вагітність, тому в більш ранніх дослідженнях гестагенні гормони називалися гормонами вагітності. Гестагенні гормони були виділені в результаті дослідження функцій жовтого тіла (Corpus luteum), періодично утворюється після овуляції і розвивається після запліднення. Як показав Френкель в 1902 р, видалення жовтого тіла у вагітних тварин приводить до викидня плоду. Дослідженнями Окінчіца, Леба і інших авторів показано, що головною функцією жовтого тіла є підготовка слизової оболонки матки до імплантації заплідненого яйця і підтримки подальшого розвитку зародка. Однак тільки через 20 років корнера і Аллену (1932) вдалося експериментально довести, що жовте тіло виробляє гормон, необхідний для підтримки вагітності. Гормон цей також гальмує овуляцію і рухливість матки, сенсибилизирует останню до сприйняття зародка і сприяє імплантації яйцеклітини. Крім цього, гормон впливає і на розвиток молочних залоз. Виділення гормону жовтого тіла в чистому вигляді виявилося можливим лише після розробки біологічних тестів, які дозволили визначати лутоідмую активність. За Клауберга, статевонезрілі кролиця протягом 8 днів вводять щодня по 10 МО (мишачих одиниць) естрогенного гормону, потім протягом 5 днів вводять підшкірно гестагенний гормон. Найменша кількість речовини, що викликає в слизовій оболонці матки зміни, подібні спостережуваним на початку вагітності, цазивается кролячій одиницею (КЕ). Естрогенні гормони вже в досить невеликих кількостях (0,1 мкг) пригнічують лутоідное дію гормону жовтого тіла, названого прогестероном. Тому екстракти перед випробуванням обробляють 30% -ним розчином їдкого натру для відділення естрогенних (фенольних) гормонів.

За міжнародною угодою, 1 ME гормону жовтого тіла відповідає 1 мг стандартного кристалічного прогестерону.

Вперше прогестерон (II) виділено Бутенандтом в 1934 р з жовтого тіла свиней (через 6 років після відкриття естрону). Будова його було виведено на підставі аналітичних і спектральних даних, підтверджених частковим синтезом з прегненолона (I); сам прегненолон отриманий при окисленні 3-ацетату 5,6-дібромхолестеріна:



Зважаючи на малі виходів (1-3%) цей спосіб не отримав практичного використання. Більш придатним виявилося отримання прогестерону (II) з неомиляемой частини масла соєвих бобів - стигмастерин (III), шляхом окислювального розщеплення останнього через прегненолон (I):



При бромуванні стигмастерин утворюється з приєднанням брому до 5-6 подвійного зв'язку дибромід стигмастерин (IV), який при озонуванні перетворюють в озоніди (V), а при подальшій обробці цинком і оцтовою кислотою в 3β-оксібіснорхоленовую кислоту (VI):

Після етерифікації кислоти (VI) за допомогою діазометана в метиловий ефір (VII) останній за допомогою магній-бромфеніл перетворюють в третинний карбинол (VIII).



При кип'ятінні його з крижаної оцтової кислотою і перегонці в високому вакуумі відбувається дегідратація і утворюється двічі неграничний спирт (IX), ізольований у вигляді ацетату. Озонуванням його переводять в прегненолон і потім окисленням в прогестерон:



Описано численні синтези прогестерону з прегненолона із застосуванням різних окислювачів (перманганату калію, перекису водню, хромового ангідриду) дегидрирующей речовин - металевих акцепторів водню Сu, Ag, Аu, Рt, Рd, Ni, Zn), а також кетонів, альдегідів, ненасичених сполук, наприклад, коричної, фумарової кислот, хіноліну.

Хороші виходу отримують при окисленні по Оппенауеру із застосуванням третинного бутилату алюмінію.

Окислення прегненолона може бути проведено і мікробіологічно за допомогою Rhizopus nigricans, як це показано Мамолі (1938).

При використанні в якості вихідного продукту 3 (β) -ацетоксі-Δ 5 - етіохоленовой кислоти (X) її перетворюють за допомогою тіонілхлориду в хлорангидрид (XI), який відновлюють в альдегід (XII) і потім через 3-окси-17-метил- магній-йод гидролизуют при охолодженні розбавленою сірчаною кислотою. При перекристалізації із суміші ацетон-вода отримують чистий прегнендіол-3,20 (XIII), який окислюють хромової кислотою в крижаній оцтової кислоти звичайним шляхом в прегненолон (I):



М.М. Суворовим (1956) показано, що прогестерон може бути отриманий з соласодіна-агликона стероїдних алкалоїдів, одержуваного з рослини паслін пташиний (Solanum aviculare Forst) за схемою.

Подальше перетворення Δ 5,16 -прегнадіенол-3-она-20 (III) в прогестерон (II), пов'язане з гидрированием, гідролізом ацетильной групи і реакцією Оппенауера:



4.2 Прогестерон

Progesteronum. Прогестерон. 4-Прегніл-3,20-діон. З 21 Н 30 О 2. М = 314,47.



Синоніми: Lutocyclin, Progestin, Progeston, Proluton і ін.

Прогестерон - білий кристалічний порошок, т. Пл. 127-129 °, питомий показник поглинання 515 (0,001, 95% -ний спирт при к = 241 ммк), не розчинний у воді, розчиняється в спирті, ефірі, хлороформі, мало розчинний в рослинних оліях. Спиртовий розчин в присутності лугу і м-динітробензолу забарвлюється в червоно-фіолетовий колір, розчин його в суміші концентрованої оцтової кислоти і 88% -ної фосфорної дає інтенсивну жовту флуоресценцію (реакція Боскотта). Будучи кетоном, утворює оксим, т. Пл. 240 °, і 2,4-дінітрофенілгідразон.

Кількісне визначення прогестерону виробляють ваговим шляхом, у вигляді 2,4-дінітрофенілгідразона, одержуваного шляхом кип'ятіння препарату з реагентом в спиртовому розчині. Після кип'ятіння його з концентрованою соляною кислотою осад відфільтровують, промивають 0,5 н. розчином соляної кислоти, спиртом і висушують при 100 ° до постійної ваги. Вага осаду, помножений на 0,466, відповідає кількості прогестерону.

Зміст прогестерону в препараті повинно бути не менше 98,5%. Бережуть з пересторогою (список Б), в добре закупорених банках, в захищеному від світла місці.

Вища разова доза-0,01 г, добова - 0,01 г. Застосовують при патологічних процесах, пов'язаних з недостатністю жовтого тіла: при дисфункціональних маткових кровотечах, функціональної і анатомічної недостатності статевих органів, болісних менструаціях, звичному та загрозі самовільного аборту, безплідді. Вводять у вигляді масляних розчинів внутрішньом'язово або підшкірно по 0,01 г (2 мл 0,5-ного розчину в маслі). Випускають в ампулах по 1 мл.

За своєю будовою прогестерон відрізняється від андрогенних гормонів наявністю при З 17 бічного ланцюга; такі сполуки відносяться до групи прегнана. Так як андрогени виходять легше і з кращими виходами, ніж похідні прегнана, то останні зазвичай отримують з похідних андростан.

У 1936 р Бутанандт, а також Ружичка за допомогою гріньяровского синтезу отримали вперше 17-етілтестостерон; цей продукт виявився слабким естрогеном і неактивним щодо тесту Клауберга. Більш важливими виявилися похідні ацетилену і, зокрема, 17-етініл тестостерон, будови:


названий прегніна.



4.3 Прегнин

Praegninum. Aethisteronum. Прегнин. 17-α-етінілтестостерона. Δ 4 -17-етініландростен-3-он-17-ол. З 21 Н 28 О 2. М = 312,46



Прегнин - білий або злегка жовтуватий кристалічний порошок без запаху, т. Пл. 268-274 °, не розчинний у воді, мало розчинний в спирті і ацетоні, хлороформі і в піридині. З гідрохлоридом гідроксиламіну в присутності ацетату натрію в середовищі метилового спирту утворює оксим, який, після перекристалізації з 70% -ного метилового спирту, плавиться при 226-232 °. Розчин в концентрованої сірчаної кислоти при розведенні водою і додатку хлороформу забарвлює останній в червоний колір.

Чистоту препарату визначають за відсутністю домішок (сульфатна зола не повинна перевищувати 0,1%, а втрата у вазі при висушуванні до постійної ваги при 100 ° -0,5%).

Бережуть з пересторогою (список Б), в добре закупорених банках, в сухому місці, захищеному від дії світла. Вища разова доза - 0,015 г, добова -0,05 р

Застосовують по 2 таблетки (по 5 мг) 3 рази на день; він в 5-6 разів менш активний, ніж прогестерон. Особливістю прегніна є його властивість зберігати активність і надавати терапевтичну дію при прийомі всередину, особливо сублінгвально.

При гідруванні подвійного зв'язку прегніна або заміні карбонільної групи гідроксильної активність втрачається, але при розширенні пятичленного циклу D до шестичленного - D-гомопрогестерон виявляє майже таку ж активність, як і прогестерон. Синтез D-гомопрогестерона є точне повторення синтезу прогестерону з 3-ацетату Дегідроепіандростерон-17. При дії на останній (I) синильної кислоти отриманий оксінітріл (II), який відновленням літійалюмінійгідрідом перетворений в оксіамін (III) і при обробці азотної кислотою в гомодегідроепіандростерон (IV). За допомогою реакції Оппенауера і ін. (IV) Перетворюється в D-гомопрогестерон (V):



Перетворення III в IV під впливом азотної кислоти є відомою перегрупуванням Дем'янова. Не тільки заміна пятичленного циклу на шестичленна, але і видалення З 19 -метільной групи не змінює гормональних властивостей; активність молекули підвищується і 19-норпрогестерон (VI) в 7-8 разів активніше прогестерону.

При синтезі 19-норпрогестерона виходять з метилового ефіру естрону (VII) і бічний ланцюг утворюють аналогічно попередньому. Дією реактиву Гриньяра на нітрил (VIII), що утворюється в результаті дегідратації оксінітріла (II), отримують після гідрування кетон (IX). При відновленні ароматичного кільця (Л) літієм в рідкому аміаку відновлюється і карбонильная група (IX), але гідроліз утворився вінілового ефіру (X) призводить до α, β-неграничними кетонів (XI), який при окисленні хромовим ангідридом переходить в 19-норпрогестерон ( VI):



Виходячи з метилового ефіру естрону, був отриманий за наведеною нижче схемою 19-норпрегнін (норлутін), який опинився в 3-4 рази активніше прегніна з транс-зчленуванням кілець В / С і С / D:



У 1957 р Еренштейн в США отримав 19-норпрогестерон з цис-зчленуванням кілець С / D і α-положенням бічного ланцюга (-СОСН 3) будови:



Його активність виявилася в 8 разів вища за активність прогестерону. Цей факт заслуговує на увагу, так як раніше приймалося, що стероїди з цис-зчленуванням кілець С / D є неактивними. Для отримання 19-норпрогестерона ацетат строфантідін (I) окислявся перманганатом калію в лужному середовищі і що утворилася за рахунок «лактонного» кільця з одного боку і альдегідної групи з іншого кетокислоту (II) мимовільно замикалася в лактон (III). При обробці останнього перекисом водню, в присутності лугу, бічний ланцюг окислюється до карбоксильної групи, причому під впливом лугу відбувалася інверсія у С 17, в результаті чого вийшла кислота (IV). При дії хлористого водню на (IV) наступала дегідратація з утворенням V, а при подальшому гідруванні виходила кислота з цис-зчленуванням кілець С і D (VI). При нагріванні до 200 ° віддалялися ангулярного - ОН група при С 14 і СООН - група при С 10 і утворювалася негранична при Q-С 10 ацетоксікіслота (VII). Дією оксалілхлорид на (VII) виходив хлорангидрид (VIII), який з діметілкадміем перетворювався в оксікетон (IX) і потім по Оппенауеру в 19-норпрогестерон (X):



З аналогів прегніна, що містить при С 6 і С 21 метильние групи, слід зазначити отриманий В. Петровим (Англія). Дією ацетіленід літію в рідкому аміаку на 3-ацетат дегідроепіандростерона-17 (I) синтезований 3,17-діол (II), гідроксильні групи якого захищалися дігідропіраном і дігідропіранілдіол (III) оброблявся послідовно бутиллітій і йодистим метилом, що після гідролізу призвело до пропінілдіолу ( IV). Окисленням диола (IV) по Оппенауеру синтезований відповідний кетон (V) і з нього етіленкеталь (VI). При дії на кеталей (VI) надфталевой кислоти отримана відповідна окис (VII), яка з магнійбромметілом, з розривом окисного кільця, перетворена в гліколь (VIII). Кислим гідролізом гліколь (VIII) перетворений в кетодіол (IX) і дією їдкого натру в піридині - в кетон (X). При дії на кетон (X) хлористого водню утворюється епімер, що переходить в α-метилпохідними (XI), що виявилося в 12 разів активніше прегніна:




4.4 Визначення дійсності препаратів гестагенів

Для випробування автентичності прогестерону ФС рекомендує кольорову реакцію на наявність стероїдного циклу з концентрованої сірчаної кислотою. Після додавання 3 мл води утворюється жовте забарвлення з зеленою флуоресценцією. Після додавання хлороформу обидва шару стають безбарвними. Спиртовий розчин прогестерону утворює з м-динитро-бензолом в лужному середовищі забарвлене в червоний колір з'єднання.

За ФС прогестерон ідентифікують про допомогою інфрачервоного спектра, знятого в вазеліновій олії в області 3700-400 см -1. Він повинен повністю збігатися з доданим до ФС малюнком спектра.

УФ-спектрофотометрію, засновану на вимірі оптичної щільності при 241 нм (максимум світлопоглинання). застосовують для ідентифікації прогестерону.

Для норетістерона НД вказує максимум поглинання 240 нм Як розчинник використовують етанол.

Реакція освіти оксима за рахунок наявності кетогрупи в положенні 3 стероїдного циклу може бути використана для випробування справжності норетістерона:



Реакцію осадження 2,4-дінітрофенілгідразона використовують для кількісного визначення прогестерону (гравіметричним методом) і для випробування його автентичності (по температурі розкладання 2,4-дінітрофенілгідразона):



Наявність спиртового гідроксилу в молекулі норетістерона дозволяє використовувати для випробування на справжність реакцію ацетилювання:



Ацетат норетистерону - біла кристалічна речовина (т. Пл. 158- 163 ° С), розчинна в етанолі, ацетоні і хлороформі.

Для випробування на справжність і на присутність сторонніх домішок в прогестерону, Норетистерону і медроксіп- рогестерона ацетат ФС і МФ рекомендують метод ТШХ на пластинках Силуфол УФ-254 або з використанням в якості адсорбенту кизельгура Р1 (силікагелю Р1). Оцінку проводять після прояву хроматограм шляхом порівняння положення, зовнішнього вигляду і інтенсивності забарвлення основного плями у випробуваного розчину і стандартного зразка. Допустимий вміст домішок сторонніх стероїдів в прогестерону не повинно перевищувати 1,5%.

Справжність медроксипрогестерону ацетату підтверджують також по позитивної реакції на ацетильовані з'єднання.

Норетистерон можна кількісно визначити методом непрямої нейтралізації. В його основі лежать такі хімічні реакції:



Атом водню етінільного радикала заміщається катіоном срібла, утворюючи ацетіленід срібла. Виділилося еквівалентну кількість азотної кислоти оттітровивают гідроксидом натрію.

Кількісне визначення прогестерону по ФС виконують спектрофотометричним методом в максимумі поглинання (241 нм), використовуючи як розчинник етанол. Розрахунок змісту в перерахунку на суху речовину виконують за величиною попередньо встановленого питомої показника поглинання (535).

Визначення змісту норетистерону в таблетках виконують методом УФ-спектрофотометрії при 263 нм, порівнюючи оптичну щільність зі стандартним зразком.

Описано способи аналізу прогестерону і його синтетичних аналогів методом ВЕРХ на колонках з прямою і оберненою фазами. Методика контролю якості суміші стероїдних сполук прегнанового ряду передбачає такі критерії поділу, як час утримування, селективність, дозвіл. Згідно з вимогами НД фірм, які виробляють медроксипрогестерона ацетат, випробування на справжність, однорідність дозування, наявність сторонніх домішок і кількісне визначення виконують методом ВЕРХ. Справжність підтверджують з порівняльного часу утримування основного піка на хроматограмі у випробуваного і стандартного зразків. Останні використовують в якості внутрішнього стандарту при виконанні кількісного визначення.

Прогестерон, норетистерон і медроксипрогестерону ацетат зберігають за списком Б, в сухому місці, в добре закупореній тарі, що охороняє від дії світла, при температурі не вище 20-25 ° С. Застосовують як гестагенних препаратів. Прогестерон призначають у вигляді 1% -ного або 2,5% -ного розчину в маслі для ін'єкцій. Норетистерон зберігає активність при під'язиковому застосуванні. Його призначають у вигляді таблеток «Норколут», що містять по 0,005 г норетістеро- на. Медроксипрогестерона ацетат виявляє не тільки гестагенну, але і протипухлинну дію, особливо при раку матки і молочної залози. Призначають його всередину в таблетках по 0,1-0,4 г, а також у вигляді розчинів для ін'єкцій в ампулах по 150 мг / мл. Депо-провера вводять внутрішньом'язово у вигляді суспензії по 3,3 мл (0,5 або 0,15 г в 1 мл).


Глава 5. Кортікостероїдниє гормони




5.1 Характеристика

У наднирниках розрізняють корковий і мозковий шари. Мозковий шар виділяє гормон адреналін, що володіє судинозвужувальну дію. З кори надниркових залоз виділено 29 кристалічних стероїдних сполук, які отримали назву кортикостероїдів, з яких 6 виявилися здатними продовжувати життя адреналектомірованних тварин. Всі вони є прегнановимі похідними, що містять в кільці А Δ 4 -3-кетонепредельную угруповання, а в положенні 17-кетольную або діоксіацетоновую ланцюжок; частина з них при С п має карбонільну або гідроксильну групу. Згадані кристалічні сполуки мають різною активністю як в якісному, так і в кількісному відносинах. Так, дезоксикортикостерон (II), який відносять до мінералокортикоїдів, регулює сольовий обмін; він сприяє затримці в організмі води, натрію і підвищує виділення з організму калію; крім того, він підсилює явище анаболізму (синтез білка) і запальні процеси (підвищує «запальний потенціал» організму), т. е. здатність відповідати на подразнення запальною реакцією. Кортизон і інші споріднені стероїди відносять до глюкокортикоїдів; вони впливають на вуглеводний і білковий обмін і менше на сольовий обмін. За хімічною будовою стероїдні гормони надниркових залоз є похідними прегнана (I):


вони можуть бути розділені на 11-дезоксістероіди, наприклад дезоксікорті костерон (II), 11-оксістероіди (III) і 11,17-діоксістероіди (IV) -кортізон і споріднені з ним сполуки:



Представники глюкокортикоїдів сприяють накопиченню глікогену в печінці, підвищують вміст цукру в крові, викликають збільшення виділення азоту з сечею, мають протизапальну дію.

Адренокортикотропний гормон гіпофіза (АКТГ) є фізіологічним стимулятором кори надниркових залоз, без якого неможлива нормальна функція останньої.



5.2 Дезоксикортикостерону-ацетат

Desoxycorticosteronum aceticum. Desoxycorticosteroni acetas. Desoxycortoni acetas. Дезоксикортикостерон-ацетат. 11-дезоксикортикостерон-21-ацетат. З 23 Н 32 О 4. М = 372,51.


Синоніми: Соrtеnil, Соrtехоn, Соrtiron, DОСА і ін. На відміну від багатьох кортикоидов, дезоксикортикостерон отриманий вперше в 1937 р НЕ ізолюванням з органів, а полусинтетическим шляхом (Штейгер, Рейхштейн) з 3β-ацетокси-5-етіеновой кислоти (I) - побічний продукт окислення 5,6-дибром-3-ацетату холестерину при синтезі дегідроепіандростерона. За допомогою тіонілхлориду кислота ця перетворена в хлорангидрид (II) і потім за допомогою діазометана в діазокетон (III). При гідролізі 3-ацетильной групи їдким лугом отриманий (IV), який ацетолізом перетворений в 21-ацетокси-5-Прегніл-3-ол-20-он. Після приєднання однієї молекули брому утворюється дибромід (VI) окислен хромової кислотою до 3-кетопроізводного (VII) і дебромірованіем цинковим пилом отриманий дезоксикортикостерон-ацетат (VIII):



Надалі метод цей (1940) був поліпшений; діазокетон по Оппенауеру окислен до 21-діазопрогестерона (IV) і потім вже ацетолізом перетворений в дезоксикортикостерон-ацетат (VIII).

Як показав далі Рейхштейн, 3-кето-4-етіеновая кислота (X), отримана окисленням хромової кислотою Зβ-окси-5-етіеновой кислоти (IX), після попереднього приєднання брому до подвійного зв'язку і подальшого дебромірованія, може бути перетворена в 21- ацетоксіпрегнан-3,20-діон (XIII), при бромуванні з заміною водню у с 4 (XI) і відщепленні бромистого водню за допомогою піридину (XII), а також інших реакцій, описаних раніше:



Вілдс і шунка (1948) показали, що при дії оксалілхлорид на натрієву сіль 3-кето-4-етіеновой кислоти (X) утворюється хлорангидрид, який діазометаном переводять в 21-діазопрогестерон і дією потім оцтової кислоти в дезоксикортикостерон-ацетат.

Кращі виходу отримані Шорма і Черні (1952) при приєднанні ціаністого водню до дегідроепіандростерон-ацетату, відщепленні води і селективному гідруванні дегідронітріла в присутності Рd-СаСO 3. При гідролізі утворюється кислота I:


Ще в 1939 р дезоксикортикостерон-ацетат був отриманий з дегідроепіандростерона приєднанням ацетилену, з частковим гидрированием 17-вініландростен-3,17-диола і його окисленням за допомогою чотириокису осмію до гліцеринового похідного. При відщепленні води утворюється дезоксикортикостерон; ще краще ацетильований продукт шляхом перегонки з цинковим пилом перетворювати в дезоксикортикостерон-ацетат;



Практичне значення має використання Зβ-окси-5-холеновой кислоти (I), одержуваної в якості побічного продукту при окисленні холестерілацетатдіброміда.

Після перетворення її в метиловий ефір і дії 2 мовляв магній-бром-фенілу отримують відповідний третинний спирт, який ацетилируют. При відщепленні води кип'ятінням з оцтової кислотою і дезацетілірованіі за допомогою поташу вторинна спиртова група при С 3 окислюється по Оппенауеру і бромування за допомогою N-бромсукцинімід, а також подальшим відщепленням бромистого водню за допомогою диметиланилина отримують диен. При подальшій дії N-бромсукцинімід на світлі утворюється 21-бромпохідні, від якого бічний ланцюг отщепляют хромової кислотою після попереднього ацетилювання:


У подальших, технічно важливих синтезах як вихідний продукт використовували 5-Прегніл-3-β-ол-20-онацетат. При обробці його тетраацетатом свинцю утворюється 21-ацетоксіпроізводное, яке при дії розчину бікарбонату калію селективно деацетилюється у С 21 і отримане з'єднання за допомогою хлористого тноніла перетворюють в С 21 хлорид, а при дезацетілірованіі при С 3 і окисленні по Оппенауеру - в 21-хлорпрогестерон . При взаємодії останнього з ацетатом натрію утворюється дезоксикортикостерон-ацетат:



Дезоксикортикостерон-ацетат - білий або білий з кремовим відтінком кристалічний порошок без запаху, т. Пл. 154-160 °. Розчинний в хлороформі, ацетоні, діоксані і спирті, не розчиняється у воді. Обертає площину поляризації вправо. Питома показник поглинання 430 (з = 0,001, 95% -ний спирт) при 240 ммк. Відновлює аміачний розчин нітрату срібла і забарвлюється концентрованої сірчаної кислотою; при додаванні хлороформу останній забарвлюється в помаранчевий колір з червоною флуоресценцією, водний шар забарвлюється в зеленуватий колір.

Чистоту препарату визначають за відсутністю сульфатної золи і втрати у вазі (допускається втрата при висушуванні до постійної ваги при 100-105 ° не більше 0,5%).

Бережуть з пересторогою (список Б), в банках оранжевого скла з притертими пробками, в сухому місці.

Вища разова доза - 0,01 г, добова - 0,02 г.

Застосовують при хворобі Аддісона, загальної м'язової слабкості і інших захворюваннях внутрішньом'язово в масляних розчинах по 5 мг 3 рази на тиждень до 10 мг щодня. Препарат викликає затримку іонів натрію і підвищення виділення калію; протипоказаний при гіпертонічній хворобі, серцевій недостатності, атеросклерозі і ін.




5.3 Кортизон-ацетат

Cortisonum aceticum. Cortisoni acetas. Кортизон-ацетат. 11-дегідро-17α-оксікортікостерон-21-ацетат Δ 4 -прегнендіол-17α, 21-Тріон-3,11,20,21-ацетат. З 23 н 30 про 6. М = 402,5.



Синоніми: Аdreson, Соrtisуl, Соrtоnе.

Описано численні методи синтезу; з них практичний інтерес мають лише ті, які призводять до значних виходів.

Всього доцільніше виходити з прогестерону, який за допомогою мікробіологічного окислення перетворюють на 11-оксипрогестерон і потім окисленням в кортизон:


Петерсоном зі співробітниками (1953) було показано, що для синтезу кортизону доцільне використання речовини S Рейхштейна (I), яке при окисленні перетворюють в 11-епігідрокортізон (II); при окисленні ацетату останнього утворюється кортизон (III):



Речовина S Рейхштейна не отримало медичного застосування, але виявилося важливим для синтезу кортизону.Ще в 1937 р автором було показано, що воно може бути синтезовано з дегідроепіандростерона за схемою:

Як випливає зі схеми, незвичайним є утворення диена (IV), який виникає в результаті дегідратації (II), і перегрупування (V) в (VI), під впливом піридину, відкрита ще в 90-х роках Лобрі-де-Брюін на прикладі гліцеринового альдегіду, ізомерірующегося в диоксиацетон.


Синтез кортизону здійснений також за методом М.М. Суворова з прогестерону (I) із застосуванням мікробіологічних реакцій.

За допомогою цвілеві грибки Rhizopus nigricans [I] окислюють до І ос-оксипрогестерона (II) і подвійну зв'язок при С 4 гидрируются в присутності паладію, обложеного на кальції карбонат, при звичайних умовах в середовищі піридину до освіти прегнанол-11α-діона-3, 20 (III). Останній піддають окисленню біхроматом калію в присутності сірчаної кислоти і утворився прегнантріон-3,11,20 (IV) знову відновлюють в пиридиновом розчині боргідридом натрію. При виливання в охолоджену розбавлену соляну кислоту виділяється прегнанол-3α-діон-11,20 (V). З метою отримання прегнандіол-3α, 17α-діона-11,20 (VIII), прегнанол-3α-діон-11,20 (V) кип'ятять з оцтовим ангідридом і отримують енолацетат (VI), який окислюють надфталевой кислотою. Утворену окис (VII) гидролизуют 1% -ним водно-метанольна розчином їдкого натру і продукт реакції - прегнандіол-3α, 17α-діон-11,20 (VIII) витягають хлороформом.

Бромування (VIII) виробляють діоксандібромідом, в результаті чого отримують 21-бромпрегнан-діол-3α, 17α-діон-11,20 (IX). Окислення виробляють бромсукцинімід в метанолі при звичайній температурі; при цьому утворюється 21-бромпрегнанол-17α-Тріон-3,11,20 (X). Для отримання ацетату дігідрокортізона (XI) 21-бромпрегнанол-17α-Тріон-3,11,20 нагрівають в диметилформаміді з безводним ацетатом натрію і продукт реакції висаджують водою.

Бромування ацетату дігідрокортізона (XI) виробляють діоксандібромідом в диметилформаміді у присутності каталізатора п-толуолсульфокіслоти і отриманий бромід (XII) висаджують водою. Перетворення броміду (XII) в семікарбазон кортизон-ацетату (XIII) виробляють обробкою семікарбазідом в суміші хлороформу і третічнобутілового спирту. При розчиненні останнього в оцтової кислоти і дії піровиноградної кислоти відбувається пересемікарбазірованіе і утворюється кортизон-ацетат (XIV):



Кортизон-ацетат - білий або білий з жовтуватим відтінком порошок, т. Пл. 235-245 ° (з разл.), Не розчинний у воді, мало розчинний в спирті і в ацетоні, розчиняється в хлороформі, обертає площину поляризації вправо. Питома показник поглинання 390 ± 10 (с = 0,001, 95% спирт) при 238 ммк. При нагріванні до 70 ° метанольного розчину препарату з розчином фенілгідразінсульфата виникає жовте забарвлення, а при лужному гідролізі спиртовим розчином їдкого калі і додаванні сірчаної кислоти відчувається запах етилацетату. Розчин препарату в концентрованої сірчаної кислоти виявляє жовту флуоресценцію, яку краще спостерігати при нанесенні на білу порцелянову платівку (відміну від преднизона).



Чистоту препарату визначають за відсутністю галогену (проба Бейльштейна), втрати у вазі (не більше 0,5% при висушуванні до постійної ваги при 100-105 °), золи, семікарбазона кортізонацетата (мінералізований концентрованої сірчаної кислотою в присутності пергідролем препарат з реактивом Несслера в лужному середовищі не повинен виявляти більш інтенсивного забарвлення, ніж еталон на аміак, приготований з тими ж реактивами по ГФ).

Кортизон-ацетат кількісно може бути визначений за оптичної щільності при реакції з Антрон в концентрованої сірчаної кислоти.

Кортизон-ацетат розчиняють в абсолютному спирті (приблизно 1 мг в 1 мл), частина розчину доводять до обсягу в 2 мл абсолютним спиртом, додають 2 мл реактиву (0,2% -ний розчин аніліну в 96% -ної сірчаної кислоти) і через 1 ч оптичну щільність визначають при 480 ммк спектрофотометром.

Бережуть з пересторогою (список Б), в скляних, добре закупорених банках, в захищеному від світла місці. Вища разова доза - 0,15 г, добова -0,3 р

Застосовують всередину і внутрішньом'язово при ревматизмі, подагричних, інфекційних і псоріатичних артритах, бронхіальній астмі, гострих лейкозах та інших захворюваннях. Дітям кортизон призначають внутрішньом'язово, починаючи з 0,05 г 2 рази на день. Випускають в порошках, таблетках по 0,025 і 0,05 г, флаконах по 5 і 10 мл суспензії, що містить 25 мг в 1 мл.



5.4 Похідні і аналоги кортизону

Синтез і вивчення аналогів і похідних кортизону привів до ряду цікавих з'єднань, які отримали застосування в медицині. До них відноситься гідрокортизон (I), преднізон (II), преднізолон (III) і ін .:



Гідрокортизон (I) виявився дещо більш активним, ніж кортизон; 2/3 його дози відповідають приблизно 1 дозі кортизону. Преднизон (II) активніше кортизону в 3-5 разів, а преднізолон (III) за дією близький до преднізону. При заміні пятичленного кільця (D) кортизону на шестичленное активність зменшується на 30-60%. Знижену активність виявляє і 19-норкортізон, будови:

При введенні а-метильної групи в положення 16 активність зростає приблизно на 50% (Хогг); аналогічно 2-метілкортізон в кілька разів активніше кортизону. 2-Метілгідрокортізон в 10 разів вища за активність гідрокортизону.



Введення галогену в кортизон або гідрокортизон підвищує їх фізіологічна дія (Хогг, Фрід і Сабо); 9-фторпреднізолон по Хогга в 50 разів активніше преднізолону. Введення фтору в інші положені я молекули гідрокортизону різко посилює їх дію. Ще більш активний ацетат 6α, 9α-дифтор-16α-метилпреднізолону, який в 700 разів активніше гідрокортизону.

Кортизон і його аналоги широко застосовують при лікуванні ревматоїдних артритів. Хворі, прикуті до ліжка, набувають здатність рухатися; гострі болі зникають, але терапія кортизоном, однак, не знищує причину захворювання, і болю іноді виникають незабаром після припинення прийому кортизону або кортізоноподобной препаратів. При тривалому їх застосуванні виникає остеопороз.




5.5 Гидрокортизон

Нydrocortisonum. Гідрокортизон. 17-оксікортікостерон. 4-Прегніл-11β, 17α, 21-тріол-3,20-діон. З 21 Н 30 О 4. М = 346,24.


Синоніми: Cortisol, Cortril, Hydrocortal і ін.


За хімічною будовою гідрокортизон відрізняється від кортизону наявністю при С 11 -гідроксільной групи (замість карбонільної). Отримують біохімічним шляхом, напівсинтезу з кортизону або чисто хімічним шляхом.

Біохімічним шляхом отримують окисленням речовини S Рейхштейна за допомогою Curvularia lanata з 40% -ним виходом (1955) або з прогестерону (1954).

Напівсинтетичним шляхом отримано різними методами.

Хороші виходи досягнуті при взаємодії кортизону (I) з етиленгліколем у присутності п-толуолсульфокіслоти; утворюється 3,20-бісетіленкеталь (II) відновлюють LiА1Н 4 до вторинної спиртової групи при С 11, після чого обидві Етіленгліколевие групи гидролитически розпадаються і ацетилюванням отримують речовину S (III):



Нові напівсинтетичні методи описані Олівето з співробітниками (1953-1956), які виходили з прегнан-11β, 17α-діол-3,20-діона, дезоксихолевої кислоти або з прегнан-3α, 11β, 17α-тріол-20-вона. З останнього отримано гідрокортизон-11-форміат-21-ацетат, який після гид- 'Роліз обох ефірних груп привів до бажаних результатів.

17-Гидрокортизон - білий кристалічний порошок, т. Пл. 217- 220 °, мало розчинний у воді. Застосовують для тих же цілей, що і кортизон. Розчини готують на фізіологічному розчині натрію хлориду або на 5-10% -ому розчині глюкози з розрахунку 0,2 мг гідрокортизону в 1 мл.

Гідрокортизон-ацетат - білий кристалічний порошок, т. Пл. 223-225 °, не розчинний у воді. Отримують ацетилюванням гідрокортизону. При кислотному або лужному гідролізі утворюється поряд з гідрокортизоном оцтова кислота.

При внутрішньом'язовому введенні у вигляді суспензії надає таку ж дію, як кортизон-ацетат. При місцевому застосуванні має протизапальну дію. Застосовують також у вигляді 1-2,5% -ної мазі при алергічних дерматозах; в очній практиці застосовують 0,2 0,5% -ную суспензію (по 1-2 краплі кожні 2-4 год) або мазь (3-4 рази на день) при лікуванні кератитів, кон'юнктивітів, иритов.




5.6 Альдостерон

Аldostеronuм. Альдостерон. 11β, 21-диокси-Δ 4 -прегнен-3,20-діон-18-аль. З 20 Н 29 О 5. М = 349,23.



Вперше виділений з залоз наднирників в 1953 р Сімпсоном з співробітниками (Швейцарія). Частковий синтез з лактона кортікостеронкіслоти (I) здійснено Еувом з співробітниками в 1955 р Лактон цей перетворений в 3,20-біс-етіленкеталь (II), відновлений літій-алюміній-гидридом до ціклополуацеталя (III) і звільнений кислим гідролізом від етіленглікольних залишків:



Шмідлін з співробітниками (1955) здійснили частковий синтез альдостерону, виходячи з діолетіленкеталя (IV) Саретта окисленням його до оксікетона (V). За допомогою діетілкарбоната ними отримано кетоефір (VI), алкилированием якого СН 3 J і відновленням продукту натрій-бор-гидридом, а також циклизацией після лужного гідролізу отримано лактон (VII). Окисленням хромовим ангідридом в піридині кетогруппу регенерувати в положенні I і реакцією з етоксіетінілмагнійбромідом отриманий ацетиленовий карбинол (VIII). При подальшому гидроксилировании в присутності четирехокнсі осмію і селективному відновленні потрійний зв'язку в присутності паладію була введена діольная угруповання (IX). Окисленням йодною кислотою отримано похідне ацетону (X), яке за допомогою трибромідом фосфору або тіонілхлориду перетворено в неграничний альдегід (XI).

При гідруванні з паладієм отриманий ізомер (XII), який дією бензойної кислоти і триетиламіну, в киплячому ксилолі, ціклізован з утворенням похідного Δ 5,16 -прегнадіена (XIII). При подальшому гідруванні з паладієм була видалена Δ 16 подвійна зв'язок і отриманий кетон (XIV) Сконденсована з діметілоксалатом до гліоксалата (XV). Йодированием і подальшим метанолізом отриманий йодкетон (XVI), з якого ацетатом калію в ацетоні і подальшим кислим гідролізом оцтовою кислотою отримано лактон 21-ацетату рацемической кетостеронів-18-кислоти (XVII). При дезацетілірованіі хлорного кислотою утворюється оксікетон (XVIII) був переведений в 3,20-біс-етіленкеталь (XIX). Відновленням літійалюмінійгідрідом отримано 3,20-біс-етіленкеталь альдостерону (IV) і кислим гідролізом - рацемический альдостерон:



За допомогою мікробіологічного 21-гідроксилювання вдалося цей синтез істотно вкоротити і отримати оптично активний (+) альдостерон (Вітер з співробітниками, 1956). Так, кислим гідролізом рацемічного етіленкеталя (XIV) прогестеронові похідне (XX) за допомогою мікроорганізму Ophiobolus herpotrichus гідроксильованого в позиції 21, причому реагував тільки один з обох антиподів, в результаті чого отримано чистий лактон (+) кортикостерон-18-кислоти (XVIII). Потім через оптично активний проміжний продукт (XIX) і (IV) він переведений в (+) альдостерон.

Альдостерон - безбарвні кристали, т. Пл. 164-169 (гідрат плавиться при 105-112 °, причому плав знову твердне і вдруге плавиться при 155-165 °.

Альдостерон приблизно в 100 разів активніше дезоксикортикостерона і відомих минералкортикоидов. При Аддісона хвороба він діє в дозах в 20-30 разів менших, ніж дезоксикортикостерон. 21-Моноацетат альдостерону в 1,25 рази і диацетат в 136 разів менш активний, ніж альдостерон (Сімпсон з співробітниками, 1953-1955).




5.7 Преднизон

Prednisonum. Преднизон. Метікортен. Δ 1,4 -прегнандіендіол-17α, 21-tpіoh-3,11,20 або Δ 1 -дегідрокортізон. З 21 Н 26 О 5. М = 358,44.

Синоніми: Decortin.

Отримують з кортизон-ацетату мікробіологічними шляхом з допомогою Mycobacterium і Bacillus megatherium. При цьому відбувається дегидрирование і дезацетілірованіе.

Преднизон-білий кристалічний порошок без запаху, гіркого смаку, т. Пл. 227 ° (з разл.), Не розчинний у воді, мало розчинний в хлороформі, в метиловий і етиловому спиртах. Фенілгідразінсульфат в метанольна розчині викликає жовте забарвлення; концентрованої сірчаної кислотою забарвлюється також в жовтий колір (на відміну від преднізолону). При нанесенні цього розчину на білу порцелянову платівку і розгляданні в ультрафіолеті спостерігається жовтувато-зелена флуоресценція (відміну від кортизон-ацетату).

Чистоту препарату визначають за відсутністю вологи при висушуванні до 100-105 ° (не більше 0,5%), залишку при прожаренні.

Оптичну щільність D розчину вимірюють при довжині хвилі 239 ммк в кюветі, товщиною шару 1 см (в контрольну кювету поміщають метіловиі спирт).

0,02-0,05 г преднизона розчиняють в 70-80 мл метанолу, розчин розбавляють метанолом до 100 мл. 5 мл даного розчину розбавляють метанолом до 100 мл і вимірюють оптичну щільність, як зазначено вище.

Бережуть з пересторогою (список Б), в добре закупорених банках, в захищеному від світла місці.

Застосовують всередину по 0,02-0,03 г в день, у вигляді порошку або таблеток по 0,001, 0,0025 і 0,005 г.




5.8 Преднізолон

Prednisolone. Преднізолон. Δ 1 -дегідрогідрокортізон. 11β, 17α-21-трігідрооксі-Δ 1,4 -прегнандіен-3,20-діон. З 19 н 28 про 5. М = 336,22.

Синоніми: Decortin Н, Metacortandrolon, Miticortelon, Hydrocortancyl і ін.



Відкрито одночасно з предннзоном (1955) і вперше синтезований в 1955 р Герцогом з співробітниками (США). Ацетат преднизона переводять в 3,20-дісемікарбазон і відновлюють при С 11 калійборгідрідом. Отриманий таким шляхом преднізолон-3,20-дісемікарбазон розщеплюють азотної кислотою, утворюється 21-ацетат преднізолону (з 5% -ним виходом). Кращі виходу (10%) отримані дегидрированием гідрокортизону за допомогою двоокису селену, тетраацетата свинцю і мікробіологічними шляхом з допомогою Согупе bacterium simplex.

Преднізолон - білий кристалічний порошок, т. Пл. 240-241 ° (з разл.); його ацетат плавиться при 237-239 ° (з разл.).

Застосовують для тих же цілей, що і преднізон, в дозах 0,001, 0,0025, 0,005 г в таблетках.



5.9 Дексаметазон

Dexamethasonum. Дексаметазон. 16α-метил-9α-фторпреднізолон. 9α-фтор-11β, 17а, 21-тригідрокси-Δ 1 -прегнен-3,20-діон. З 21 Н 30 О 5. М = 335,02.



Синоніми: Decadron, Dexadrol, Fortecortin.

Вперше отримано Фрідом і Сабо в 1954 (США). Вони виходили з 11-епімер гідрокортизону (1), який отримували гідроксилюванням речовини S Рейхштейна.

Ацетнлірованіем і тозілірованіем був отриманий 21-ацетат-11α-тозилат, який переводився в 17α-окси-21-ацетокси-Δ 4,9 (11) -прегнадіен-3,20-діон (II). При взаємодії з м-бромацетамідом в водному діоксані в присутності хлорної кислоти виникав 9-α-бромгідрокортізонацетат (III), який при дії ацетату калію в етанолі перетворювався в 9β, 11β-окис (IV). При взаємодії останнього з безводним фтористим воднем в хлороформі виходив фторкортізонацетат (V) з 50% -ним виходом:



Гіршману з співробітниками (1956) вдалося підвищити вихід на останній стадії до 75% при застосуванні в якості реакційного середовища органічних підстав.

9β, 11β-Епоксид (IV) є єдиною щаблем синтезу Δ 4,9 (11) -прегнадіенового похідного мікробіологічними шляхом з допомогою Сurvulаrіа lаnаtа або Сunninghаmеllа blaкеslеаnа.

Дексаметазон - білий порошок, т. Пл. 260-262 ° (з разл.).

Застосовують всередину аналогічно іншим кортикостероидам; препарат добре переноситься в терапевтичних дозах (0,5-1 мг), відносно мало впливає на обмін електролітів і не викликає затримки хлористого натрію і води в організмі.




5.10 Визначення дійсності препаратів кортикостероїдів

У випробуваннях, рекомендованих для оцінки якості кортикостероїдів і їх аналогів, багато спільного. При нагріванні на водяній бані суміші спиртового розчину кортикостероида і реактиву Фелінга випадає червоно-помаранчевий осад. Реакція обумовлена ​​відновні властивості а-кетольной угруповання, яка легко окислюється до карбоксильної:



У присутності реактиву Фелінга:



Відновлюючі властивості а-кетольной групи лежать в основі реакції «срібного дзеркала», яке утворюють ряд кортикостероїдів (кортизону ацетат, гідрокортизон, преднізолон):


Кортикостероїди, що містять а-кетольную групу (кортизон і його аналоги), дають кольорову реакцію, засновану на окисленні 0,5% -ним розчином хлориду тріфенілтетразолій в етанолі в присутності 10% -ного розчину гідроксиду тетраметиламонію. З'являється червоне забарвлення, обумовлена ​​утворенням формазану:



Реакцію використовують для фотоколориметричного визначення при довжині хвилі 525 нм. Кортикостероїди можна відрізнити один від одного по реакції з концентрованої сірчаної кислотою (табл.).


Таблиця 2

Результати взаємодії кортикостероїдів з концентрованої сірчаної кислотою

лікарська речовина

забарвлення розчину

флуоресценція

Дезоксікортона ацетат

Жовта (після додавання води - фіолетова) Червона (після нагрівання до 80-90 ° С)

Зеленувато-жовте забарвлення з червоною флуоресценцією (після додавання етанолу)

кортизону ацетат

Помаранчева (через 2 хв)

Жовта (через 5 хв в УФ-світлі)

гідрокортизон

Жовта, що переходить в червону (через 5 хв)

Жовто-зелена, що переходить в зелену (після додавання води)

преднізолон

Зелена, що переходить в червону

Відсутнє


Відомі й інші випробування на окремі кортикостероїди. Розчин кортизону ацетату в етанолі, випарений насухо в вакуумі, після нагрівання до 70 ° С протягом 30 хв, з 1 М розчином гідроксиду натрію набуває жовте забарвлення, що має інтенсивне поглинання при 370 нм (на відміну від преднізолону, який в тих же умовах набуває лише слабо-жовте забарвлення).

Кортикостероїди можна відрізняти один від одного за допомогою реакцій на ті чи інші функціональні групи.

При нагріванні на водяній бані спиртових розчинів лікарських речовин з розчином фенілгідразину з'являється жовте забарвлення. Реакція обумовлена ​​утворенням фенілгідразона (з кетонної трупою в положенні 3) і на прикладі кортизону ацетату відбувається за схемою:



Для ідентифікації лікарських речовин, що представляють собою складні ефіри, використана реакція отримання ацетогідроксамовой кислоти, яка потім з солями заліза (III) утворює сполуки, забарвлені в темно-вишневий (кортизону ацетат) або червоно-коричневий (дезоксікортона ацетат) колір:


Ацетильную групу можна виявляти після гідролізу кортизону і гідрокортизону ацетатов в спиртовому розчині гідроксиду калію. Подальше додаток концентрованої сірчаної кислоти призводить до утворення етилацетату, що має характерний запах. Ця реакція рекомендована ФС для випробування на справжність гідрокортизону ацетату:



Для якісного і кількісного аналізу кортикостероїдів і їх аналогів використовують спектрофотометрію в УФ-області. Розрахунок змісту лікарської речовини виконують по питомій показнику поглинання або (преднізолон) по оптичної щільності ДСО. У табл. наведені умови, в яких ФС рекомендують виконувати випробування на справжність і спектрофотометрическое визначення лікарських речовин, похідних кортикостероїдів.


Таблиця 3

Умови спектрофотометрического визначення кортикостероїдів

лікарська речовина

розчинник

Максимум поглинання, нм

Питома показник поглинання

Дезоксікортона ацетат

етанол

241

430-450

кортизону ацетат

етанол

238

390 І

гідрокортизону ацетат

етанол

241

395 1

преднізолон

метанол

242

400-430


Для встановлення справжності та проведення випробувань на сторонні домішки ФС рекомендована також ІК-спектроскопія і метод ТШХ. Так, для випробування справжності преднізолону рекомендовано знімати ІК-спектр в вазеліновій олії в області від 3700 до 400 см -1 і порівнювати його з доданим до ФС малюнком спектра.

Методом ТШХ на пластинках Силуфол УФ-254 або Сорбфіл встановлюють у всіх лікарських речовинах наявність домішок сторонніх стероїдів. На пластинку крім випробуваного розчину наносять стандартні зразки різних кількостей стероїдів, домішки яких виявляють. До складу рухомої фази входять метіленхлорід, метанол, хлороформ, вода в різних співвідношеннях. Виявлення плям проводять в УФ-світлі з довжиною хвилі 254 і 365 нм. Проявником може також служити фосфорномолібденовая кислота. Сумарний вміст домішок не повинно перевищувати 2-4%.

Ідентифікувати і визначити зміст дезоксікортона ацетату спектрофотометричним методом можна за допомогою реакції, заснованої на взаємодії з гідразином ізатину. Оптичну щільність утворився гідразону вимірюють в середовищі діоксану при довжині хвилі 445 нм.

Методики фотоколориметричного визначення гідрокортизону ацетату та інших 3-кетостероілов засновані на використанні в якості реактивів на кетогруппу при С-3 стероїдного циклу: фенілгідразину, 4-аміноантипірину, ізоніазиду, боргідріда натрію. Мікроколоночную ВЕРХ застосовують для ідентифікації та випробувань на чистоту ряду кортикостероїдів: дезоксікортона ацетату, кортизону ацетату, преднизона ацетату і преднізолону. Для аналізу використовують вітчизняний прилад «Мілліхром» з УФ-детектором при 238 нм. Кількісний вміст домішок встановлюють методом внутрішньої нормалізації. Метод ВЕРХ в прямофазном і обрашеннофазном варіантах використаний для кількісного визначення гідрокортизону ацетату і преднізолону в мазі. Для аналізу на прямий фазі використовують суміш хлороформ-метанол (93: 3), на зворотному - метанол. Лікарські препарати кортикостероїдів зберігають за списком Б, в добре закупореній тарі, оберігаючи від дії світла. Дезоксікортона ацетат, який є мінералокортикостероїдів, застосовують при хворобі Аддісона, міастенії, астенії, загальній м'язової слабкості і інших захворюваннях. Вводять внутрішньом'язово у вигляді олійних розчинів від 0,005 г 3 рази на тиждень до 0,01 г щодня. Лікарські препарати глюкокортикостероїдів мають протизапальну, десенсибілізуючу, антиалергічну та антитоксичну дію. Їх застосовують для лікування ревматизму, різних форм поліартриту, бронхіальної астми, шкірних і різних алергічних захворювань. Кортизону ацетат призначають внутрішньо по 0,1-0,2 г на добу, гідрокортизон - у вигляді 25% -ної суспензії в порожнину суглобів. Преднізалон за характером дії аналогічний кортизону, але більш активний. Тому його вищі дози: разова - 0,015 г, добова - 0,1 г (всередину). Для місцевого застосування при очних і шкірних захворюваннях випускають 0,5-1% -ві гідрокортизонову і 0,5% -ную преднизолоновую мазь. В результаті дослідження впливу галогенів, введених в молекулу кортикостероїдів, на їх фармакологічну активність були синтезовані моно- і діфторпроізводние преднізолону. Вони містять в положенні 9 один атом фтора- дексаметазон (Dexamethasone), триамцинолон (Triamcinolone) або в положеннях 6 і 9 два атома фтору - флюметазона півалат (Flumethasone Pivalate) і флюоцінолона ацетонід (Fluocinolone Acetonide):



Введення атома фтору в положення 9а здійснюють дією фтороводорода, а освіту подвійного зв'язку в положення 1-2 - мікробіологічними шляхом.За фізичними властивостями зазначені лікарські речовини схожі з розглянутими кортикостероїдами. В основі способів їх випробувань на справжність-чистоту і кількісного визначення лежать методи ІЧ і УФ-спектрофотометрії, ТШХ, ВЕРХ. Широкі дослідження в галузі стандартизації та створення нових лікарських форм СИНАФЛАНУ, інших коргікостероідов проведені на кафедрі фармхімії П'ятигорської фармацевтичної академії (М.В. Гаврилін). Фторпохідні відрізняються більш активним ніж У преднізолону, протизапальну, антиалергічну дію. Вони мають високу ефективність при місцевому застосуванні. Дексаметазон в 35 разів активніше кортизону. Дексаметазон призначають всередину до 0,002-0,003 г, а триамцинолон - до 0,01-0,02 г на добу. Флюметазона півалат і флюоцінолона ацетонід застосовують у вигляді 0,02-0,025% -них мазей, кремів, емульсій.


висновки

Стероїдні гормони - група фізіологічно активних речовин (статеві гормони, кортикостероїди та ін.), Що регулюють процеси життєдіяльності у тварин і людини. У хребетних синтезуються з холестерину в корі надниркових залоз, клітинах Лейдіга сім'яників, в фолікулах і жовтому тілі яєчників, а також в плаценті.

· Гормони коркового шару надниркових залоз:

o Кортикостероїди:

§ Кортизон,

§ Гидрокортизон,

§ Кортикостерон,

§ прегнан,

§ Преднізолон.

· Статеві гормони

o Андрогенние (чоловічі):

§ андростерона,

§ Тестостерон,

§ Метилтестостерон.

o Естрогенні (жіночі):

§ Естрон (Фолікулін),

§ Естрадіол,

§ Естріол,

§ Етінілестрадіол.

Стероїдні гормони є похідними ряду вуглеводнів, головним чином прегнана, андростан, естрана:



Вони подібні між собою за хімічною структурою. Відмінність від андростан складається лише в тому, що прегнан має в молекулі етільний радикал, а естран - ароматичне ядро ​​і у нього відсутня одна з метальних груп.

Структурною основою стероїдних гормонів є гидрірованний скелет вуглеводню циклопентанпергідрофенантрену:



Метильние групи, приєднані до стероидному циклу в положеннях 10 і 13, називаються ангулярного. Радикал R і атоми водню (в положеннях 8, 9, 14) орієнтовані в просторі в цис- або транс-положенні. Умовно прийнято вважати, що ангулярного метильние групи розташовані над площиною креслення (це позначають суцільною лінією). Якщо інші заступники перебувають у цис-положенні, т. Е. В одній площині з ангулярного групами (Р-конфігурація), то їх також позначають суцільною лінією, а якщо в транс-положенні (а-конфігурація), то пунктирною лінією.

До числа похідних прегнана відносяться кортикостероїди і гестагенні гормони, похідними андростан є андрогенні гормони, а естрана - естрогенні гормони.

Виходячи з представленої загальної формули і функціональних груп (заступників), зазначених у табл., Можна написати хімічні формули кожної групи стероїдних гормонів.


Група гормонів

подвійний зв'язок

заступники

X 1

Х 2

R

кортикостероїди

ен-4

диен 1,4

= О

Н

ОН

= О

СО-СН 2 ОН

ОН

гестагени

ен-4

= О

Н

СО-СН 3

андрогени

ен-4

= О

Н

ОН

естрогени

тріен-1,3,5

(Немає С-19)

ОН

Н

ОН

= О


Ті, хто має стероидную структуру напівсинтетичні аналоги зазначених груп стероїдних гормонів містять в своїх молекулах ряд інших атомів і функціональних груп.

Стероїдний цикл, зазначені функціональні групи впливають на фізико-хімічні властивості гормонів і їх аналогів. На використанні цих властивостей засновані способи випробувань на справжність, кількісне визначення, встановлені умови зберігання і стабільність лікарських речовин, що мають стероидную структуру.

При випробуванні на справжність для підтвердження стероїдного циклу в молекулах широко використовують реакцію утворення забарвлених і флуоресціюючих речовин при дії концентрованої сірчаної кислотою. а-Кетольную групу відкривають за рахунок прояву відновлювальних властивостей кетогруппу виявляють реакцією освіти ке- токсімов при взаємодії з гідроксиламіном, а також гідразонів - з фенилгидразином і іншими гидразинами і гідразид. Наявність спиртового і фенольного гидроксилов в молекулах підтверджують реакцією етерифікації з подальшим встановленням температури плавлення утворюються ефірів, а наявність складноефірних груп (в ацетат, пропіонат, енантата і ін.) - або по утворенню забарвлених солей гідроксамових кислот, або реакціями гідролізу в лужному або кислому середовищі . При наявності фенольного гідроксилу в молекулі (природні і синтетичні естрогени) використовують також реакції галогенування і освіти азосоединений. Ряд перерахованих хімічних реакцій застосовують для кількісного визначення стероїдних гормонів і їх аналогів титриметричних або фотоколориметричний методами. Випробування на справжність і кількісне визначення виконують також методом УФ-спектрофотометрії.



Список використаної літератури

1. Арзамасцев А.П. Фармакопійний аналіз - М .: Медицина, 1971.

2. Бєліков В.Г. Фармацевтична хімія. У 2 частинах. Частина 1. Загальна фармацевтична хімія: Учеб. для фармац. ін-тів і фак. мед. ін-тів. - М .: Вища. шк., 1993. - 432 с.

3. Глущенко М.М. Фармацевтична хімія: Підручник для студ. середовищ. проф. навч. закладів / М.М. Глущенко, Т.В. Плетенева, В.А. Попков; Під ред. Т.В. Плетеневой. - М .: Видавничий центр «Академія», 2004. - 384 с.

4. Драго Р. Фізичні методи в хімії - М .: Мир, 1981

5. Кольтгоф І.М., Стенгер В.А. Об'ємний аналіз В 2 томах - М .: Державне науково-технічне видавництво хімічної літератури, 1950

6. Коренман І.М. Фотометричний аналіз - М .: Хімія, 1970

7. Коростельов П.П, Фотометричний і комплексометріческого аналіз в металургії - М .: Металургія, 1984, 272 с.

8. Логінова Н.В., Полозов Г.І. Введення в фармацевтичну хімію: Учеб. посібник - Мн .: БДУ, 2003.-250 с.

9. Мелентьєва Г.А., Антонова Л.А. Фармацевтична хімія. - М .: Медицина, 1985.- 480 с.

10. Міскнджьян С.П. Кравченюк Л.П. Полярографія лікарських препаратів. - К .: Вища школа, 1976. 232 с

11. Фармацевтична хімія: Учеб. посібник / За ред. Л.П. Арзамасцева. - М .: ГЕОТАР-МЕД, 2004. - 640 с.

12. Фармацевтичний аналіз лікарських засобів / Під загальною редакцією В.А. Шаповалової - Харків: ІМП «Рубікон», 1995

13. Фармацевтичний аналіз: Навч. посіб. для студ. вищ. фармац. навч. закл. III-IV рівнів акредитації / П.О. Безуглий, В.О. Грудько, С.Г. Леонова та ін .; За ред. П.О. Безуглого, - X .: Вид-во НФАУ; Золоті Сторінки, 2001.- 240 с.

Розміщено на



  • Таблиця 1

  • Скачати 111.38 Kb.