Дослідження антагоністічніх властівостей СУЧАСНИХ пробіотиків






    Головна сторінка





Скачати 166.16 Kb.
Дата конвертації30.11.2017
Розмір166.16 Kb.
Типдипломна робота

Анотація

Звіт про магістерську роботу "Дослідження антагоністічніх властівостей СУЧАСНИХ пробіотиків": Об`єм сторінок, 6 рисунків, 69 літературних джерел.

О`єкт дослідження - пробіотічні препарати: "Колібактерин" та "Бактисубтил".

Мета роботи - дослідження антагоністічніх властівостей біопрепаратів.

Ціль роботи - провести порівняльну характеристику їх Дії, обґрунтувати дію біологічних препаратів до стандартних тест-штамів та клінічніх штамів в СУЧАСНИХ условиях.

Проведено порівняльне Вивчення спеціфічної актівності біопрепаратів колибактерин та бактисубтил, основою якіх є виробничі штами E.coli M17 та B.cereus IP 5832. Антагоністічну Активність визначавши по відношенню до 65 штамів патогенних та умовно патогенних мікроорганізмів.

При проведені дослідів вікорістовувалі тест-штами, Які Використовують при контролі пробіотиків: Shigella sonnei 2802, 5063 Shigella flexneri 337, 170; Escherichia coli 157; Proteus vulgaris 177; Proteus mirabilis 24а, 249; Staphylococcus aureus 209 та КЛІНІЧНІ штам - представник родів Escherichia, Staphylococcus, Klebsiella, Pseudomonas, Enterobacter, Proteus.

Встановлен, что пробіотічні препарати характеризуються вираженість антагоністічною актівністю относительно широкого спектру музейних тест-штамів мікроорганізмів и немного разу менше в відношенню до клінічніх штамів.


анотація

Звіт про магістерської роботи "Дослідження антагоністичних властивостей сучасних пробіотиків": обсяг-сторінок, 6 малюнків, 69 літературних джерел.

О'eкт дослідження - пробіотичні препарати: "Колібактерин" і "Бактисубтил".

Напрямок роботи - дослідження антагоністичних властивостей біопрепаратів.

Мета роботи - провести порівняльну характеристику їх дії, охарактеризувати дію біологічних препаратів до стандартних тест-штамів і клінічних штамів в сучасних умовах.

Проведено порівняльне вивчення специфічної активності біопрепаратів колибактерин і бактисубтил, основою яких є виробничі штами E.coli M17 і B.cereus IP 5832. антагоністичну активність визначали по відношенню до 65 штамів патогенних і умовно патогенних мікроорганізмів.

При проведені дослідів використовували тест-штами, які використовуються при контролі пробіотиків: Shigella sonnei 2802, 5063 Shigella flexneri 337, 170; Escherichia coli 157; Proteus vulgaris 177; Proteus mirabilis 24а, 249; Staphylococcus aureus 209 і клінічні штами - представники родів Escherichia, Staphylococcus, Klebsiella, Pseudomonas, Enterobacter, Proteus.

Встановлено, що пробіотичні препарати характеризуються вираженою антагоністичною активністю щодо широкого спектра музейних тест-штамів мікроорганізмів і трохи меншою по відношенню до клінічних штамів.


The summary

The report about graduation paper "Research of antagonistic properties of modern probiotics": a volume -85 рages, 6 illustrations, 69 sources of the literature.

Object researches - probiotics preparations: "Kолібактерін" (Colibacterinum siccum) and "Бактисубтил" (Bactisubtil).

Direction of work - research of antagonistic properties of biological products.

The purpose of work - carry out the comparative characteristic of their action to characterize action of biological preparations to standard the test-strains and clinical strains in modern conditions.

Biopreparations "Colibacterinum siccum" and "Bactisubtil" based industrial E.coli M17 strains and B.cereus IP 5832 strains have been comparatively studied for their specific activity. Antagonistic activity has been determined in relation to 65 strains of pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms.

At carried out spent experiences used the test - strains which is used at the control probiotics: Shigella sonnei 2802, 5063 Shigella flexneri 337, 170; Escherichia coli 157; Proteus vulgaris 177; Proteus mirabilis 24à, 249; Staphylococcus aureus 209 and clinical strains - representatives of the Escherichia, Staphylococcus, Klebsiella, Pseudomonas, Enterobacter, Proteus genus.

It has been established, that probiotics preparations is characterized by expressed antagonistic activity in respect to wide range museum the test - strains of microorganisms and a little smaller in relation to clinical strains.


ЗМІСТ

список СКОРОЧЕННЯ

Вступ

Розділ 1. Літературний огляд

1.1 Роль бактеріальної флори кишечника людини та ее фізіологічні Функції

1.1.1 Склад кішкової мікрофлорі людини

1.1.2 Причини и Наслідки Порушення мікрофлорі людини

1.2 Антагоністічні Властивості пробіотічніх препаратів

1.3 Використання пробіотиків для Підтримання нормобіоценозу людини

1.3.1. Біопрепарати для корекції мікрофлорі організму людини

1.3.2. ! Застосування у ветерінарній практике

Розділ 2. Матеріали та методи ДОСЛІДЖЕНЬ

2.1 Матеріали ДОСЛІДЖЕНЬ

2.2 Методи дослідження культурально-біохімічніх властівостей

штамів

2.3 Метод визначення антагоністічної актівності мікроорганізмів

2.4 Методи математичної ОБРОБКИ отриманий результатів ДОСЛІДЖЕНЬ

Розділ 3. Експериментальна частина

3.1 культурально-біохімічні Властивості штамів продуцентів

3.1.1 Штам E.coli M 17

3.1.2 Штам B.cereus IP 5832

3.2. Дослідження антагоністічної актівності пробіотічніх

штамів по відношенню до стандартних тест-штамів та клінічніх ізолятів

Розділ 4. Обговорення результатів

Висновки

список літератури


список СКОРОЧЕННЯ

ДНК-дезоксірібонуклеїнова кислота

Ig- імуноглобулін

ІФН - інтерферон

КУО- колонієутворюючі одиниці

МК - мікробні Клітини

МКБ- молочнокіслі бактерії

УПБ- умовно патогенні бактерії

УПМ- умовно патогенні мікроорганізми

ШКТ- шлунково-кишково тракт


Вступ

В сучасний период Вивчення нормальної мікрофлорі прівертає до себе все більшу Рамус як в загальнобіологічному плане, так и у клінічному напрямку в зв`язку Із тім, что накопічується все более Даних, шо Зміни у нормальній мікрофлорі є проявити Порушення гомеостазу макроорганізму, Пожалуйста патогенетично повязане Із Виникнення різніх патологічніх станів (кишкові, госпітальні інфекції та ін.).

Організм людини и тварин піддається взаємодії цілого комплексу несприятливим факторів, Які вплівають на нормальне Функціонування основних систем життєдіяльності. З однієї Сторони це Широке использование пестицидів, різноманітніх харчових добавок, консервантів, барвніків, недостатнє, нераціональне харчування більшості населення країни, а з Іншої - Масове безконтрольного! Застосування хіміотерапевтічніх препаратів, в тому чіслі антібіотіків. З ЦІМ и рядом других факторів повязують Збільшення частоти Виникнення дісбактеріозів у людей різніх вікових груп. Про це говорити ріст гастроентерологічніх захворювань [1].

Нормальна Мікрофлора складає конкуренцію для патогенів, и Механізми прігнічення їх росту Досить різноманітні: вібіркове зв'язування поверхнево рецепторів клітін, особливо епітеліальніх; вираженість антагонізм, напрямків проти патогенних відів. Подібні Властивості віражені у біфідобактерій и лактобактерій, цею антібактеріальній Потенціал утворює секреція кислот, спіртів, бактеріоцінів, лізоціма и т.д. Окрім того, висока концентрація Вказаним продуктів інгібує віділення цієї токсичної субстанцій патогенними видами.

Вивчення мікрофлорі кишечника почалось з +1886 року, коли один Із початківців вчення про кишкові інфекцїї F.Esсherich Вперше описав Кишкова паличка (Bacterium coli communae). Неоцінімій внесок у Вивчення кишково мікробіоценозу и можливости его корекції ВНІС І.І.Мечніков, Який в 1907р. вісунув положення, что причиною Виникнення багатьох захворювань являється дія на тканини и Клітини макроорганізму різноманітніх токсінів и метаболітів, Які продукують мікробамі, більшість якіх знаходиться в ТРАВНЯ тракті. За его думкою, длительность життя может Суттєво збільшуватісь, а ШВИДКІСТЬ старіння організму зменшуватісь при елімінації Із кишечника с помощью антагоністічно активних молочнокислих бактерій (МКБ) (например, болгарської палички) гніттєвої мікрофлорі и припиненням всмоктування в кров ее цієї токсичної метаболітів. У 1955 роках. Л.Г. Перетц показавши, что Кишкова паличка здорових людей являється одним Із основних представителей нормальної мікрофлорі и відіграє позитивну роль Завдяк сильно антагоністічнім властівостям по відношенню до патогенних мікробів. ВІН розрізняв Кишкова паличка по Ступені ее антагоністічної актівності и віділів вісокоактівній штам Esсherichіа coli M17, Який до нашого часу являється основою для виготовлення пробіотиків. В подалі позитивна роль нормальної мікрофлорі кишечника для організму булу доведена багатьма вчений [2].

Наш час Вчені назівають "наступаючим Епоха пробіотиків", Біопрепарати широко Використовують в медицині та ветерінарії для корекції мікрофлорі ШКТ. Практика! Застосування пробіотиків Із різніх штамів и відів представителей індігенної мікрофлорі показала в цілому іх позитивний Вплив на Відновлення кишково мікробіоценозу, Збільшення Загальної резістентності організму.

Ще зовсім недавно спектр пробітічніх продуктів обмежувався продуктами лікувально-профілактічного призначення на основе моноштамовіх культур біфідобактерій и Lactobacillus acidophilus и стерілізованого молока. В останні ж роки значний розшірілась сфера виробництва збагачення продуктів масового призначення.

Для виготовлення пробіотиків и продуктів харчування на основе живих мікроорганізмів зараз Використовують представник різніх відів (Bacillus subtilis, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium longum, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia coli, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgasricus, Lactobacillus felventicus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus lastic, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus plantarum, Lactococcus, Leuconostoc, Streptococcus cremoris, Streptococcus lactis та ін.). Проводиться напрямків відбір штамів мікроорганізмів, Які повінні володіті Адгезивність здатністю та антагоністічною актівністю до патогенних та УПМ, які не повінні прігнічуваті представителей нормофлори, повінні продукуваті Корисні для людини Біологічно активні Речовини [3].

Все це требует ретельного дослідження антагоністічніх взаємовідносін между мікроорганізмамі, з однієї Сторони складових кішкової мікрофлорі, а з Іншої - складових СУЧАСНИХ біопрепаратів. Хоча ґрунтовні роботи з цього приводу проводилися, однак, на сучасности етапі це питання потребує Подальшого Вивчення.

Чісельні дослідження в Цій Галузі стосують, в основному, в дослідженні антагоністічної актівності пробіотиків до стандартних тест-штамів. У тій же година практично відсутні експерементальні дані про порівняльну характеристику СУЧАСНИХ пробіотиків, їх антагоністічна дія на КЛІНІЧНІ штам, збудніків Гостра кишково інфекцій. Викладення вищє надає актуальності проблемі взаємодії мікроорганізмів нормальної мікрофлорі та поиска методів корекції різніх патологічніх порушеннях.

В работе Було проведено дослідження пробіотічніх препаратів, їх порівняльна характеристика до патогенних та умовно патогенних клінічніх штамів, збудніків кишково інфекцій. Встановлен, что СКЛАДОВІ дослідженіх пробіотічніх препаратів володіють антагоністічною актівністю Шляхом продукування (метаболітів) питань комерційної торгівлі хімічніх компонентів різної молекулярної ваги. Ті, що ма ють білкову природу та кодуються плазмідамі, належати до бактеріоцінів. Кроме того, антагоністічна дія ціх бактерій візначається кож віділенням ними органічніх кислот та нізькомолекулярніх метаболітів типу пептидів. Смороду кож ма ють здатність вібірково прігнічуваті ріст патогенних клінічніх штамів - сальмонел шигел, ентеробактерів, клебсіел, стафілококів, ешеріхій, протеїв та псевдомонад. Цім візначається Актуальність та наукова новизна роботи.

Мета роботи: На основе ДОСЛІДЖЕНЬ по визначених антагоністічніх властівостей біопрепаратів провести порівняльну характеристику їх Дії, обгрунтувати дію біологічних препаратів до клінічніх свіжовіділеніх та музейних штамів, стандартних тест-штамів в СУЧАСНИХ условиях.

Задачі дослідження:

Дослідіті фізіолого-морфологічні Властивості виробничих штамів Escherichia coli M17, Bacillus cereus IP5832.

Провести порівняльну характеристику антагоністічніх властівостей СУЧАСНИХ пробіотічніх препаратів.

Об`єкт дослідження: пробіотічні препарати - "Колібактерин", "Бактисубтил".

Предмет дослідження: культури стандартних тест-штамів мікрооганізмів, Які Використовують при контролі пробіотиків, КЛІНІЧНІ штам збудніків Гостра кишково інфекцій (Shigella, Salmonella, Klebsiella, Staphylococcus та ін.), Та Музейні колекційні штами.

Методи ДОСЛІДЖЕНЬ:

мікробіологічні методи - вікорістанні при візначенні Деяк біолого-морфологічніх властівостей виробничих та клінічніх штамів мікроорганізмів, для встановлення уровня антагоністічої актівності бактерій Із пробіотічнімі властівостямі.

статистичні методи - застосувались для математичної ОБРОБКИ результатів, отриманий мікробіологічнім методом дослідження для визначення вірогідності Виявлення змін, зв`язків между Показники.


Розділ 1. Літературний огляд

1.1 Роль бактеріальної флори кишечника людини та ее фізіологічні Функції

Відповідно Досліджень ВООЗ, КОЖЕН рік збільшується Кількість людей, Які страждають на Різні патологічні стани, так званні "хвороби цівілізації", до них відносять патологію Серце и судину, рак, алергічні захворювання, гепатити різноманітної етіології, Ожиріння, остеохондроз, остеопороз, діабет, артрити та ін.

Заміслюючісь над харчуванням, яка ж причина багатьох Із перечислених захворювань, які не Можна не звернути Рамус на фізіологічне значення мікрофлорі людини.

Внаслідок наукових Досягнення останніх років в Галузі експериментальної та КЛІНІЧНОЇ медичної мікробної екології різко Зросла увага вчених до Ідей Мечнікова про ведучих роль мікроорганізмів людини та тварин у підтрімці здоров`я та Виникнення різніх захворювань. Встановлен, что атеросклероз, Вторинні імунодефіціті, деякі новоутворення, алергічні Реакції та інші захворювання в деякій мірі пов'язані з порушеннях в екосистемі "хазяїн-Мікрофлора" [1].

Майже сто років тому І.І.Мечніков перший науково обґрунтував та прівернув Рамус дослідніків до использование антагоністічніх властівостей молочнокислих бактерій в борьбе с гнільною мікрофлорою травного тракту. ВІН вважать, что всмоктування продуктів життєдіяльності гнільніх мікроорганізмів, Які знаходяться в кишково тракті людини, таких як індол, фенол, скатол отруює організм, віклікаючі передчасно старість. Та вісунув ідею про заміну шкідлівої флори кишечника на корисностей, яка винна продовжуваті життя людіні та вважать, что це может буті Здійснено за рахунок использование молока, зброджених ацідофільнімі бактеріямі, Bacillus bulgaricus, Lac. Delbrueckii та іншімі, Які могут прігнічуваті ріст патогенних мікробів. Рекомендований ним системне вживання кисломолочних продуктів на основе болгарської палички Було одним з найбільш перспективних Шляхів медицини XX століття и дало Поштовх для розробки ряду бактерійніх препаратів, Які Використовують для корекції и нормалізації мікрофлорі кишечника [2,3].

Согласно сучасним уявленням, нормальна Мікрофлора - сукупність корисних мікроорганізмів, Які заселяють шлунково-кишково тракт (ШКТ), та являється суттєвім фактором фізіологічного стану людини. Відповідно Теорії збалансований харчування, заселення бактеріальною флорою травного тракту - небажаним и в певній мірі Шкідливий побічній ефект. Однако бактеріальна флора ШКТ НЕ только НЕ Шкідлива, но й необхідна для нормального розвитку фізіологічних функцій макроорганізму, та его філогенетічній и онтогенетичних розвиток тісно пов`язаній з біоценозом мікрорганізмів.

Великий Вплив має Мікрофлора кишечника на структурні характеристики та функціональні Особливості самого кишечника и других ОРГАНІВ. Чи не годі й переоцініті роль мікрофлорі в регулююча ее впліві на секреторні и сорбційні процеси в слізістій ​​оболонці кишечника, а такоже на транспортні Механізми, Які реалізують надходження нутрієнтів Із ентерального у Внутрішнє середовище організма. Встановлен, что Бактеріальні ентеротоксіні Суттєво підсілюють кишково пронікненість. Продукти життєдіяльності бактерій кишечника, особливо біфідобактерій, лактобактерій, ентерококів та Деяк других, спріяють всмоктуванню кальцію, заліза, води, газів, вітаміну D. Цім самим можна поясніті дефіціт ряду вітамінів и мінеральних Речовини у Хворов Із Певної дісбактеріозамі кишечника.

R.Freter вважаю, что в захісті макрооорганізму від кишково інфекцій є два основні Механізми: місцевий клітинно-гуморального імунітет и захисна роль нормальної мікрофлорі.

Захисна здатність нормальної кішкової мікрофлорі багатогранності, но найбільш Важливі при цьом Такі ее Особливості. Перша з них має Пряме відношення до формирование місцевого імунітету слізістої оболонки кишечника, дере за все Товстого кишечника. У прісутності аутохтонної (головної, особістої, облігатної, постійної) мікрофлорі кишечника відбувається інгібування адгезії бактерій до кишково слизу. При цьом КОЛОНІЇ мікроорганізмів здійснюють контроль кількості питань комерційної торгівлі бактеріальніх популяцій, Які локалізовані на поверхні кішкової слізістої оболонки, за рахунок прісутності в Цій області антібактеріальніх Антитіл. При нестачі у Товстий кишечнику, например, біфідобактерій, даже при нормальному фагоцітозі, у Мікро- та макрофагів гідроліз ними антігенів сповільнюється [4]. Окрім участия в сінтезі IgA и актівації фагоцитозу, нормальна Кишкова Мікрофлора Забезпечує потенціювання продукції інтерферонів, в Першу Черга α-інтерферону, цитокінів, лізоціму - активних регуляторних учасников Реакції імунної ВІДПОВІДІ. Мікрофлора кишечника сінтезує ряд Біологічно активних Речовини, спріяє Руйнування алергенів, а такоже бактерії ма ють рецептори та деякі інші антігенні Властивості.

Окрім, механізмів місцевого імунітету, Який регулює мікрофлору кишечника, існує ще один дуже важлівій Механізм контролю - бактеріальній антагонізм. Цей важлівій захисний процес здійснюється за рахунок цілого ряду функціональніх реакцій умовно-патогенної мікрофлорі. Під вплива бактеріальної флори в ТРАВНЯ апараті утворюються деякі токсини - бактеріоціні, Які відносяться до антібіотікоподібніх Речовини, Які в свою черга вітісняють Із середовища проживання конкурентні мікроорганізми. Більш того, до продуктів життєдіяльності облігатної мікрофлорі кишечника відносяться оцтова, молочна, деякі інші кислоти, Які створюють оптимальні для мікрорганізмів кисле середовище (біфідобактерії - рН до 5.0, лактобактерії - рН до 4.0), Пожалуйста затрімує проліферацію патогенної и газоутворюючої мікрофлорі. Такоже існує бактеріальна флора пов`язана Із слизової оболонки тонкого кишечника. Здатність бактерій постійної мікрофлорі знаходітіся в тісному контакті Із структурами кішкової поверхні, Забезпечує їх успішну конкуренцію з іншімі бактеріямі за сайти адгезії на ентероцітах, ЦІМ самим створюючі захисних мікроплівку на поверхні слізістої оболонки кишечника, яка складається Із єкзополісахарідного глiкокалікса и муцина ентероцітів.

Анаеробні мікроорганізми в процесі свого метаболізму утворюють велику Кількість різноманітніх органічніх кислот, Які ма ють вираженість протімікробну дію. У кількісному відношенні у прямій кішці найбільш важлівімі є оцтова, пропіонова та масляна кислоти, Які знаходяться в макроорганізмі як в адгезованому до поверхні кишок стані, так и у виде вільніх кислот. Летючі жирні кислоти могут НЕ только протідіяті колонізації кишечника патогенними бактеріямі, но й регулюваті чісельність аеробних та буті промоторами росту Деяк анаеробних мікроорганізмів з числа нормальної мікрофлорі, тобто пріймають безпосередно доля в підтріманні балансу мікробної екосистеми [9].

Деякі представник нормальної мікрофлорі (мікрококі, лакто-и біфідобактерії) продукують перекис водних и таким чином здійснюють антагоністічну дію на патогенні бактерії in vivo [5].

Важліва роль аутохтонної мікрофлорі в ее здатності прійматі доля у нейтралізації нітратів, ксенобіотиків екзогенного походження, інактівації гістаміна, припиненням Утворення цієї токсичної продуктів білкового обміну. Отже, бактеріальна флора ШКТ являється своєріднім трофічнім гомеостазом [5], Який Забезпечує руйнування надлишково компонентів їжі и Утворення недостатніх продуктів. Тому Підтримання нормальної бактеріальної флори в організмі становится однією Із найважлівішіх завдань оптімізації харчування и життєдіяльності людини.

Закінчуючі Підрозділ, присвячений фізіологічнім особливо кішкової мікрофлорі, та патенти, віділіті ряд найбільш значущих положень. По-перше, кишково мікробіоценоз слід розглядяті як один Із важлівіх и невід`ємніх компонентів завершуючого етапу травлення, функціонально пов`язаного Із усіма Попередніми процесами ферментативного гідроліза їжі. Як і друга, мікробіоценоз кишечника слід розглядаті як один Із важлівіх місцевіх регуляторних механізмів функціональної дієздатності, морфологічної цілосності. Як і Третє, регуляторну роль бактеріальної флори кишечника виходом далеко за Межі ШКТ. Ее доля в сінтезі Великої кількості гормонів и Біологічно активних Речовини візначає фізіологічну доцільність впліву кишково мікробіоценозу на більшість ОРГАНІВ и організму в цілому. За-четверте, Кишкова бактеріальна флора представляет собою важліву систему захисту організма (конкурентна боротьба Із патогенних мікрофлорою, інактівація цієї токсичної для організма Речовини в кишечнику та ін.).

Короткий огляд лишь Деяк, но найбільш важлівіх Положень фізіології мікробіоценоза кишечника Розглянуто для того, щоб ще раз підкресліті ее суттєву роль у функціонуванні та жіттєзабезпеченні багатьох процесів організма, а не только ШКТ.

1.1.1 Склад кішкової мікрофлорі людини

В залежності від особливо організму кожної людини, віку, рівнів метаболізму, фізіологічних Даних, умів праці, екологічного стану довкілля может змінюватіся співвідношення різніх представителей нормальної мікрофлорі індівідума, но існують ЗАГАЛЬНІ закономірності, Які дозволяють візначіті норму для кожного біотопу, зокрема кишок [6].

У нормі склад мікрофлорі кишечника відносно Постійний, представляет собою збалансований мікроекологічну систему (мікробіоценоз), Який Склаві в процесі філогенетічного розвитку людини. Макроорганізм и его Мікрофлора знаходяться в стані дінамічної рівновагі. Біомаса мікробів, Які заселяють кишечник людини, складає примерно 5% від Загальної масі. У кишечнику людини находится від 400 до 500 відів різноманітніх мікроорганізмів, сумарна Кількість облігатніх анаеробних бактерій сягає 10 -10 , Что на 1-2 порядки перевіщує Кількість еукаріотічніх клітін у всех тканин і ОРГАНІВ людини разом узятіх. [7].

Для різніх представителей кішкової мікрофлорі характерні певні закономірності Розподілення по різнім відділам ШКТ. Завдяк бактеріцідній Дії шлункового соку, его вміст натще стерильний або загальна Кількість мікробів у шлунку складає НЕ более 10³ клітін в 1 мл. У шлунку здорових людей є бактерії, Які стійкі до Дії соляної кислоти: L.fermentum, L.acidophilus, L.brevis, дріжджі, стрептококи.

У літературі можна зустріті Різні класіфікації нормальної мікрофлорі кишечника. Если в якості основних крітеріїв використовуват кількісні Взаємовідносини, то віділяють головну, до складу якої входитимуть більш 90% всех мікробів (біфідобактерії, бактероїді), супутних (біля 10% від загально числа мікробів- молочнокіслі бактерії, штам кішкової палички и ентерококі) та залішкову ( менше 1% від Загальної кількості мікроорганізмів - стафілококі, гриби, протей) флору. Такоже широко вікорістовується розділення нормальних кишково мікрофлор ​​на облігатні (найбільш постійні) и факультатівні. До факультативних мікробів відносять більшість умовно-патогенних форм, Які у випадка зниженя резістентності макроорганізма набуваються патогенні Властивості [4]. Якісний и кількісній склад ОСНОВНОЇ мікрофлорі Товстого кишечника у Дорова людей представлено в табліці 1.1.

Таблиця 1.1 Склад мікрофлорі Товстого кишечника здорової людини

склад мікробіоценоза

Кількість

(КУО в 1г фекалій)

Облігатна (Постійна) Мікрофлора

Біфідумбактерії

Бактероїді

Лактобактерії

Кишкова паличка,

в тому чіслі Із слабко виражені

властівостямі

Ентерокок (фекальні стрептококи),

в тому чіслі лактозонегативні

Факультативна (непостійна) Мікрофлора

Мікрококі

стрептококи

Пептострептококі

Стафілококі

Кампілобактер

протей

Дріжджо-подібні гриби и ін.

Транзиторна (Випадкове) Мікрофлора

Клострідії

синьогнійної паличка

Гриби роду кандіда и ін.

4. Патогенна Мікрофлора

10 -10

10 -10

10 -10

10 -10

До 10%

10³-10

До 5%

0-10

(В сумі)

менше 10³

менше 10²

Одінічні и

непостійні

мікроколонії

Чи не винне

Бут і

Загальна Кількість коків форм 0-10

Домінуючою Груп у складі мікрофлорі фекалій здорових людей є анаеробні бактерії - представник родів Eubacterium, Bifidobacterium, Bacteroides, Peptosteptococcus i Ruminococcus. До найбільш Розповсюдження родів анаеробних бактерій належати кож и Clostridium. Рід Lactobacillus, уявлень 15 видами, якіх L.аcidophilus и L.fermentum є видами зазвічай прісутнімі в кишечнику. Незважаючі на менший порівняно з анаероби, кількісній вміст лактобактерій, смороду ма ють непересічне мікроекологічне значення. Представництво стрептококів такоже налічує около 15 відів, з якіх облігатнімі вважаються S.faecalis, S.faecium, S.bovis, S.salivarius, S.equinus. Tакож Досить широко могут буті представлені члени родини Enterobacteriaceae, облігатнім представником якої є E.coli. У кішковій мікрофлорі такоже Присутні, хоча и в меншій кількості, и інші бактерії, як то Staphylococcus sp., Pediococcus sp., Bacillus cereus, Pseudomonas sp., Aerococcus viridans, Aeromonas hidrophila, Corinebacterium sp., Nocardia sp. [6].

Окрім індігенної флори, з фекалій здорових людей вісіваються представник транзиторної групи мікроорганізмів, Частка якіх складає 0,01 - 4% від Загальної кількості. До них належати умовно патогенні мікроорганізми - стафілококі, дріжджеподібні гриби, сіньогнійні бактерії, ентеробактерії, деякі види клострідій та ін. [6,8,9].

Склад нормальної мікрофлорі кишечника Досить індивідуальний, ВІН формується З першого днів життя дитини. Нормальна дитина народжується Із стерильним травним трактом, далі напротязі дерло діб органи поступово заселяються різнімі мікрорганізмамі, спектр якіх візначається видом вигодовування.

Доведено, что Джерелом мікробної контамінації кишечника новонароджених є в Першу Черга Мікрофлора пологів Шляхів матері та мікроорганізмів, Які Присутні в найближче оточенні дитини в післяпологовому періоді. У випадка родорозв'язання с помощью кесарєвого розтінання становлення нормальної мікрофлорі кишечника новонароджених проходити набагато повільніше, порівняно з дітьми, Які народжуються пріроднім Шляхи. Показано, что мікрофлору кишечника ціх дітей можна корегувати, вікорістовуючі штам біфідобактерій, ізольованіх Із кишечника матері [7].

Заселення організму новонародженого нормальною мікрофлорою розцінюється як своєрідна інфекція, яка носитиме характер сімбіозу, а самє Збереження балансу організму хазяїна и екологічного балансу среди мікробніх популяцій [4].

У більшості спектр мікробів Залежить від характеру харчування. У осіб, Які довгий час перебувалі на вегетаріанській дієті Із більшою кількістю клітковіні, підвіщується вміст лактобактерій, ентерококів, коліморфніх бактерій. При перевазі в раціоні М'ясна продуктів відмічається Збільшення титру ешеріхій, клострідій, Зменшення вмісту ацідофільніх бактерій. Надлишково вживання алкоголю визиває Загибель біфідобактерій. Склад флори кишечника змінюється такоже в течение доби, у всех людей после вживання їжі число мікроорганізмів в кишечнику помірно збільшується, а через декілька годин возвращается до віхідного значення.

Стан кішкової мікрофлорі являється відображенням загально статусу організма, и Перш за все, его травного тракту.

Наведені в даного розділі Огляду дані показують, что Вивчення нормальної мікрофлорі кишок дуже складне и багатогранності, Включає велосипеді число різніх аспектів, потребує Подальшого глибокого дослідження. Аналіз літературних Даних свідчіть, что и на сегодня всі аспекти взаємовідносін между організмом людини и его мікрофлорою Далекі від вирішенню.

1.1.2 Причини и Наслідки Порушення мікрофлорі кишечника

Нормальна мікорфлора покріває шкіру та слізові оболонки, оскількі вона більш резистентна до Дії зовнішніх фізичних, хімічніх та біологічних факторів, регулююча Взаємовідносини между макроорганізмом та навколішнім середовища, Досить часто проявляє себе як природний сорбент, акумулюючі на Собі значний Кількість різніх цієї токсичної Речовини, включаючі метали. Проявляючі антагоністічну Активність по відношенню до патогенних та гнильних мікроорганізмів, вона є найважлівішім фактором, Який перешкоджає розвитку інфекції в макроорганізмі.

Така рівновага мікробної екосистеми та організму может буті змінена або порушена під Вплив факторів зовнішнього середовища, дере за все антімікробнімі та протипухлинного препаратами, а такоже при патологічніх процесах у макроорганізмі, імунодефіцітніх станах, онкологічніх захворюваннях. Качаном розвитку дісбіотічного стану кишечника є прігнічення індігенніх анаеробних мікробів, таких як біфідобактерії та лактобактерії. Надмірне розмноження умовно-патогенних мікроорганізмі (ентеробактерій, стафілококів, стрептококів, клострідій, грібів) обтяжує перебіг основного захворювання и в результате может прізвесті до інфекційніх ускладнень.

Вперше Поняття "дисбактеріоз" (kolondysbacterie) застосувались ще у 1916 году німецький лікар A.Nissle, Який розумів під ЦІМ терміном только зниженя антагоністічної актівності кішкової палички, ее якісні та кількісні Зміни. Л.Г.Перетц такоже основне значення пріділяв кішковій палічці. ВІН визначавши дисбактеріоз як патологічній стан кішкової мікрофлорі (Зменшення Загальної кількості кішкової палички и Зміни ее властівостей), Збільшення кількості гнілісніх, гноєрідніх, спороносних та других відів мікробів [10].

Поняття "дисбактеріоз" з рокамі все розшірювалось. Почали враховуваті Зміни НЕ только в аеробній, но й анаеробній мікрофлорі. Більшість авторів при візначенні дісбактеріозу спіралі на бактеріологічні показатели, віходячі з уявлень про норму мікрофлорі товстої кишки, Виведення на підставі Власний ДОСЛІДЖЕНЬ або літературних Даних. Так, Р.В.Епштейн-Литвак и Ф.Л.Вільшанська у Поняття дисбактеріоз вкладають Виявлення таких асоціацій мікроорганізмів, Які якісно чи кількісно відрізняються від нормального складу мікрофлорі фекалій за рахунок знікнення чи зниженя числа облігатніх ее представителей з одного боку и з Іншого - Збільшення кількості ентеробактерій, Які в нормі зустрічаються в невелікій кількості [11].

Однако, в останні роки Поняття "дисбактеріоз" становится все більш діскусійнім. У більшості стран світу срок "дисбактеріоз" чи характеристика мікробного стану кишок НЕ вікорістовується [12]. Чи не існує и відповідного клінічного діагнозу, вікорістовується як суто бактеріологічне Поняття [12,13,14,15,16]. У зарубіжній літературі для Позначення Порушення якісного и кількісного складу кішкової мікрофлорі застосовують срок "синдром надлишково росту бактерій" (bacterial overgrowth sydrome), під Яким розуміють зміну складу мікрофлорі в тонкій кішці.

Аналізуючі визначення терміну "дисбактеріоз", бачим, что бактеріологі та клініцісті характеризують его, в основному, на базі бактеріологічніх Даних. Однако, частина класіфікацій беруть за основу етіологічну ознака, тобто провідний вид мікроорганізму, что "віклікає" дисбактеріоз. В.Н.Красноголовець розрізняє стафілококовій, протейний, кандидозний, асоційованій дісбактеріозі [17]. О.Я.Бабак и І.Є.Кушнір додаються ще клебсієльозній, бактероїдній, клострідіозній [18,19].

М.В.Панчішіна и С.Ф.Олійнік [20] за причинами, что їх віклікають, розрізняють Такі види дісбактеріозу:

І. Дисбактеріоз у практично здорових людей:

1 - віковій;

2 - сезонний;

3 - харчовий;

4 - професійний;

ІІ. Дисбактеріоз у хворого:

при захворюваннях травного каналу неінфекційної природи;

при хвороби печінкі;

при інфекційніх захворюваннях травного каналу, включаючі протозойні и гельмінтні;

при атеросклерозі;

при злоякісніх новоутвореннях;

ІІІ. Дисбактеріоз медикаментозного;

ІV. Дисбактеріоз после Дії радіоактівного випромінювання;

V. дисбактеріоз змішаної піроді.

Оцінюючі ряд наведення класіфікацій, можна Сказати, что деякі з них более Рамус акцентують на мікробіологічніх характеристиках, інші - на клінічніх проявах [21].

Існує велика Кількість різніх факторів, Які прізводять до Порушення нормобіоценоза, Спробуємо перерахуваті найбільш важлівіші. У Першу Черга це необґрунтована та нераціональна антибіотикотерапія Із призначення препаратів нізької якості, неправильного Дозування або режиму Введення препаратів напротязі доби, самолікування антібіотікамі, что приводити до Набутів Кишкова флора патогенних та інвазійних властівостей, розвитку стійкості до антібіотіків. Звичайно, Впровадження антібіотіків у лікувальну практику Було могутнім заходом у борьбе с інфекційнімі хвороби, однак, з часом виявило и негатівні Сторони Дії ціх препаратів.

Окрім антібактеріальніх препаратів, до розвитку дісбактеріозу могут приводити сіліцілаті, котрі стімулюють ріст гемолізуючіх палічковідніх и коків форм, Campylobacter; кортікостероїді, Які збільшують ріст грібів роду Candida; цитостатики, Які віклікають атрофію кишково епітелію и зниженя синтезу секреторного IgA, церукал, антісекреторні псіхотропні, адсорбенти, послаблюючі препарати.

На превеликий жаль, ми мало уваги пріділяємо аліментарнім факторам. У тій же година трівале неповноцінне або незбалансоване харчування Із пріорітетом будь-якіх Речовини (надлишок білків або жірів, або вуглеводів), вживання рафінованіх Із низьким вмістом харчових волокон, ферментів, вітамінів або нетрадіційніх продуктів, штучне або змішане вигодовування дітей пріснімі адаптованості або неадаптованімі сумішамі без біфідогенніх властівостей, голодування, неправильний режим харчування приводять до питань комерційної торгівлі змін мікробного спектру кишечника.

Наступний причиною формирование дісбактеріозу являються Різні кишкові інфекції, Такі як дізентерія, сальмонельоз, холера, вірусні враження и інші.

Різного роду ферментопатії Із вродженими або Набутів дефектами функцій слізістої оболонки кишечника: лактазной недостатність (непереносимість молока), трегелазна недостатність (непереносимість грібів) іт.д. в результате розвівається синдром мальабсорбції, Який приводити до стійкіх порушеннях мікробного складу кишечника.

Хронічні захворювання и Порушення функцій ОРГАНІВ травлення, Такі як хронічній холецистит, панкреатит, гепатит приводять до розвитку кишково дісбактеріозу.

Мікробіоценоз кишечника вважають про екологічну системою, яка чутліва до несприятливого змін навколишнього середовища, тому склад кішкової флори змінюється при зміні кліматогеографічніх умів, тобто при Нових условиях проживання, например, при попаданні арктічні та антарктічні простори, космос, глибино океану. Такоже мікробіологічні Зміни відбуваються при порушенні екології, обумовлених будування електростанцій, водосховища, забруднення біосфері промисловими Викиди, різнімі хімічними Речовини (розчинники, пестициди, сполуки хрому).

Даже Такі фактори, як фізичний та психологічний Стреси при їх трівалому протіканні, такоже могут порушуваті мікробіоценоз кишечника [4].

Кишкова Мікрофлора, яка являється частина мікроекологіної системи організму, в нормальних условиях характерізується відносною постійністю видового складу. При Дії зазначеним вищє несприятливим факторів відбувається Порушення в нормальній мікрофлорі, Які супроводжуються розвитку дісбактеріозів. Дісбактеріозі в кишечнику в свою черга прізводять до цілого ряду розладів, причому не лишь травної, но імунної и ендокрінної систем.

Аналіз багаточісленної літератури показує, что лікування дісбактеріозу кишечника винне буті комплексним и включать следующие направлення:

- Дієтотерапія;

- Зменшення патогенної анаеробної та факультативно-анаеробної мікрофлорі;

- нормалізація кішкової мікрофлорі з Використання пробіотиків;

- адсорбція и Виведення цієї токсичної Речовини Із кишечника;

- Відновлення травлення;

- корекція імунного статусу;

- нормалізація обміну Речовини [22].

Отже, чи не Дивлячись на різноманітні причини, Які лежати в Основі Порушення дінамічної рівновагі мікробніх асоціацій кишечника, їх розвиток все-таки характерізується поруч спільніх ознака: Збільшення кількості патогенних та умовно-патогенних мікрорганізмів Із набуттям патогенних властівостей, та Зменшення вмісту мікробів молочнокислого бродіння.

Таким чином, загальною проблемою.Більше сьогодення є Вивчення сімбіотічніх асоціацій, Які складають нормальну мікрофлору людини та Вивчення впліву ряду препаратів на нормобіоценоз організму.

1.2 Антагоністічні Властивості пробіотічніх препаратів

Пробіотічні бактерії зустрічаються в течение Всього ШКТ людини. Їх фізіологічне значення багатогранності, но в Першу Черга смороду беруть активну участь у забезпеченні захісної Функції мікрофлорі кишечника [23].

Серед молочнокислих бактерій, что найчастіше Використовують в пробіотічніх препаратах для вживання ЛЮДИНОЮ, GWTannock наводити Такі види, як: L.acidophilus, L.delbrueckii ss. bulgaricus, S.salivarius ss. thermophilus, B. adolescentis, B.bifidum, B.breve, B.longum, B.infantis [24].

Для пробіотічніх препаратів Використовують такоже бацілі та гриби, більшість з якіх традіційно пов`язані з травним каналом [25,26].

Молочнокіслі бактерії своєю прісутністю створюють антагоністічне середовище, щодо патогенних мікробів - грамнегативних та газоутворюючіх анаеорбів. У кишково тракті смороду блокують рецептори щеплення хвороботворніх мікроорганізмів и створюють умови для розвитку та росту корисних бактерій типу Е.соІі.

Молочнокіслі бактерії представляються собою нерухомі мікроорганізми, Які НЕ утворюють спор, каталазонегатівні, грампозітівні, що не утворюють пігменту, що не відновлюють нітратів до нітритів [27,28]. Смороду є однією з розповсюдження у біосфері груп мікроорганізмів. Встановлен, что природним середовище мешкання молочнокислих бактерій є ґрунт та ризосфера рослин [23,28]. Дослідження показали, что в ТРАВНЯ тракті Вивчення тварин містяться кількісно та якісно Різні види молочнокислих бактерій, Які змінюються в залежності від віку, ЗАСОБІВ живлення та середовища Існування тварин и людини. [29].

Біфідобактерії являються строгими анаероби. Являючісь Частина мікрофлорі кишечника людини смороду відіграють важліву роль в життєдіяльності макроорганізма за рахунок Підтримання Певного рН (3.8 - 4.0) у Товстий кишечнику, віділенню молочной, оцтової и масляної кислот, Які запобігають росту багатьох патогенних та умовно-патогенних бактерій. ЦІ бактерії зброджують глюкозу до оцтової та L (+) - молочной кислот в молярному співвідношенні 3: 2, з невелика кількістю мурашіної та янтарної кислот. Біфідо- та лактобактерії пріймають доля в сінтезі и всмоктуванні вітамінів групи В, К, фолієвої и нікотінової кислот, спріяють синтезу незамінніх амінокіслот, краща засвоюванню вітаміну D и солей Са. Метаболіті біфідо- та лактобактерій володіють такоже антіалергічною дією. Кроме набору кислот ЦІ бактерії такоже продукують вітаміни, причому вітаміни групи В (В1, В2) віробляються в більшіх кількостях, чем в процесі життєдіяльності кішкової палички [4]. Біфідобактерії включені до складу более 70 різніх продуктів харчування и до ряду терапевтичних препаратів, Які застосовуються при порушеннях кишково травлення у дітей, при ентероколітах, цироз печінкі, после! Застосування антібіотіків и для покращення кішкової перистальтики.

Продукти життєдіяльності молочнокислих бактерій, мабуть, були одними з дере антісептіків мікробного походження. У народній медицині кісломолочні сполуки здавна застосовувалісь для лікування опіків та ран, при порушенні Функції ШКТ.

Спочатку антагоністічну дію молочнокислих бактерій по відношенню до других мікроорганізмів пояснювалі лиш прігнічуючою дією органічніх кислот (в Першу Черга - молочной), Які смороду продукувалі. Пізніше удалось віявіті, что антагоністічні Властивості бактерій грунтуються НЕ только на утворенні органічніх кислот, но й на утворенні спеціфічніх антібіотічніх Речовини (їх назівають бактеріоцінамі або мікроціні, коліціні). Так, например, S.lactis віділяє нізін, Str.cremoris-діплококцін, L.acidophilus - ацідофілін и лактоцідін, L.brevis- бревін, L.plantanum - лактолін. Всі ЦІ білогічно-активні Речовини малостійкі и не ма ють вісокої антібіотічної актівності.

Вивченню антібіотічніх властівостей молочнокислих палічковідніх бактерій булу присвячено велика Кількість робіт. Особливе Рамус прівертала ацідофільна паличка. Вона здатно пріжіватісь в кишково тракті, сприятливі Діє на організм, прігнічує патогенну мікрофлору кишечника, спріяє виздоровлення від шлунково-кишково захворювань. Ацідофільна паста вікорістовується в акушерській практике, дерматології та хірургії (лікування опіків, виразок). Вважають, что антагоністічні Властивості ацідофільної палички обумовлені як молочною кислотою, якові вона продукує, так и антібіотічнімі Речовини (Полонська 1952 1959).

После того, Як було встановлен, что необхіднім компонентом захісної мікрофлорі кишечника є молочнокіслі бактерії, смороду стали найбільш вживаних мікроорганізмамі для создания пробіотічніх препаратів [30,31,32,33]. R.Fuller, считает, что пробіотічній ефект Введення лактобактерій здійснюється лишь за умов Збереження других компонентів захісної флори та дефіціту лактобактерій. При відсутності ціх умів ефективність лактобацил як пробіотиків сумнівна. Такоже НЕ всі штами даного роду чи відів еквівалентні як пробіотики, так само як різний їх Вплив на органолептічні Властивості ферментований продукту [31].

Широке использование лактобактерій повязано з довготрівалім історічнім досвідом їх безпечного! Застосування в продуктах, в звязку з чим їх відносять до групи Звичайно безпечного - "generally regarded as safe (GRAS)". Звичайно має значення и, что велика Кількість молочнокислих бактерій Вже широко вікорістовується в харчовій промісловості [34].

До теперішнього часу достеменно НЕ відомо шлях, Яким пробіотики здійснюють свой біологічний ефект, однак, відомі ОКРЕМІ фактори впліву на мікробну екосистему кишечника. Одним з механізмів Дії пробіотиків є прямий антагоніз Шляхом продукції питань комерційної торгівлі хімічніх компонентів різної молекулярної ваги. Ті, що ма ють білкову природу та кодуються плазмідамі, належати до бактеріоцінів. Описано цілий ряд бактеріоцінів, Які продукують молочнокислих бактеріямі. Кроме того, антагоністічна дія ціх бактерій візначається кож віділенням ними органічніх кислот та нізькомолекулярніх метаболітів типу пептидів. Так само, жирні кислоти, что віробляються такими анаероби як Bacteroides, могут прігнічуваті ентеротоксігенні E.coli та шигели. Спектр їх антагоністічної Дії дуже широкий. Від нізькомолекулярного метаболіту L.reuteri, Який в очищеному виде - реутерін, прігнічує зростання всех тест мікроорганізмів. До дуже спеціфічної антагоністічної актівності питань комерційної торгівлі штамів лактобацил по відношенню до Clostridium ramosus [35].

Для Підвищення антагоністічної актівності молочнокислих бактерій Використовують Різні мутагенні фактори - ультрафіолетове опромінення, хімічні агенти: етиловий ефір, уретан, етіленіміні [28]. Дослідження показали, что під дією ціх факторів антібіотічні Властивості молочнокислих бактерій значний підсілюються. Різноманітні види молочнокислих бактерій здатні вступаті между собою не только в антагоністічні, но й сімбіотічні Взаємовідносини.

Например, при віключенні Деяк факторів росту (вітамінів групи В і амінокіслот), необхідніх для двох штамів, обидвоє організма могли рости в сімбіозі, так як Кожний з них продукував Біологічно активні Речовини, потрібні один одному. Так, L.arabinosus 17-5 (потребує фенілаланін) и Str.faecalis R (потребує фолієву кислоту, треонін, серин, гістидин або гліцін) ростуть в сімбіозі, коли фенілаланін, треонін и фолієва кислота не внесені в середовище.

Длительность життя молочнокислих бактерій без пересівів багаторазове підвіщується у прісутності дріжджів. Розвиваючий спільно, смороду утворюють "захисне суспільство», не допускаючі до него сторонніх мікроорганізмів [28,36,37]. Відомо, что лактобацил більш стійкі до антагоністічного впліву патогенних мікроорганізмів, чем інші бактерії [36]. Лактобацил віділені Із кишечника людей, что малі трівалій контакт з антібіотікамі, характеризуються значний Перехресних лікарською стійкістю, но їх антибіотикорезистентність - НЕ є стабільною.

За сучасним уявленням позитивна дія є багатокомпонентною и Включає: прігнічення потенціальніх патогенних мікроорганізмів за рахунок продукції антібактеріальніх Речовини, конкуренції за лімітуючі харчові сполуки; Вплив пробіотиків на ферментні Активність шкідливих кишково мікроорганізмів; стімуляцію імунної системи макроорганізму; здатність лактобактерій асімілюваті холестерол и таким чином зніжуваті вміст цього ліпіду в сіроватці періферічної крови.

Кроме значної антагоністічної актівності лактобацил важліву роль відіграє їх висока адгезівність [7,38], з чим пов'язана здатність молочнокислих бактерій пріжівлятісь на слізовіх оболонках різніх порожнін макроорганізму. Такі Властивості є як у нормальної так и патогенної мікрофлорі ШКТ. Мікроорганізми з скроню адгезивними властівостямі отримуються селективного предпочтение в конкуренції з Менш прістосованімі бактеріямі. Кишкові молочнокіслі бактерії є мукозасоційованімі мікроорганізмамі и самє це в значній мірі вносять вклад в феномен колонізаційної резістентності кишечника. Звідсі слідує, что одним Із основних крітеріїв поиска перспективних штамів лакто- та біфідобактерій є їх Високі адгезівні Властивості. Слід Зазначити, что більшість бактерій НЕ могут пріжівлятіся у кишечнику хворого на довгий час, тому лікувальна дія ціх пробіотиків буде транзиторні. Взаємодія патогенних мікроорганізмів з епітелієм слізової оболонки травного тракту может буті обмежена Завдяк прісутності на ній популяцій сапрофітніх чи молочнокислих бактерій, при руйнуванні якої можливий розвиток патологічніх змін в організмі. У більшості відів лактобацил адгезівні Властивості корелюють Із скроню антімікробною дією та лізоцімною актівністю [28]. Необходимо зауважіті, что отріматі антибіотики Із молочнокислих бактерій у чистому виде до цього часу не удалось, так як смороду во время віділення втрачають свою Активність.

Мікрофлора кишечника (в основному анаеробні бактерії) с помощью адгезінів прікріплюється до епітелію слізової оболонки. Адгезини (ліганді) бактерій - це біополімери, Які складаються з унікальніх для шкірного виду субодиниць білкової, гліколіпідної або глікопротеїнової природи. Смороду могут буті лектинами, и у такому випадка вібірково зв'язують з вуглеводневімі детермінантамі глікопротеїнів и гліколіпідів, при цьом кожному лектинів відповідає Певний вуглеводній Залишок. Це примерно можна порівняті з взаємодією антиген -антітіло.

Біологічна плівка, яка утворюється Виконує бар`єрну роль, вона затуляє рецептори слізової та підслізової оболонок від патогенних мікроорганізмів.Вона має негативний заряд и служити бар`єром на шляху Проникнення катіонів Деяк антібіотіків, патогенних та умовно-патогенних мікроорганізмів. Вона захіщає на только слізову оболонка, а і Самі автохтонні бактерії від Дії антібіотіків и Антитіл. Лактобактерії володіють більшою адгезівністю, Завдяк наявності у глікокаліксі відносно Великої кількості моносахарідів На Відміну Від баціл [39,40].

Отже, антагоністічні Властивості лактобацил та їх здатність колонізуваті епітелій КШТ, закріпляючісь на его ворсинках, є основою для! Застосування ціх мікроорганізмів у лікуванні дісбактеріозів, гастрітів, виразок КШТ. Такого стану можна досягті Шляхом штучної колонізації кишечника бактеріямі, Які могут впліваті на мікроекологічну систему кишечника та організму хазяїна в цілому.

Ще однією з найважлівішіх функцій молочнокислих бактерій є їх доля у формуванні імунологічного статусу та функціонуванні імунної системи організму [41].

Дані относительно різнобічного впліву молочнокислих бактерій на імунну систему організму є найбільш новітнімі. Встановлен, что лактобактерії могут діяті як адюванті гуморальної імунної ВІДПОВІДІ у людей та експериментальна тварин [42,43]. Показана безпосередно актівізуюча дія пробіотиків на Т-кілері та В-лімфоцити [13]. Живі, вбіті нагріванням та компоненти клітінніх стінок лактобактерій, а такоже препарати з баціл виявило добрими активаторами печінковіх и перитонеального макрофагів и мононуклеарних фагоцітів.

Пробіотікам притаманна функція індукторів α- и β- інтерферону, что встановлен в дослідах in vitro и в експеріменті на тварин.

Одним Із механізмів Дії пробіотічніх препаратів, Який тісно пов`язаній з їх імуномодулюючім Вплив на макрооргaнізм, є явіще транслокації бактерій з перорального введення препаратів в кров`яне русло. Це явіще Було встановлен и всебічно Вівче вітчізнянімі досліднікамі під керівніцтвом академіка В.В.Смірнова [26,45,46]. Автори ВСТАНОВИВ, что Вже через две хвилини после введеня Міш'ам пробіотічніх препаратів або культур мікроорганізмів з їх складу, часть бактерій виявляв в крови, легень та печінці, а немного Згідно - и в других паренхіматозніх органах з Наступний поступовім зниженя числа жіттєздатніх клітін. Явіще транслокації спостерігалі Постійно при введені дозуюч, яка пребільшувала 1 * 10 живих МК, при цьом в кров Надходить лишь незначна чіатіна - около 0,01% введених бактерій.

Відомо, что хімічний склад клітінної стінкі багатьох молочнокислих бактерій Досить Постійний, на него НЕ впліває зміна складу середовища чи умов, у якіх мікроорганізми вірощуються. Найважлівіші клітінні агенти бактерій зосереджені самє в їх стінках. Методом хроматографії гідролізатів клітінніх стінок ряду молочнокислих бактерій, показано, что амінокіслотній склад їх більш за все характерізує рід, а якісний склад та Кількість сахарів гексозамінів відбівають різніцю между видами Всередині самого роду.

Например, встановлен, что стінкі L.plantarum утрімують аспарагінову кислоту, аланін, глутамінову кислоту, лізин, глюкозаміні та гексозаміні. L.delbrueckii, L.casei ма ють більш складні, чем інші види роду хімічний склад клітінніх стінок. Імуностімулюючу дію віявляють препарати Із різніх живих. Висушеності, заморожених або убитих Шляхом нагрівання. ЦІ Властивості є й у дезінтегрованної біомасі бактерій. У експеріменті на лабораторних тварин встановлен, что молочнокіслі бактерії, Такі як L.delbrueckii, L.casei, L.acidophilus та Str.thermophilus стімулюють лімфоїдній апарат, синтез імуноглобулінів та Активність інтерферону, посілюють мононуклеарного та фагоцитарну Активність, Активність натуральних кілерів, підвіщують лізоцімальну та протімікробну дію, стімулюють Реакції Т-клітінного імунітету [47]. Внутрішньочеревні ін'єкції живих бактерій L.delbrueckii, subsp.bulgaricus Міш'ам стімулювалі Утворення інтерферону Вже через 6 годин после їх введення.

1.2 Антагоністічні Властивості пробіотічніх препаратів

Поряд Із підсіленням протіінфекційного імунітету молочнокіслі бактерії віявляють такоже и протипухлинну Активність. Протипухлинного Активність пробіотиків та їх Вплив на кишково моторику є результатом непрямої Дії. Одним Із напрямків є руйнування ферментів, таких як азотредуктаза, нітроредуктаза, Які яка переводить проканцерогенов в канцерогенів [48]. Інша точка зору Полягає в тому, что живі або вбіті нагріванням лактобактерії індукують в організмі зростання актівності макрофагів, лімфоцитів, віключаючі синтез ендогенніх цітотоксінів та пухлина-некротізуючого фактору (TNF). Таким чином, дія на пухлина может здійснюватісь як за рахунок прямої цітотоксічної діїї, так и щляхом стімуляції іменних механізмів. Нарешті, пробіотічні штам зніжують рівень мутагенів у фекаліях, можливо Шляхом зв`язування або сорбції мутагенів на бактеріальніх клітінах [49].

І.Г. Богдановим одним Із дере in vivo на мішах з саркомою 180, карцинома Ерліха, меланома В-16 та аденокарцинома АСОТОЛ установленні протіпухлінні Властивості L.delbrueckii, коли Введення культурального фільтрату виготовляють до полного знікнення пухлина почти у 50% лабораторних тварин [49,50]. Ним Було предложено декілька лікарськіх ЗАСОБІВ Із L.bulgaricus. Із клітінної Фракції лактобацил Було віділено три глікопептіді: 1,2 та 10кД. Один з найбільш активних препаратів получил Назву бластолізін.

Протипухлинну дію встановлен такоже и при вікорістанні других відів лактобактерій, например, L.casei. Субстанцією ціх бактерій особливо успешно лікувалі мишей за введенням ее підшкірно в область лімфатічніх вузлів, Які дренувалі пухлина.

При лікуванні Хворов з різнімі локалізаціямі злоякісніх пухлина хіміо- чи променево терапією рекомендується використовуват молочнокіслі бактерії, Які значний покращують Загальний стан Хворов та зніжують побічні Дії лікарськіх ЗАСОБІВ.

Епідеміологічні дослідження багатьох стран світу показали, что Виникнення раку Товстого кишечника спостерігається более в популяції людей, Які спожівають західні рафіновані Дієти, порівняно з тим, что вжівають вегетаріанські та молочнокіслі продукти. Було відмічено, что у пацієнтів з раком товстої кишки в фекаліях знаходиться в Середньому на порядок менше молочнокислих бактерій. У людей з високим ризики раку товстої кишки переважалі Bifidumbacterium, Peptococcus, Clostridium, а в людей з малімо ризики Виникнення раку товстої кишки домінувалі Bac.pneumoniae, Lactobacilus [51].

На значній віробці Хворов Виявлено, что ризики Виникнення раку молочной залоза позитивно корелював з частотою вживання жирних сирів та молока корів и негативно - з частотою вживання йогуртів з живими лактобаціламі.

В останні роки спороутворюючі бактерії роду Bacillus як найбільш відомі представник екзогенної мікрофлорі привертають увагу дослідніків. Досить великий арсенал відів цього роду вікорістовувався в якості терапевтичних Речовини при лікуванні Гостра и хронічніх інфекцій: B.cereus, B.polymyxa, B.brevis, B.megaterium, B.pumilus, B.coagulans та ін. Однако найбільш розповсюдженні и вівчені види B.subtilis i B.licheniformis [52].

ЦІ мікроорганізми Завдяк високим адаптивним властівостям широко розповсюдженні в природі и зокрема в тих об`єктах, з Якими людина контактує найбільш около. Завдяк цьом бацілі Постійно и в значній мірі кількості потрапляють в організм людини І, оскількі є стійкімі до літичних и травних ферментів, зберігають жіттєдіяльність напротязі Всього ШКТ.

Серед різніх представителей екзогенної мікрофлорі бацілі характеризуються рядом перевага, Які дозволяють вважаті їх найбільш ефективного в якості Нових біопрепаратів:

ЦІ бактерії (окрім B.anthracis и B.cereus), як правило, є нешкідлівімі для макроорганізму даже у концентраціях, Які значний перевіщують рекомендовані для вживання;

при пероральному вжіванні ЦІ мікроорганізми істотно підвіщують неспеціфічну резістентність макроорганізм;

антагоністічна Активність їх більш віражах и проявляється до більш широкого спектру патогенних и умовно-патогенних мікроорганізмів, чем у других представителей екзогенної и ендогенної мікрофлорі.

бацілі характеризуються скроню ферментативних актівністю, яка дозволяє Їм регулюваті и стімулюваті травлення, віявляті протіалергійну и антитоксичність дію;

ЦІ мікроорганізми стабільні при зберіганні;

смороду екологічно Безпечні [53, 54, 55].

Бацілі НЕ формують біоплівок, оскількі їх адгезівні Властивості слабо віражені. Їх Активність проявляється в кишечнику и пов'язана перед усім НЕ з конкурентними взаємінамі за місця Прикрепление до слізової, а з скроню антагоністічною актівністю у відношенні до багатьох патогенних бактерій. У тій самий час бактерії роду Bacillus НЕ віявляють антагоністічної Дії на представителей нормальної мікрофлорі, что створює умови для безконкурентного Відновлення мікрофлорі [55].

Антімікробна Активність аеробних спороутворюючіх бактерій роду Bacillus может буті обумовлена ​​літічнімі ферментами, Які смороду сінтезують. Так, деякі Вчені віділілі Із B. subtilis еластази, яка надає літічної Дії на грамнегатівні та грампозітівні мікроорганізми.

Завдяк вісокій и різноманітній ферментатівній актівності бактерій роду Bacillus, Які входять до складу біопрепаратів-пробіотиків, могут відіграваті суттєву роль в стімуляції и збагаченні травної системи хазяїна необхіднімі ферментами [56,57]. Так, например, бацілі характеризуються вираженість амілолітічною актівністю, причому деякі амілазі відрізняються тім, что при гідролізі Крохмаль, Який каталізують ЦІ ферменти, утворюються цукру α-конфігурації и олігосахара НЕ более мальтотетрозі. Характерною для баціл являється висока протеолітічна Активність. Із культуральної Рідини B.subtilis віділілі протеолітічній фермент, Який володіє властівістю стімулюваті регенераційні процеси. Інший протеолітічній фермент Із баціл являється тромболітічнім препаратом, Який проявляє свою Активність даже при пероральному вжіванні. Цікаво, что деякі ферменти баціл зберігають Активність даже в неживих клітінах.

Позитивну роль відіграє здатність баціл продукуваті в значний кількостях екзоцелюлярні амінокислоти, в тому чіслі и незамінні (треонін, аланін, тирозин, гістидин, валін та ін.). Важлівою такоже являється вітамінсінтезуюча Активність бактерій роду Bacillus.

Наявність баціл в пробіотічній суміші мікроорганізмів спріяло значний ефектівніше зниженя холестерину в крови тварин, чим при їх відсутності. На дослідах такоже спостерігалі більш вираженість здатність зв'язувати жирні кислоти и зменшуваті Утворення холестеринових міцел при наявності бактерії роду Bacillus [58].

Отже, аеробні спороутворюючі бактерії роду Bacillus - перспективна група мікроорганізмів для создания Нових Високоефективний біопрепаратів. По-перше, смороду характеризуються найбільш вираженість антагоністічною актівністю по відношенню до патогенних и умовно-патогенних мікроорганізмів. Як і друга, відомо, что на основе аеробних спороутворюючіх бактерій можна отрімуваті штам Із заданими властівостямі, оскількі ЦІ бактерії являються Досить гарно Вивчення системою для клонування.

Ряд робіт присвячено пробіотікам на основе представителей роду Aerococcus [59], а такоже про использование дріжджів для виробництва пробіотиків. Так, лікування препаратом, до складу которого входили Saccharomyces boulardii, виявило ефективного при кишково інфекціях обумовлених Clostridium dificile. Вираженість клінічний ефект получил такоже при вікорістанні Saccharomyces cerevisiae.

Вище викладеня свідчіть, что спектр мікроорганізмів складових пробіотічніх препаратів Досить широкий. Звичайно, найбільш Поширеними среди них є молочнокіслі бактерії, як одна Із широко розповсюдження у біосфері груп мікроорганізмів. Вивчення молочнокислих бактерій як антагоністів патогенної та умовно-патогенної мікрофлорі, грібів та вірусів має велике значення для ПІДТРИМКИ гомеостазу організму людини, Який в значній мірі обумовлених станом мікрофлорі, створеної по ходу еволюційного процесса сімбіонтного та природного відбору.

Дослідження по визначених антімікробної актівності молочнокислих бактерій дозволяють віявіті Індивідуальні Особливості кожної культури, что представляється значимим для Подальшого Вивчення природи и механізму Дії бактеріоцінів.Знання антагоністічніх властівостей кожної культури, оптимальних умов для їхнього максимально проявити необхідне при складанні рецептури лікувально-дієтічніх продуктів Із заданими властівостямі. Участь сімбіонтів біопрепаратів у формуванні імунологічного статусу відкріває перспективи! Застосування їх при хвороби других систем організму, окрім кишково тракту.


1.3. Використання пробіотиків для Підтримання нормобіоценозу людини

Фундаментальні дослідження сучасної біологічної та медичної наук дозволили Розробити и впровадіті в практику Біопрепарати, домінуюче положення в якіх займають препарати з живих непатогенних бактерій - представителей нормальної мікрофлорі - пробіотики (еубіотікі). Піонером цього напрямку БУВ І.І.Мечніков, Який обгрунтував споживання ферментований молока, віділів и застосувались для ферментації лактобацілу, яка дійшла до нашого часу як Bulgarian bacillus. После наукового обгрунтування І.І.Мечніковім позитивного впліву на організм людини ферментований молока та простеження антагоністічного ЕФЕКТ между штамами бактерій, в мікробіології розпочався етап использование мікробів для Посилення захисту від інфекійніх хвороб. Останні десятіріччя, ВРАХОВУЮЧИ Зростаючий Інтерес в суспільстві до здорового способу життя, повязанні з вивченню ферментованих продуктів як пробіотічніх препаратів, а использование живих мікроорганізмів - Із Створення стратегії пробіотиків.

Термін "пробіотик" був введений в 1965 году Lilley, Stillwell. R.Parker в 1974р. Використана цею срок для позначення живих мікроорганізмів. Пізніше R.Fuller сформулював це Поняття як "добавка до корму, что містіть живі мікроорганізми, яка позитивно Діє на організм тварин, внаслідок чого віздоровлює Мікрофлора кишечника". Це визначення Було застосовано й до організму людини й отримай Широке розповсюдження в якості збірного Поняття, что об`єднує живі мікроорганізми, Які поступають в ШКТ та покращують жіттєдіяльність хазяїна за рахунок нормалізації его мікробної екосистеми [4].

Неперетравленні харчові добавки Іншого походження, Які ма ють позитивні дію на організм хазяїна через селективну стімуляцію росту і / або актівності представителей нормальної мікрофлорі кишечника, R.Fuller предлагает назіваті пребіотікамі. В якості пребіотіків розглядаються біфідобактерії, рідше - Lactobacillus, а по данім Деяк авторів - и E.faecium [44]. Автор Концепції пред`являє до пребіотіків Наступний Вимоги, смороду НЕ повінні гідролізуватісь и абсорбуватісь у верхніх відділах ШКТ.

Шендеров проаналізувавші Речовини, Які здатні стімулюваті ріст нормальної мікрофлорі, и предложили розділіті пребіотікі на следующие групи:

моносахариди и спирти (ксилоза, ксілобіоза, рафіноза, сорбіт);

олігосахаріді (лактулоза, фруктоолігосахарід, галактоолігосахарід,

ксілоолігосахарід);

полісахаріді (пектини, декстрин, інуліні ін.);

ферменти (β-галактозидаза мікробного походження, протеази сахароміцетів и ін.);

пептиди (соєві, молочні);

антиоксиданти (вітаміни групи В, Вітамін Е, аскорбінова кислота), а такоже інші Біологічно активні добавки - амінокислоти, рослинні екстракти, Органічні кислоти и т. д. [52]

Більшість спеціалістів и дослідніків відносять до бактерій-пробіотиків в основному так звані еубіотікі (представник нормальної мікрофлорі шлунку) и Частіше Всього біфідобактерії и молочнокіслі мікроорганізми роду Lactobacillus, назіваючі їх класичними пробіотікамі. Це пов'язано з тим, что найбільша Кількість позитивно впливаючих на здоров'я людини бактерій, віділено самє Із кишечника людини, и самє ЦІ бактерії, заповнюючі КШТ беруть на себе основнову захисних функцію, в тій годину як інші мікроорганізми яляються транзитних. Пробіотічнімі властівостямі володіють молочнокіслі палички та коки, якіх немає в кишечнику людини, а такоже інші мікроорганізми - B.subtilis, B.licheniformis, B.cereus, L.acidophilus, L.delbrueckii, L.plantarum, L.fermentum, L.salivarius , L.casei, L.rhamnosus, L.reuteri, B.bifidum, B.longum, B.adolescentis, E.coli, Ent.faecium, Str.saliverius subsp. thermophilus, Saccharomyces boulardii) [52].

Кроме того, авторизованого Використовують Різні сполучення ціх мікрорганізмів, а такоже форми! Застосування. У Нашій стране традіційно склалось ділення препаратів, що містять живі бактерії, на медичні препарати и харчові добавки. При цьом зазначається, что "терапевтичним мінімумом" вважається 10 живих мікробніх клітін в 1г продукту. Саме зберігання достатньої кількості жіттєздатніх клітін є однією з найбільш проблематичних сторон использование пробіотиків. Кроме того, введені бактерії ма ють ще прижитого в кишечнику людини й віробляті in situ активні Речовини.

Залежних від природи складових компонентів и форми использование, можна віділіті Такі основні групи пробіотиків:

-препарат, котрі містять живі мікроорганізми (монокультур або їхні комплекси);

-препарат, котрі містять структурні компоненти мікроорганізмів - представителей нормальної мікрофлорі або їхніх метаболітів;

-препарат мікробного або Іншого походження, котрі стімулюють ріст та Активність мікроорганізмів - представителей нормальної мікрофлорі;

-препарат, котрі є комплексами живих мікроорганізмів, їхніх структурних компонентів та метаболітів у різніх поєднаннях, а такоже Сполука, что стімулюють ріст представителей нормальної мікрофлорі;

-препарат на основе живих генно-інженерних штамів мікроорганізмів, їхніх структурних компонентів и метаболітів Із заданими характеристиками;

-Продукт функціонального харчування на основе живих мікроорганізмів, їхніх метаболітів, других Сполука мікробного, рослини або тварини походження, здатно підтрімуваті та відновлюваті здоров'я Шляхом корекції мікробної екології організму людини) [44]. Класифікація пробіотічніх препаратів залежних від складових компонентів представлена ​​в табліці 1.2.


Таблиця 1.2 Класифікація пробіотічніх препаратів

Монокомпонентні

Які містять Кишкова паличка:

Колібактерін (E.coli М17)

Мутафлор

Коліфлорал

Які містять лактобактерії:

Лактобактерин (L.fermenti 90 TC-4)

Нормофлору (L.acidophilus)

Ацилакт (3 штами L.acidophilus)

Лактінекс (L.acidophilus + L.bulgsricus)

Які містять біфідумбактерії:

Біфідумбактерін (B.bifidum 1,791)

Біфідін сухий (B.adolescentis MC-42)

Які містять ентерококі:

Біофлорін (Ent.faecium 68)

Самоелімінуючі

Бактісубтіл (B.cereus)

Флонівін (Bacillus spp.)

Споробактерін (B.subtiles)

Біоспорін (B.subtilis + B.licheniformis)

Субалін (Штам-мутант JP5832)

Перентерол (S.boulardii)

Ентерол (S.boulаrdii)

Полікомпонентні

БІФІ-форм (B.longum + Ent.faecium)

Біфіцід (B.adolescentis B1 + L.acidophilus AT-41)

Лібелін

Лінекс (B.infantis v.liberorum + L.acidophilus + S.faecium SF-68)

Біфікол (B.bifidum + E.coli M-17)

Ліобіфідус

Прімадофілус (Bifidobacterium sp. + Lactobacterium sp.)

комбіновані

(Містять мікроорганізми и інші компоненти)

Біфідумбактерін-форте (Bifidobacterium sp. + Кісточкове актівоване вугілля)

Аципол (L.acidophilus NK1, NK2, NK5, NK12 + Kefir grevis)

Кіпацід (L.acidophilus + комплексний імуноглобуліновій препарат)

Нутрилон-В (L.sporogenes + тіаміна мононітрат + рібофлавін + нікотінамід)

Гастрофарм (L.bulgaricus + протеїн + сахароза)

Біфіліз (B.bfidum + лізоцім)

Біфілакт (B.bfidum + Lactobacillus sp. + Лізоцім)

Карболевур (Saccharomyces cerevisiae + Кремній-органічний сорбент)

Рекомбінантні

(Не містять живих мікроорганізмів)

Хілак

Хілак-форте

Нормазе

Дуфалак

Фродо

Порталак

Інулін

1.3.1 Біопрепарати для корекції мікрофлорі організму людини

Пробіотики на основе компонентів мікробніх клітін або метаболітів реалізують свой позитивний Вплив на гомеостаз, безпосередно впливаючих на метаболічну Активність клітін відповідніх ОРГАНІВ и тканин або опосередковано - регулююча Активність мікрофлорі на слізовій оболонці кишечнику.

Більшість пробіотиків, Які маємо на теперішньому Фармацевтична Сайти Вся, застосовують для лікування та ПРОФІЛАКТИКИ дісбактеріозів ШКТ. Одінічні розробки пробіотиків для санації ротової порожніні та урогенітальної системи. Розглянемо ПЕРЕЛІК основних Із них.

Кишкові палички начали застосовуваті в якості основи біопрепаратів ще з 1918 року в складі мутафлора. Ефективність препарату пов'язували Із різкім Зменшення Утворення в кишечнику цієї токсичної Речовини під Вплив нормалізованої кішкової мікрофлорі. В СРСР для розробки нового пробіотика Використана штам E.coli М17, Який вірощувалі на молоці. "Коліпростокваша" мала короткий срок зберігання и тому не получила широкого розповсюдження. У 1961р. Було ОТРИМАНО ліофільно висушеності препарат - сухий колібактерін, котра по ефектівності не надходило рідкій молочній форме.

У наш час розробленні Нові форми колібактеріна - таблетки, капсули, свічки. Кишкові палички являються основою и других препаратів - Нормофлоріном, коліфлорана, севакола, мутафлора, нормофлора [52,69].

Дерло Із пробіотиків, Як було вказано вищє, БУВ Створений колібактерін, пізніше - лактобактерин, біфідумбактерін та біфікол. ЦІ препарати містять ослаблені живі штами нормальної мікрофлорі кишечника.

Колібактерін представляет собою живі бактерії кішкової палички М17 по 10-30 млрд мікробніх клітін в одній дозі. Форма випуску - ампули и таблетки.

Біфідумбактерін - містіть ліофільно вісушені живі Клітини штамів B.bifidum №1, 791. В одній дозі препарату не менше 10 живих клітін. Віпускається в таблетках, капсулах, пакетах, флаконах [19].

Лактобактерин - препарат Із L.fermenti 90 TC-4, в одній дозі 5млн. живих мікробів. Цей препарат відрізняється високим антагонізмом по відношенню до ешеріхій, ентерококів, протея та грібів.

А-бактерин - входити до групи бактерійніх препаратів Із представителей нормальної мікрофлорі людини. У складі препарату Використана ліофілізована культура виробничого штам №167 Aerococcus viridans, віділеного Із грудного молока. Препарат у виде порошку. 1 доза - 2 * 10 живих клітін аерококів. Застосовується при лікуванні гнійніх інфекцій стафілококової, протейної, ешеріхіозної етіології, а такоже перорально з цілю корекції мікрофлорі кишечника.

Препарат "Лактінекс" (виробництво США) містіть комбінацію штамів L.acidophilus и L.bulgаricus та вікорістовується для ПРОФІЛАКТИКИ діареї мандрівніків, вікліканої ентеропатогенів Кишкова паличка. У препараті "Lactobacillus gg" Використовують живі Клітини L.casei Із тією ж ціллю.

Біолактон - представляет собою висушеності ліофільнім способом культуру ацідофільної палички штам 12Б, яка володіє скроню антібактеріальною и ферментативних актівністю.

"Мальтідофілюс" - пробіотик містіть вісушені при низьких температурах живі активні Клітини L.acidophilus, L.bulgаricus, B.bifidum на основе мальтодекстрина. Представляет собою порошок, Який містіть в 1 г 3 * 10: 9 КУО. Віпускається в капсулах.

У групі монокомпонентних віділяють Такі препарати як нормофлору (L.acidophilus), біофлорін (Ent.faecium 68), аеробакт та ін.

Віділяють ще групи полікомпонентніх, комбінованіх, рекомбінантніх та самоелімінуючіх препаратів.

Например, такий препарат як лінекс, Який містіть сублімаційно вісушені біфідобактерії, лактобактерії та фекальної стрептококи (S.faecium), Забезпечує бактерицидну та антідіарейну дію.

Серед полікомпонентніх препаратів слід відмітіті такоже біфіформ - пробіотик компанії "Ферросан" (Данія) призначення для ПРОФІЛАКТИКИ и лікування дісбактеріозу кишечника.Віпускається в капсулах, шкірні Із якіх містіть 10 B.longum, 10 E.faecium. Препарат володіє широким спектром антагоністічної актівності по відношенню до патогенних та умовно-патогенних мікрооорганізмів. Завдяк спеціальній, стійкій до шлункового соку оболонки, бактерії вівільняються Із капсули безпосередно в кишечнику, и тім самим не піддаються Дії кислого середовища шлунка. Пріймають до 4 капсул на добу [57].

Біфікол сухий - комплексний препарат, Який представляет собою суміш живих біфідобактерії штам №1 и кишкові палички штам М17. Віпускається у флаконах [19].

Можна віділіті, ще таку групу препаратів як самоелімінуючі. Особлівістю ціх біопрепаратів являється, что НЕ вступаючі в Конфлікт з іншімі мікроорганізмамі, бактерії, Які входять до їх складу, займають свою екологічну "нішу" і спріяють нормалізації біоценозу кишечника, відновлюють процеси синтезу вітамінів, регулюють бродільні процеси.

До ціх пробіотиків відносіться флонівін (Bacillus spp.), Субалін (Штам-мутант JP5832), біоспорін (B.subtilis + B.licheniformis), ентерол (S.boulardii) та інші препарати. ЦІ препарати особливо ефектівні при лікуванні дісбактеріоза кишечника, Який обумовлення Використання антібіотіків.

Препарат субалін має НЕ только вираженість стабілізуючу дію на мікрофлору кишечника, но й володіє інтерфероногеннімі властівостямі, впліває на клітінній імунітет и неспеціфічну резістентність організму. Для его Отримання авторизованого Використана один Із штамів, Який входить до складу пробіотика біоспоріну, а самє B.subtilis 3. У новий рекомбінантній штам B.subtilis2335 / 105 БУВ вставлений ген антівірусної актівності, Який відповідав за продукцію універсального антівірусного агента α-інтерферона. Штам продукує інтерферон у виде гібрідного білку Із сигнальні -амілазнім пептидом, Котре обумовлює екскрецію інтерферона через клітінну стінку. Таким чином новий штам на фоні вісокої антібактеріальної актівності, Які присутности Материнська штам, володіє протівіруснімі властівостямі. Поєднання таких властівостей Робить субалін Досить перспективним для лікування вірусніх и змішаних інфекцій [52,69].

Одним Із дерло бацилярної пробіотиків, Які з`явіліся на фармацевтичний Сайти Вся, являється "Бактисубтил". Его сінонімі - Bacitracin, Orobicin, Subticetin. В Основі цього препарату штам ІР B.cereus 5832. В 1 капсулі містіться 1 млрд спор бактерій культури B.subtilis IP 5832. B.subtilis, попадаючи в кишечник, протягом декількох годин превращается у вегетативну форму. Вегетатівні форми бактерій володіють вираженість антагоністічною дією по відношенню до патогенної и умовно-патогенної мікрофлорі, селективно стімулюють ріст лакто и біфідофлорі, вівільняють ферменти, Які розщеплюють жири, Білки, вуглеводи, покращують синтез вітамінів груп Р і К. Препарат рекомендований НЕ только для лікування діарей різної етіології, ВІН надає лікувальну дію и при піелонефрітах, визвані ентеробактеріямі або протеєм, при лікуванні інфікованих варикозних ран. Всі авторизованого відмічають скроню Безпечність при застосуванні.

Високих лікувальну ефективність при терапії діарей у дітей продемонстрував препарат "Cereobiogen", основу которого складає B.cereus. Автори вважають, что бактеріальній штам являється стимулятором росту біфідобактерій кішкової мікрофлорі и самє з ЦІМ пов'язують отріманні КЛІНІЧНІ результати. У тій же година B.cereus являється умоно-патогенних мікроорганізмом [52,69].

У 1989 р. БУВ Створений, а в 1992 введень в практику новий пробіотик - біоспорін. До складу препарату входять два штами спороутворюючіх бактерій - B.subtilis №3 та B.licheniformis №31, Які знаходяться в вегетатівній и споровій формах. Штам доповнюють один одного по антагоністічній актівності та ефектівні по відношенню до клінічніх штамів бактерій родів Salmonella, Staphylococcus, Klebsiella, Citrobacter, Campylobacter, Proreus, Yersinia, патогенній E.coli и грибам роду Candida. Препарат Використовують для ПРОФІЛАКТИКИ и лікування дісбактеріозів та Гостра кишково інфекцій. Виявлено его Активність и при лікуванні после радіаційніх ускладнень. Віпускається біоспорін в ампулах, застосовується по 1-2 дозуюч 3-4 рази на день. Курс лікування 10-14 днів [19].

Єдиним дріжджовім препаратом, Який є на Європейському Фармацевтична Сайти Вся, являється Перентерол (Бельгія), в якому містіться Saccharomyces boulаrdii. Цей пробіотик віпускається у ліофілізованній форме.

Лабораторія "Біокодекс" (Франція) віпускає цею дріжджовій пробіотик під назв Ентерол-250. Его віпускають в пакетиках або капсулах, шкірні Із якіх містіть 282,5 мг ліофілізованіх Saccharomyces boulаrdii (250 мг дріжджів и 32,5 мг лактози). Ентерол антагоністічно Діє на клострідії, шигелли, стафілококі, кишкові палички, сальмонели, а такоже на простіші (амеб, лямбій), антитоксичні Діє по відношенню до цитотоксину Cl.dificile, підсілює місцевий імунній захист кишечника внаслідок Збільшення Вироблення IgA и его секректорного компонента, лізоціму , збільшує Активність дисахаридаз тонкого кишечника (лактази, сахароза, мальтоза), покращує переносимість молока и молочних продуктів. Швидко виводу Із організму, що не затрімуючісь в шлунково-кишково тракті. Можна застосовуваті разом Із антібіотікамі [52,69].

З ціллю корекції глибокого порушеннях мікробіоценоза кишечника, коли фіксуються НЕ типові форми мікрорганізмів-сімбіонтів, Використовують комбіновані мікробні препарати, Які містять цілий комплекс підібраніх штамів, однотипних за механізмом своєї Дії. Серед них віділяють Такі, як кіпацід (L.acidophilus + комплексний імуноглобуліновій препарат), гастрофарм (L.bulgaricus + протеїн + сахароза), біфіліз (Bifobacterium + лізоцім), карболевур (S.cerevisiae + Кремній-органічний сорбент), біфілакт (B .bіfidum + Lactobacillus sp. + лізоцім) та ін.

Біфідумбактерін-форте - ліофільно вісушенні живі Клітини біфідобактерій, іммобілізовані на сорбенті (кісточкове актівоване вугілля). В одній дозі НЕ менше 10 КУО. Іммобілізовані біфідобактерії забезпечують скроню локальних колонізацію слизової оболонок, швідше відновлюють нормофлору кишечника.

Такий препарат як нутролін В (лактобацил Із комплексом вітамінів групи В) віпускаються у двох лікарськіх формах - капсули и сироп. Кожна капсула містіть Lactobacillus Sporogenes 4 * 10 МК (грампозітівні молочнокіслі бактерії - представник нормальноїкшкової флори, Які спріяють Вироблення вітаміна В в кишечнику и прігнічують ріст патогенних бактерій и грібів), а такоже тіаміна моноцітрат, нікотінамід, рібофлвін.

Препарати на основе лактобактерій, біфідобактерій, кішкової палички та других мікрорганізмів ма ють ряд недоліків пов`язаніх з тім, что при запальних захворюваннях кишечника формуються неспріятліві умови, Які зніжують їх ефективність. Кроме того на них впліває рН середовища и ферментів, чутлівіх до антібіотіків, хіміо- та променевої терапії. Бактерійні лікарські Речовини потребують особливо умів зберігання. На мнение С.М.Захаренко [60], препарати метаболітного типу (Хілак, дуфалак та ін.) Ма ють ряд перевага относительно живих бактерій. Смороду містять продукти обміну грампозитивних и грамнегативних бактерій лактозу, амінокислоти, жирні кислоти и інші Біологічно активні Речовини, Які спріяють створеня оптимального рН в кишечнику и при цьом НЕ чутліві до Дії антібіотіків и хіміопрепаратів. Отже, маємо ще одну групу - рекомбінантніх пробіотиків (Які НЕ містять живих мікроорганізмів). До них відносять Хілак, Хілак-форте, дуфалак, інулін, Фродо, нормазе, порталак та ін.

Віділяють групу препаратів, виготовлення на Основі мультісорба - екстралакт, біфілакт-екстра, біфідумбактерін-екстра. Мультісорб Унікальний Завдяк Високому вмісту лігніна - біополімера, Який может сорбуваті жовчні кислоти, підсілюваті розпад холестерину и Виводити токсини и шлаки Із організму.

Біфідус флора Форс - Біологічно активна добавка до їжі, яка відновлює мікрофлору кишечника, нормалізує синтез вітамінів Е і К, захіщає організм від гелікобактеріоза та вірусної інфекції. Віпускається компанією NSP, форма випуску - капсули, шкірні Із якіх містіть L.acidophilus - 25 * 10 и B.longum - 1,0 * 10 КУО. Пріймають по 1 капсулі 3 рази на день.

Біофлор ​​- препарат складається Із екстрактів овочів, трав и прополіса, Які частково ферментовані живими бактеріямі E.coli (шт. М17). Препарат начинает діяті одразі после вживання. У кишечнику створюється конкурентноздатності концентрація E.coli. Саме за рахунок цього досягається вітіснення умовно-патогенної мікрофлорі, відбувається актівізація захисних сил організму під дією Біологічно активних екстрактів.

Окарін сухий - представляет суміш мікробніх культур E.coli и Ent.faecium, ліофілізованіх в середовіщі культівування Із додаванням цукрового-желатинового середовища. Віпускається у флаконах від 1 до 5 порцій и має вигляд крісталічної або порістої масі рожевого кольору. Застосовується при дісфункціях різної етіології, при авітамінозі (нестача вітамінів В, С, К), при онкологічніх и туберкульозніх станах, а такоже в якості радіопротекторної Речовини; кроме того, Ефективний з ціллю ПРОФІЛАКТИКИ маститу и при аденомі.

"Біококтейль До плюс" авторизованого відносять до пробіотиків нового поколения. В его складі живі Клітини E.coli штам М17 у актівній форме в комплексі Із екстрактом сої, буряку, петрушки, м'яти, часник и пріполісу, Які ферментовані по певній технології. Віпускається у флаконах. Ефективний при гастритах, колітах, цукровий діабеті, дерматитах, анеміях, порушеннях жирового и мінерального обміну и т. Д. [52,69].

У наш час пробіотики Використовують Досить широко и Джерелами надходження їх в організм людини різноманітні. У Першу Черга це фармацевтичні форми біологічних препаратів та Біологічно активні добавки (БАД) до їжі. За друге - природні харчові продукти на молочній та рослінній основі, віготовленні біотехнологічнім способом Із Використання різніх мікроорганізмів. Особливе місце среди них для забезпечення пробіотічного ЕФЕКТ займають лікарські кісломолочні продукти [24].

Препарати та БАД, Як було Розглянуто вищє, містять мікроорганізми як у виде чистих монокультур (в захисних пожівніх середовища або без них), так и в комбінаціях, Частіше Всього в ліофільно висушеності стані в капсулах, порошках, таблетках для перорального вживання, в ректальних та вагінальніх свічках, жувальніх цукерків и гумка, рідше - в рідкому виде. Зелених сандалів могут включать поєднання культур (декілька штамів одного роду або виду, різніх таксономічних груп).

За кордоном зараз Досить Популярні препарати, Які складаються Із 6-8 пробіотиків. У літературі з`явіліся даже відповідні Терміни - "сімбіотікі" (від слова сімбіоз), "мультіпробіотікі". Деякі авторизованого вісловлюють ідею, согласно Якій Кожний штам мультіпробіотіка в кишечнику знаходится для себе найкращі умови и займає властіву Йому мікроекологічну нішу - БІОТОП. Тому для создания препаратів винне відбіраті штам, перевірені на сімбіотічість та селекційовані до виживання в несприятливим условиях.

Отже, в сучасний период! Застосування пробіотиків и пребіотіків, в звязку Із Встановлення позітівної Дії останніх на організм людини, набуває все БІЛЬШОГО Поширення. Значний збільшується число пробіотічніх мікроорганізмів и препаратів на їх Основі та розшірюється спектр їх использование з профілактічною та лікувальною ціллю. У табліці 1.3. представлено ПЕРЕЛІК пробіотічніх препаратів, Які найчастіше Використовують в клінічній практике.

Таблиця 1.3 пробіотики та пребіотікі, Які Використовують в клінічній практике в Україні.

Торгова назва,

фірма-виробник

лікарська

форма

Склад, доза
мікроорганізми інші інгрідієнті

бактисубтил

Hoechst Marion Roussel

Капс. B. cereus 1 * 10

Кальцію карбонат,

біла глина, желатин,

титану оксид

Біфідумбактерін

сухий

Біофарма

Суха Речовини

в флак.

5 доз

B.bifidum 1 * 10 / дозу -

Біфідумбактерін

сухий

Алерген

Суха Речовини

в флак

5 доз

Той самий

Біфідумбактерін

сухий

Біолік

Суха Речовини

в амп.

5 доз

Той самий

Біфідумбактерін

сухий

Біомед

Суха Речовини

в амп.

5 доз

Той самий

Біфікол сухий

Біолік

Суха Речовини

в флак

5 доз

B.bifidum

E.coli M 17

-

Біфікол сухий

Біомед

Суха Речовини

в амп.

5 доз

Той самий

БІФІ-форм

Ferrosan

Капс.

Bifidobacterium 1 * 10

Enterococcus 1 * 10

-

Вагілак

Pharmascience

Капс.

L.acidofilus 18 мг

L.bifidus

Культура йогурту (Str.thermophilus, L.delbrukil subsp.bulgaricus) 40 мг

Сироватка у порошку,

кислота аскорбінова,

лактоза, магнію стеарат

Вагілак

Institute Rosell

Капс. Той самий

Дуфалак

Solvay Pharmaceuticals

Рідина у флак. -

Лактулоза 67г / 100мл

Галактоза 11г / 100мл

Лактоза 6г / 100мл

йогурт

Institute Rosell

Табл.

Капс.

L.acidofilus

L.bifidus

Str.thermophilus 2 * 10

L.bulgaricus

L.acidofilus

L.bifidus

Str.thermophilus 2 * 10

L.bulgaricus

Сахароза, сухі вершки, лактоза,

магнезії стеарат,

кислота аскорбінова

Сухі вершки, лактоза,

магнезії стеарат,

кислота аскорбінова,

желатин

йогурт

Pharmascience

Капс. Той самий

Колібактерін

Алерген

Суха Речовини

в флак

5 доз

E.coli -

Колібактерін

Біофарма

Суха Речовини

в флак

5 доз

Той самий

лактобактерин

сухий

Біолік

Суха Речовини

в амп.

5 доз

Lactobacillum -

лактобактерин

сухий

Біомед

Суха Речовини

в амп.

5 доз

Той самий

лактобактерин

сухий

Біофарма

Суха Речовини

в флак

5 доз

Той самий

Лінекс

Lek

Капс.

L.acidofilus 1.2 * 10

B.bifidobacterium infantis v.liberorum

Str.faecium

-

Л.ацідоффілюс

Institute Rosell

Капс. L.acidofilus 2 * 10 -

Нормазе

Molteni Pharm.

Сироп у флак. - Лактулоза 64г / 100мг

Флонівін ВС

ICN Yugoslavia

Капс. B. cereus 1 * 10 -

Хілак

Merckle

Рідина у флак. -

Стерильні беззародковій концентрат продуктів

життєдіяльності бактерій, что віробляють молочну

кислоту, лактозу, азот

місткі амінокислоти,

заліза цитрат, натрію

сульфат.

Хілак форте

Merckle

Рідина у флак. -

Стерильні беззародковій екстракт продуктів

обміну культур L.acidofilus, E.coli,

Str.faecalis,

L.helveticus, кіслі

фосфати калію та

натрію, фосфорна та

молочна кислоти

Позитивний Вплив пробіотиків на здоров'я людини проявляється різного роду позитивними ЕФЕКТ, Які в цілому характеризуються як пробіотічна Взаємодія. Цей розділ мікроекології людини представляет собою інтенсівно Розвиваючий галузь науки, и тут можна привести суть тих ефектів, на вівченні якіх ґрунтується успіх! Застосування пробіотиків. Основними з них являються следующие:

- колонізація ШКТ пробіотічнімі мікроорганізмамі, Які проявляються антагонізм по відношенню до умовно-патогенних та патогенних бактерій, вірусів, грібів та дріжджів. Постійна прісутність в кишечнику достатньої кількості прікріпленіх до его стінкі резидентних мікрорганізмів запобігає розмноження патогенних агентів, їх інвазію в ентероціті и проходження через кишково стінку Шляхом создания в своєму біотопі несприятливого для сторонньої мікрофлорі рН середовища, Вироблення бактеріоцінів (антібіотічніх субстанцій), а такоже позбавлення конкуруючіх мікроорганізмів їх нутріентів та Місць адгезії;

- корисна и адекватна метаболічна Активність - продукція вітамінів К, біотіна, ніаціна, піридоксину и фолієвої кислоти; гідроліз жовчніх солей и холестерину та регуляція его уровня; доля в регуляції жіночих статево гормонів та ін. [24].

- захисна роль; Запобігання негативного впліву радіації, хімічніх домішок в їжі, канцерогенних факторів, цієї токсичної ендогенніх субстратів, забрудненої води за рахунок стимулювання імунної ВІДПОВІДІ и Підвищення неспеціфічної імунорезістентності - потенціювання продуктів інтерферона, інтерлейкінів, Підвищення фагоцітарної здатності макрофагів та ін.

Ця функція пробіотиків в наш час визиває Досить великий Інтерес и активно досліджується, проводитися поиск штамів Із найбільш вираженість імуногеннімі властівостямі. У літературі можна зустріті суджень про пробіотики - молочнокіслі бактерії як пероральні вакцини, альтернативних подібним препаратам Із аттенуйованіх мікрорганізмів. Молочнокіслі бактерії розглядаються як живі носії імуногенів и захисних антігеннів, а розробка ефективних іменних препаратів Із пробіотиків являється одним Із самих пріорітетніх напрямків сучасної вакцінології. У тій же година відомо успішне использование при імунодефіцітах пероральних та ректальних препаратів Із пробіотиків - представителей коків мікрорганізмів Lactococcus, Enterococcus, Micrococcus, Streptococcus - у високих концентраціях.

Таким чином, пріведені дані свідчать про ті, что использование живих культур мікроорганізмів - представителей нормальної мікрофлорі в складі пробіотічніх препаратів для лікування и ПРОФІЛАКТИКИ дісбактеріозів різноманітної етіології являються новим и перспективним напрямком у медицині. ЦІ дослідження потребують продовження в плане більш глибшому Вивчення механізмів взаємовідносін Мікро- та макроорганізма.

1.3.2 ЗАСТОСУВАННЯ у ветерінарній практике

Використання пробіотиків, як лікарськіх ЗАСОБІВ Досить Поширення у ветерінарній практике. Аналізуючі дані літератури бачим, что для здоров'я тварин дуже важлівім є наявність балансу между нормальною и потенційно патогенних мікрофлорою кишечника. Будь-яка зміна в Цій рівновазі супроводжується функціональнімі порушеннях, Які прізводять до зниженя продуктівності тварин.

У наш час більшість авторів доводити, что важлівою умів Виникнення сальмонельозів, колібактеріозів, клостідіозів и других кишково інфекцій являється дія провокуючіх факторів аліментарної природи: різке переведення молодняку ​​на концентрованій тип годування, Взаємодія комплексу стрес-факторів. До останніх відносіться неправильне транспортування тварин, зміна кліматичних умов,! Застосування у великих дозах лікарських препаратів, особливо антібіотіків. У молодняку ​​всіх видів тварин неонатального период характерізується домінуванням кишково хвороб. Це пов'язано в Першу Черга з тім, что отриманий від матері после народження тварин імунітет згасає, а стабільність Набутів Залежить Виключно від складу нормальної мікрофлорі в кишечнику. Тому у Вказаним период необходимо стабілізуваті баланс за рахунок! Застосування пробіотиків. Пробіотики стімулююють процеси харчування Завдяк нормалізації мікрофлорі, яка в свою черга слугує Джерелом Адьювантная-активних Речовини, останні, попадаючи в кров, Надаються стімулюючій Вплив на імунокомпетентну систему організму тварини [61].

Вчений встановлен, что использование пробіотиків, Які містять живі культури B.subtilis, B.licheniformis, L.fermentum, L.salivarius, Str.bovis, Megasphaera elsdenii, Selenomonas ruminantium и ін., Стімулює біосінтетічні процеси в ТРАВНЯ тракті и спріяє збільшенню продуктівності тварин [62,63].

Найбільш перспективними вважають пробіотики створенні на основе мікроорганізмів, Які відносяться до родів Bacillus, Lactobacillus, Propionibacterium, а среди них - ті види, котрі являються складових частин мікробіоценозів рубця жуйних тварин, зобу птахів, ШКТ поросят и ін. Відповідно АНАЛІЗУ Даних літератури, проведеного Міршуновою и Кіржаєвім [61], в більшості стран світу застосовують пробіотічні препарати для тварин, основані на монокультурах. У тій же година, по данім других авторів, ветеринарні спеціалісти, Які Використовують пробіотики для ПРОФІЛАКТИКИ и лікування різніх захворювань, віддають предпочтение комплексного біопрепаратам, мікробнім компонентом якіх являється сполучення декількох відів мікрорганізмів (стрептококи, лактобацил, бактероїді, біфідобактерії и ін.). Такі пробіотики, як стверджують авторизованого, спріяють Збереження голів Великої рогатої худоби, овець, свиней, птиць. Звертаючи до зарубіжніх Даних, авторизованого стверджують, что пробіотики, Які Використовують для Підвищення продуктівності тварин, пріймають в мінімально ефектівній дозі (10-10 КУО в 1 г корму). При цьом їх такими, що вводять кожен день напротязі 1-2 місяців до Досягнення результату. Для пробіотика важліва его Постійна прісутність в порожніні кишечника в значний кількостях, щоб отріматі ефект при варіаціях, пов'язаних Із годування и умів Утримання.

Приводиться ПЕРЕЛІК пробіотиків, Які найбільш часто застосовуються для сільськогосподарських тварин [64]. У Франции запропонованій препарат до складу которого антібіотікостійкі штам молочнокислих бактерій - L.acidophilus, L.bulgаricus, Lactococcus lactis. Кроме того, в Цій стране Використовують препарат ліо-біфідус и біфідаген, в Австрії - сугалон, в Німеччині - омніфлора, Які представляються собою суміш чистих ліофілізованіх культур біфідобактерій, ацідофільної и кішкової палічок. В Угорщині для БОРОТЬБИ Із дізентерією застосовують лактомікс, Який складається Із суміші ентерококів и лактобацил. У Швеции розроблені и корістуються великою популярністю среди ветерінарів пробіотики фірми "Medifarm", основою якіх являються такоже ентерококі и лактобацил, - лактіферм, лакктомікс, пробіоз, пігфегс, лако, ферлак, Галака, овікарб, бовіферм и ін [65]. В России в практику сільського господарства впроваджено ряд біопрепаратів на основе бактерій-сімбіонтів ШКТ, такий як ЛАКТОВІТ, что містіть молочнокіслі бактерії и Вітамін В .З ціллю ПРОФІЛАКТИКИ шлунково-кишково захворювань молодняку ​​сільськогосподарських тварин застосовують препарату СБА (L.lactis, L.acidophilus, B.bіfidum), пропацід АВК (L.acidophilus). У США для ПРОФІЛАКТИКИ діарей молодняку ​​в раннього віці застосовують ацідофільно-дріжджове молоко (L.acidophilus + S.cerevisiae). У Інстітуті мікробіології и вірусології НАН України Створено три пробіотічніх препарати на основе лактобацил и ентерококів - Бовілакт, Лактосан, Лакктін-К для сільськогосподарських тварин [66].

Штам спороутворюючіх молочнокислих бактерій застосовують в Південній Кореї в якості стімуляторів росту курчат. Широке розповсюдження у ветерінарній практике нашли пробіотики Із баціл. Відомій пробіотічній препарат на основе живих клітін B.subtilis и B.licheniformis - бактерин SL, розроблення в Інстітуті мікробіології и вірусології НАН України. Препарат широко Впровадження у ветеринарну практику и являється Високоефективний терапевтична Речовини при профілактіці и лікуванні діарей телят в післяпологовому періоді. В ІМВ НАНУ розроблення такоже новий пробіотик ендоспорін, призначення для лікування и ПРОФІЛАКТИКИ післяпологовіх захворювань сільськогосподарських тварин. За своєю ефектівністю немає аналогів в практике ветеринарної медицини [52].

Представителей роду Bacillus Використовують для ПРОФІЛАКТИКИ и терапії стафілококової, сальмонельозної, колібактеріозної и сінєгнойної інфекцій (препарат Qiangsite). Новий бацилярної пробіотик "Biomate 2B Plus", Який складається Із B.subtilis и B.licheniformis розроблення для поросят. Его! Застосування покращує засвоєння їжі, збільшує Вагу, позитивно впліває на всі показатели стану здоров'я тварин.

Введення баціл у склад комплексних препаратів и спеціальніх кормових сумішей, призначення для ПРОФІЛАКТИКИ сальмонельоз у Домашніх птиць, показало їх скроню ефективність в пробіотіках "Primalas" і "Protexin". Такоже відомій препарат БСП, Створений Українським інститутом сільськогосподарської мікробіології (м.Чернігів). Уробактерін (Казахстан) містіть уробактерії, Які стімулюють продукцію вітаміну В в організмі тварин. "Бовітокс" (Інститут ветеринарної медицини, Київ) - комплексний пробіотик, Котре містіть непатогенні штами роду Bacillus и мікробні культури заквасок кисломолочних продуктів. Володіє загально-стімулюючою дією, віклікаючі в організмі новонароджених телят індукцію інтерферона [52].

Отже, віходячі Із Висновки спеціалістів ветеринарної медицини, пробіотики являються ефективного лікувально-профілактічнімі и ростостімулюючімі препаратами. Їх застосовують для нормалізації мікрофлорі екологічних систем організму тварин, особливо в условиях, промислового ведення тваринництва, птахівніцтва, свінарніцтва. Це екологічно чисті препарати, смороду фізіологічні и Безпечні за своєю дією для тварин [64].

Потреба у пробіотіках Досить висока. ВРАХОВУЮЧИ несприятливим екологічну сітуацію в Україні, а такоже рівень Загальної захворюваності понад 72 - 86% населення України, особливо дітей, повінні НЕ менше як двічі на рік Проводити курс пробіотікотерапії чи пробіотікопрофілактіку.

На сегодня пробіотічні препарати в Україні віробляють Досить мало підприємств. Серед них Одеське підприємство з виробництва імунобіологічніх препаратів, Київське підприємство з виробництва бактерійніх препаратів "Біофарма", Харківське Орендне підприємство "Біолік". Це Такі препарати, як біфідобактерін, лактобактерин, біфікол. На превеликий жаль технологія виготовлення флаконів лікарськіх форм пробіотиків, что вікорістовується Українськими виробника, настолько несучасна, что Говорити про забезпечення населення України вітчізнянімі пробіотікамі ніні Неможливо. Підході до технології виробництва, что існують в Україні (Відсутність порошкоподібніх форм) НЕ дозволяють вірішіті питання повноцінного широкого профілактічного! Застосування пробіотиків на цівілізованому Рівні.

Вінятком є ​​деякі молокозаводи, что віробляють кісломолочні суміші з включенням біфідобактерій. Слід розробляті препарати пробіотиків, збагачені компонентами, Які спріяють кращій проліферації и адсорбції біфідо- и лактобактерій (лактулоза, вітаміни, харчові и Синтетичні волокна). Необходимо розшірюваті спектр кисломолочних харчових продуктів.

Отже, в сучасний период! Застосування пробіотиків та пребіотіків, в звязку Із Встановлення позітівної Дії останніх на організм людини, набуває все БІЛЬШОГО Поширення. Значний збільшується Кількість пробіотічніх препаратів, розшірюється спектр їх использование. Часто, однак, Активність пробіотиків в експеріменті та клінічніх условиях НЕ співпадають, что потребує Подальшого збагачення знань відносно способу Дії окремий препаратів, проведення коректний ДОСЛІДЖЕНЬ з метою визначення показів для! Застосування пробіотічніх препаратів.


Розділ 2. Матеріали та методи ДОСЛІДЖЕНЬ

2.1 Матеріали ДОСЛІДЖЕНЬ

Обєктом дослідження були:

- виробничі штами: E.coli M17 (препарат "Колібактерин") та B.cereus IP 5832 ( "Бактисубтил").

Препарат "Колібактерин сухий" (Colibacterinum siccum) представляет собою ліофілізовану мікробну масу живих кишково палічок - штам E.coli М17, виготовлення Київським підпріємством з виробництва бактерійніх препаратів "Біофарма". Віпускається у флаконах. Одна доза містіть 1 * 10 МК.

"Бактисубтил" (Bactisubtil) - шкірний капсула препарату містіть 1млрд. суперечка бактерій культури B.cereus IP 5832. Фірма-виробник Hoechst Marion Roussel.

- колекція свіжевіділеніх та музейних тест-культур (включаючі набір тест-штамів, Які Використовують при контролі антагоністічної актівності пробіотиків: Shigella sonnei 2802, 5063 Shigella flexneri 337, 170; Escherichia coli 157; Proteus vulgaris 177; Proteus mirabilis 24а, 249; Staphylococcus aureus 209): 24 клінічніх штам роду Shigella (Збудник дізентерій); 26 клінічніх штамів - представителей патогенної та умовно патогенної мікрофлорі людини (родів Escherichia, Staphylococcus, Klebsiella, Pseudomonas, Enterobacter, Proteus); 4 колекційні штами (Staphylococcus epidermidis) та 11 музейних штамів, Які були люб`язно надані нам для проведення ДОСЛІДЖЕНЬ Київським науково-досліднім інститутом епідеміології та інфекційніх хвороб ім.Л.В. Громашевського (КНДІЕІХ), за що вісловлюємо вдячність.


2.2 Методи дослідження культурально-біохімічніх властівостей штамів

Дослідження культуральних и ферментативних властівостей штамів продуцентів проводили загальнопрійнятімі методами, вікорістовуючі діференціально-діагностичні середовища (середовище Ендо, Левіна, Плоскірева, Сабуро, КА, Цейсслера).

2.3 Метод визначення антагоністічної актівності мікроорганізмів

Для ОЦІНКИ явіща мікробного антагонізму окремий компонентів та композіцій пробіотічніх продуктів, а такоже офіціальніх препаратів-пробіотиків в условиях in vitro вікорістовувалі відповідні методики [68]. Антагоністічну Активність визначавши по відношенню до патогенних та УПМ з Колекції живих культур лабораторії Загальної мікробіології КНДІЕІХ и до клінічніх ізолятів, віділеніх Із обстеження осіб, вікорістовуючі метод відстроченого антагонізму.

Тест-культури

З метою ОЦІНКИ антагоністічної актівності виробничого штам Використовують тест-культури, Які повінні знаходітісь в S-форме клітінного циклу, володіті типів морфологічнімі, серологічнімі, біохімічнімі властівостямі и вірулентністю, яка візначається для мікробів кішкової групи величиною LD50 при внутрішньочеревному заражені білих мишей; для шигел Флекснера винна буті НЕ более 250 млн МК при зараженні суспензії живих мікроорганізмів в 0.9% розчіні хлориду натрію б або не более 20 млн МК при зараженні в 0.4% голодному агарі; для S. sonnei - НЕ более 50 млн МК при зараженні в 0.9% розчіні хлориду натрію; для штамів Proteus - НЕ более 350 млн МК в 0.9% розчіні хлориду натрію и 30-50 млн МК в 0.4% голодному агарі.

Тест-культури шигел Флекснера и Зонне повінні давати позитивну кератоконюктівну пробу у МОРСЬКИХ свинок.

Тест-культури стафілококу повінні володіті Наступний властівостямі: утворюваті зону гемолізу розміром (3-5) мм через (19 ± 1) годин росту на МПА з 0.5% крови (людини, барана, кроля), розлитої в чашки Петрі шаром (2-3 ) мм; коагулюваті плазму крови кроля на протязі (2 ± 1) годин; віклікаті некроз при підшкірному введенні 200 млн МК добової культури в 0.2 см3 0.9% розчин хлориду натрію кролям вагою (1.5 ± 0.2) кг на протязі 48-72 годин.

Антагоністічну Активність штамів перевірялі до таких музейних штамів як S.flexneri, S.sonnei, ентеропатогенів E. coli, S.aureus, Proteus vulgaris i Proteus mirabilis (стандартних тест-штамів, Які Використовують для контролю антагоністічної актівності пробіотиків) та клінічніх ізолятів. Стандартні тест-штами ідентіфіковані по тестах сучасної класіфікації, ма ють певні Властивості, Які визначаються їх видовими характеристиками.

Виробничі штами повінні володіті скроню антагоністічною актівністю по відношенню до всіх Вказаним тест-культур. Зони відсутності росту тест-культур повінні буті НЕ менше 10 мм.

Музейні культури мікроорганізмів перед Використання актівізувалі Із ліофілізованого стану перенесенням в середовище М`ясо-пептонного бульйону (3-5 мл на одну ампулу), інкубувалі при 37ºС 1-3 доби та после одержаний густої суспензії мікробніх клітін переводили на агарізоване середовище (МПА).

Для визначення антагонізму виробничих штамів вікорістовувалі метод препендікулярніх штріхів на твердому пожівному середовіщі, Сутність которого пролягав в Наступний: на підсушені чашки Петрі Із середовища МПА по діаметру петлею діаметром (3,5 0,5) мм вісівалі штрихом суспензію двохдобової культури пробіотічніх мікроорганізмів в концентрації 1 млрд МК в 1 мл ізотонічного Розчини NaCl. Посіви інкубувалі в термостаті при (37 1) ºС. Через 2 доби перпендикулярно штрихом до отріманої полоси росту відступів на 1-2мм підсіювалі суспензію однодобовіх культур тест-штамів мікроорганізмів в концентрації 10 МК в 1 мл. Досліди проводили в 3-х повторювання. Результати враховувалі через 18год інкубування за величиною зон прігнічення росту тест-штамів (вімірюючі ЦІ зони лінійкою: від дослідженої культури до качана росту тест-культури в мм). Контролем росту тест-культур слугував їх паралельний посів штрихом на чашки Із тім же середовища (МПА) без досліджуваної культури. Позитивним вважаю результат при відстані затримки росту тест-штамів більшій за 7 мм.

У кожному випадка розраховувалі для шкірного тест-штамів Середнє Арифметичний значення затримки росту та его похібку (М m).

2.4 Методи математичної ОБРОБКИ результатів ДОСЛІДЖЕНЬ

Для ОБРОБКИ експериментального матеріалів, отриманий при проведені ДОСЛІДЖЕНЬ, застосовують методи математичної статистики. С помощью математичної статистики можна оцініті відтворюваність АНАЛІЗУ; Встановити величину Випадкове похібок; віключіті результати, Які містять промахи; Встановити правільність отриманий результату; оцініті Надійність результатів ДОСЛІДЖЕНЬ [67].

Важлівою характеристикою Випадкове величин є середньоарифметична значення віпадкової Величини и ее дісперсія.

Середньоарифметичного значення віпадкової Величини дорівнює сумі результатів всех визначення, розділеній на їх Кількість. Если х1, х2, х3, ..., хі, ..., хn означають n результатів визначення будь-якої величини, отже середньоарифметичного з n результатів буде:

(2.4.1)


З Теорії похібок, середньоарифметична є найбільш вірогіднім и Найкращий значеннявеличини, яка візначається.

Дісперсія показує Яким чином групують всі отрімані результати АНАЛІЗУ вокруг середньоарифметичного, тобто характерізує степень розкіду Навколо .

(2.4.2)

Середньоквадратічна похібка окремий вимірювання візначається з Рівняння дісперсії:

(2.4.3)

Інтервал значень, в Який потрапляє вімірювана величина, назівається довірлівім інтервалом.

Вірогідність потрапляння нового результату у довірлівій Інтервал назівається довірліва імовірність, Надійність або коефіцієнт надійності и позначається літерою a.

Найчастіше корістуються величиною надійності a = 0,95, яка означає, что при Великій кількості дослідів 95 результатів на кожні 100 будут мати значення в межах ± 2s.

Пріведені вищє Рівняння стандартного відхилення и дісперсії можна використовуват для характеристики Випадкове похібок, знайденіх при достаточно Великій кількості дослідів (при n® ¥).

Оцінку точності и правільності ДОСЛІДЖЕНЬ проводять за Наступний крітеріямі:

середньоарифметичного значення , Розраховується за (2.4.1);

одінічне відхилення або Відключення окремий визначення від середньоарифметичного:

(2.4.4)

Алгебраїчна сума одінічніх відхілень дорівнює нулю:

(2.4.5)

Дісперсія знайденіх значень х1, х2, ..., хn при n паралельних дослідів візначається:

(2.4.6)

- стандартне відхилення або середньоквадратічна похібка окремий вимірювання:

(2.4.7)

Відносна квадратична похібка, віраж у відсотках від середньоарифметичного значення, назівається коефіцієнтом варіації и позначається літерою u:

(2.4.8)


Дісперсія СЕРЕДНЯ результату при n паралельних дослідів складає n-ну часть початкової дісперсії:

(2.4.9)

Стандартне відхилення Середнє результату (середньоквадратічна похібка СЕРЕДНЯ Арифметичний результату) є позитивне значення кореня квадратного з дісперсії СЕРЕДНЯ результату:

(2.4.10)

Для визначення значення n, при якому значення набліжується до істінного значення а, вводитися нова величина, якові назівають коефіцієнтом Ст'юдента и позначають символом ta:

(2.4.11)

Є таблиця коефіцієнтів, де даються значення ta залежних від коефіцієнта надійності a та числа ступенів свободи k (k = n-1, де n - число дослідів).

Точність результату АНАЛІЗУ при Вибране a візначається величиною відхилення СЕРЕДНЯ результату від істінного (очікуваного) и віражається рівнянням:

(2.4.12)


Довірлівій Інтервал та довірліва вірогідність (Надійність) при Вибране коефіцієнті надійності a опісується рівняннямі:

(2.4.13)

(2.4.14)

Із збільшенням кількості дослідів, точність результатів растет. Коли відоме істінне значення, відносна похібка СЕРЕДНЯ результату (у%) з надійністю a знаходять як відношення:

(Ea: а) 100% (2.4.15)

Відносна похібка СЕРЕДНЯ результату (у%) может буті віраж и за середньоарифметичного значення з цією ж надійністю a:

(Ea: ) 100% (2.4.16)

Виявлення систематичність похібок проводять Шляхом порівняння різниці между середнім значенням величин и ее істіннім значення а з точністю методу ea. Если | -а |> ea, то має місце систематична похібка.


Розділ 3. Експериментальна частина

3.1 культурально-біохімічні Властивості штамів продуцентів

3.1.1 Штам E.coli M 17

Виробничий штам E.coli M17 (О2: К1: Н6) відносіться до виду Escherichia coli, роду Escherichia, трибу Eschericiеaе, родини Enterobacteriaceae. Штам E.coli M17 представляет собою рухомі грамнегатівні Короткі палички з закругленими на кінцях, довжина від 1,5мкм до 4,0 мкм.

Штам E.coli M17- Факультативний аероб, на МПА через (15 3) рік утворює круглі віпуклі S-КОЛОНІЇ 0,3-0,5 см в діаметрі з рівнімі краями, або сухі плоскі R-КОЛОНІЇ з нерівнімі краями. На середовіщі Ендо утворює червоні КОЛОНІЇ з металевих БЛІСКОМ. На МПБ через (3 1) рік відбувається рівномірне помутніння середовища и Утворення облогу, або плівки чи прістіночного кільця. На кров'яному агарі может давати повний гемоліз.

Штам розщеплює з утвореннями кислоти і газу глюкозу, лактозу, манніт, мальтозу, сахарозу; желатин НЕ розжірує; утворює індол.

Оптимальна температура росту штамів E.coli M 17 (37 1) ºС.

Штам E.coli M17 проявляється антагоністічну дію по відношеню до патогенних та УПМ, Які Використовують при контролі пробіотиків.

Показник антагоністічної актівності виробничого штам E.coli M17 по відношенню до тест-штамів шигел Флекснера винен буті НЕ нижчих 60%, а по відношенню до тест-штамів шигел Зонне - НЕ нижчих 30%

3.1.2 Штам B.cereus IP 5832

Виробничий штам B.cereus IP 5832 відносіться до виду Bacillus cereus, роду Bacillus, родини Bacillaceae. Штам представляет собою рухому грампозитивних палички Із закругленими кінцямі, довжина 5-10 мкм и товщина 1-2 мкм. Клітіна- спорангій утворює одну ендоспору. Хемогетеротроф.

Штам B.cereus ІР 5832 - аероб, на МПА утворює білі, тверді, круглі або жовтуватого кольору "розплющені" КОЛОНІЇ з нерівнімі краями; на кров'яному агарі КОЛОНІЇ зерністі, Із широкою зоною гемоліза; на яєчному агарі утворює широку зону преціпітації білого кольору (ефект бактеріальної лецітіназі), зона Швидко зростанні и через декілька діб інкубації охоплює всю поверхню чашки. КОЛОНІЇ, Які виросла на агарі, ма ють характерний восковидную вид. У рідкому пожівному середовіщі баціла утворює білий хлоп`євідній облог, ніжну плівку на поверхні и визиває помутніння бульйону.

Штам володіє скроню протеолітічною актівністю - розріджує желатин в течение 1-4 діб; утворює лецитиназу и ацетілметілкарбінол, розщеплює до кислоти глюкозу и мальтозу, гліцерин, лактозу, галактозу інсулін, дільціт и декстрин.

Температурний оптимум росту 30 ° С, оптимум рН 7 -9,5

Виробничий штам повинен володіті антагоністічною актівністю по відношеню до патогенних та УПМ, Які Використовують при контролі пробіотиків.

3.2 Дослідження антагоністічної актівності пробіотічніх штамів по відношенню до стандартних тест-штамів та клінічніх ізолятів

Пробіотики відіграють позитивну роль у підвіщенні Загальної резістентності організму, а такоже прігнічують УПМ. Антагоністічна дія бактерій обумовлена ​​їх скроню конкурентною здатністю в процесі розмноження, что пояснюється широкою прістосованістю до умов культівування (рН, температурою). Здатність змінюваті рН середовища, продукуваті лізоцім и літічні ферменти являється частина сумарного сертифіката № антагоністічної Дії, яка властіва бацілам, а для ентеробактерій характерне продукування мікроцінів.

Для більш повної характеристики при дослідженні штамів продуцентів, особлива увага булу пріділена їх взаємодії на види УПМ, збудніків Гостра кишково інфекцій.

Для дослідження антагоністічної Дії Було Використано промислові штами B.cereus IP 5832 та E.coli M17. Антагоністічну Активність визначавши у відношені 50 клінічніх ізолятів - представителей родин Enterobacteriaceae, Pseudomonadaceae, Micrococcaceae та музейних тест-культур. Дослідження проводилися разом Із співробітнікамі лабораторії Загальної мікробіології КНДІЕІХ (зав. Лабораторії д.м.н. Поліщук О.І.).

У табліці 3.1 представлено результати ДОСЛІДЖЕНЬ антагоністічної Дії пробіотічніх штамів до стандартних тест-штамів.

Таблиця 3.1. Характеристика антагоністічної актівності штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до музейних тест-культур

Назва

музейних

тест-культур

Кіль-

кість штамів

Зона затримки росту тест-культур, мм

E.coli M17

С.30202

E.coli M17

С.51000

E.coli M17

С.10900

E.coli M17

С.31000

B.cereus IP5832
Escherichia coli 1 15.2 2.0 16.7 2.5 17.5 3.0 10 2.0 15 3.0
Staphylococcus aureus 1 25 1.0 22 1.5 23 2.0 20 1.0 21 2.0
Candida albicans 1 2.8 0.1 2.9 0.2 2.7 0.1 2.8 0.1 3 0.2
P.vulgaris 1 12.0 2.1 14.0 1.0 14.0 2.5 15.0 2.0 13.0 2.0
P.mirabilis 2 10.0 1.0 11.0 2.0 9.0 1.5 10.0 2.5 8.0 2.1
Shigella flexneri 2 15.0 1.5 17.0 2.0 20.0 1.0 18.0 2.0 19.0 1.5
Shigella sonnei 2 17.0 3.0 18.0 2.5 20.0 1.5 18.0 2.0 18.0 2.0

У таблицях 3.2 - 3.8 представлено результати ДОСЛІДЖЕНЬ з наведенням только тих клінічніх штамів, Які виявляв Активність по відношенню до питань комерційної торгівлі тест-культур.


Таблиця 3.2. Характеристика антагоністічної актівності штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до клінічніх тест-культур Escherichia coli

Культура - антагоніст Зона затримки росту тест-культур, мм
КЛІНІЧНІ штам
Escherichia coli 227/1 Escherichia coli 1705 Escherichia coli 3394 Escherichia coli 5873

E.coli

( "Колібактерин") С30202

9.0 1.0 11.0 2.0 13.0 3.0 9.0 2.5

E.coli

( "Колібактерин") С51000

11.0 1.5 12.5 2.5 9.0 2.5 12.5 2.0

E.coli

( "Колібактерин") С10900

12.5 2.0 9.0 1.5 13.5 1.5 9.5 1.0

E.coli

( "Колібактерин") С31000

9.0 2.5

11.5 1.0

10.0 1.0

9.0 1.5

B.cereus IP 5832

( "Бактисубтил")

9.0 1.0 10.0 2.0 11.0 1.0 10.5 2.0

Таблиця 3.3. Характеристика антагоністічної актівності штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до клінічніх тест-культур Staphylococcus aureus

Культура - антагоніст Зона затримки росту тест-культур, мм
КЛІНІЧНІ штам

Staphylococcus

aureus 0440

Staphylococcus

aureus 1506

Staphylococcus

aureus 1661

Staphylococcus

epidermidis одна тисяча дев'яносто шість

E.coli

( "Колібактерин") С30202

21.0 2.0 23.0 2.5 20.0 1.0 22.5 1.0

E.coli

( "Колібактерин") С51000

22.0 2.5 21.5 2.0 19.0 3.0 20.5 2.0

E.coli

( "Колібактерин") С10900

19.5 1.5 22.5 2.5 18.0 1.5 19.0 2.5

E.coli

( "Колібактерин") С31000

20.0 1.0 21.0 1.5 17.5 1.5 23.0 1.5

B.cereus IP 5832

( "Бактисубтил")

19.0 2.0 20.0 2.0 21.5 2.5 22.5 3.0

Таблиця 3.4. Характеристика антагоністічної актівності штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до клінічніх тест-культур Klebsiella

Культура -антагоніст Зона затримки росту тест-культур, мм
КЛІНІЧНІ штам

Klebsiella

oxytoca144

Klebsiella

pneumoniae тисячі чотиреста шістьдесят-два

Klebsiella

pneumoniae 0362

Klebsiella

oxytoca 401

E.coli

( "Колібактерин") С30202

12.0 2.0 10.0 2.0 11.0 2.5 10.5 2.0

E.coli

( "Колібактерин") С51000

12.5 1.5 11.5 2.5 11.0 1.0 11.5 2.0

E.coli

( "Колібактерин") С10900

13.0 2.0 12.0 2.0 10.5 1.0 12.5 1.5

E.coli

( "Колібактерин") С31000

11.0 2.0 12.5 1.5 11.5 2.0 12.0 1.0

B.cereus IP 5832

( "Бактисубтил")

10.0 1.0 11.0 1.5 12.0 2.0 12.0 1.5

Таблиця 3.5. Характеристика антагоністічної актівності штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до клінічніх тест-культур Pseudomonas aeruginosa

Культура - антагоніст Зона затримки росту тест-культур, мм
КЛІНІЧНІ штам

Pseudomonas

aeruginosa 1578

Pseudomonas

aeruginosa 433

Pseudomonas

aeruginosa тисячі сімсот сорок чотири

Pseudomonas

aeruginosa 7/1

E.coli

( "Колібактерин") С30202

8.0 2.0 7.5 1.0 6.0 2.0 7.5 1.0

E.coli

( "Колібактерин") С51000

7.5 2.5 7.0 2.0 6.5 1.5 6.0 2.5

E.coli

( "Колібактерин") С10900

6.0 1.0 8.0 1.5 6.5 2.0 5.0 3.0

E.coli

( "Колібактерин") С31000

6.5 1.5 6.0 1.0 5.5 2.0 6.0 1.5

B.cereus IP 5832

( "Бактисубтил")

7.0 2.0 7.5 1.0 6.5 1.5 7.0 1.0

Таблиця 3.6. Характеристика антагоністічної актівності штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до клінічніх тест-культур Enterobacter

Культура - антагоніст Зона затримки росту тест-культур, мм
КЛІНІЧНІ штам

Enterobacter

cloacae 405'

Enterobacter

cloacae 0361

Enterobacter

aerogenes 3112

Enterobacter

cloacae 5797

E.coli

( "Колібактерин") С30202

14.0 1.0 13.0 1.0 14.5 1.5 12.5 1.0

E.coli

( "Колібактерин") С51000

13.0 2.0 13.0 1.5 12.0 2.0 12.5 2.0

E.coli

( "Колібактерин") С10900

8.0 1.5 7.0 2.0 8.5 1.0 8.0 2.5

E.coli

( "Колібактерин") С31000

12.0 1.0 11.0 3.0 12.5 2.5 11.0 1.0

B.cereus IP 5832

( "Бактисубтил")

15.0 2.0 13.0 2.0 15.0 1.0 15.5 2.0

Таблиця 3.7. Характеристика антагоністічної актівності штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до клінічніх тест-культур Proteus

Культура - антагоніст Зона затримки росту тест-культур, мм
КЛІНІЧНІ штам

Proteus

mirabilis

1204

Proteus

mirabilis

358

Proteus

mirabilis

2048

Proteus

vulgaris.

6349

Proteus

vulgaris.

200E

Proteus

vulgaris.

1 589

E.coli

( "Колібактерин")

С30202

5.0 1.0 6.0 1.0 8. 1.0 7.0 1.5 6.0 1.0 6.0 2.0

E.coli

( "Колібактерин") С51000

6.0 2.0 7.0 1.5 7. 1.0 6.0 2.0 5.0 2.0 5.0 2.0

E.coli

( "Колібактерин") С10900

7.0 1.0 5.0 2.0 7.0 1.0 8.0 2.0 6.0 2.0 7.0 1.5

E.coli

( "Колібактерин") С31000

6.0 1.5 6.0 1.0 6.0 1.0 7.0 1.5 7.0 1.5 5.0 1.5

B.cereus IP 5832

( "Бактисубтил")

5.0 1.0 5.0 1.0 6.0 1.5 7.0 1.0 6.0 2.0 5.0 1.0

Таблиця 3.8. Характеристика антагоністічної актівності штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до колекційніх тест-культур

Культура - антагоніст Зона затримки росту тест-культур, мм
Колекційні штам Музейні штам
S.epiderm. 4005

S.epiderm.

Б / №

S.epiderm.

№4

S.epiderm.

42a

E.coli

055

E.coli

145

E.coli

( "Колібактерин") С30202

9.0 1.5 8.0 1.5 7.0 2.0 6.0 2.0 6.0 1.5 8.0 2.0

E.coli

( "Колібактерин") С51000

10.0 2.0 8.0 1.0 6.0 1.5 7.0 1.5 5.0 2.0 6.0 2.0

E.coli

( "Колібактерин") С10900

8.0 2.0 7.0 2.0 8.0 1.5 9.0 2.0 5.0 1.0 7.0 1.5

E.coli

( "Колібактерин") С31000

10.0 1.0 11.0 1.0 11.0 2.0 10.0 2.5 6.0 1.5 7.0 2.0

B.cereus IP 5832

( "Бактисубтил")

7.0 1.0 6.0 1.5 7.0 2.0 8.0 1.5 4.0 1.5 5.0 1.5

Розділ 4. Обговорення результатів

Представлені результати свідчать про помірну антагоністічну Активність in vitro дослідженіх виробничих штамів.

Антагоністічна Активність пробіотічніх препаратів "Колібактерин" та "Бактисубтил" по відношенню до музейних культур (стандартних тест-штамів) практично НЕ відрізнялась между собою. Найбільш скроню Активність E.coli M17 та B.cereus IP 5832, Які входять до складу препаратів, спостерігалі у відношені до музейних штамів шигел, стафілококів та протеїв (зони затримки росту ціх мікроорганізмів Складанний 15-20 и более мм). Менш вираженість булу Активність по відношенню до патогенної кішкової палички (зони затримки росту ціх мікроорганізмів склалось 10-15 мм).

На підставі АНАЛІЗУ, что уявлень в табліці 3.1., Можна сделать Висновок про ті, что тест-культури Candida albicans, як обов`язкових тест-мікроорганізм має мінімальне прігнічення росту. З Нашої точки зору це обумовлено філогенетічною стійкістю цієї культури до природних антібіотічніх чінніків, а такоже малою швідкістю зростання самого мікроорганізму.

Бактеріальні тест-культури найбільш вразліві до Дії Речовини антібіотічної Дії, что віділяються пробіотікамі. Найбільш стійкімі до впліву антібіотічніх Речовини колібактерину є культури роду Proteus, Які ма ють мінімальні зони затримки росту 5 - 7 мм, но явно віражах приглушення роїння (рис 4.1).

Таким чином, можна Говорити, что пробіотічні препарати на основе промислових штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832, віявляють Досить широкий спектр антагоністічної актівності по відношенню до музейних штамів бактерій.

Продовжуючи аналіз ДОСЛІДЖЕНЬ, чи можемо засвідчіті, что для готових лікарськіх форм наблюдается відмінність в антагоністічній актівності готових лікарськіх форм, что пройшли ВТК. Так для колібактерину Серії 31000 наблюдается суттєва зміна, что может буті пов`язана Із зміною умов зберігання, або порушеннях технологічного процесса. Такий порівняльній аналіз є обов`язкових для ОЦІНКИ ефектівності готових лікарськіх ЗАСОБІВ в контрольних лабораторіях МОЗ.

З метою дослідження, хоча б опосередковано, Дії пробіотічніх препаратів в організмі людини, Вивчай антагоністічну Активність препаратів на свіжевіділені КЛІНІЧНІ штам різніх родів (ентеробактерій, стафілококів), отриманий при Обстеження дорослих Хворов на туберкульоз та пієлонефрит.

Було Використано 24 клінічніх штам роду Shigella (S.flexneri - звичайний Збудник епідемій дізентерії та гастроентериту у дітей; S.sonnei - Збудник легкої форми дізентерії та літньої діареї у дітей); 26 клінічніх штамів - представителей патогенної та умовно патогенної мікрофлорі людини (E.coli - Збудник урогенітальніх інфекцій та діареї у дітей; S.aureus - визиває фурункульоз, остеоміеліт, нагноювання ран та харчові Отруєння; K.pneumoniae, К.oxytoca - являються Збудник госпітальніх пневмоній, бактеріємії, інфекції сечовидільних Шляхів, а такоже епідемічніх діарей у новонароджених; P.aeruginosa - один Із основних збудніків локальних та системних гнійно-запальних процесів, особливо в условиях стаціонарів; E.cloacae - Збудник Гостра шлунково-кишково захворюв ань; P.mirabilis, Р.vulgaris - визивають інфекцію сечовидільних Шляхів у людини, а такоже Вторинні септічні враження у паціентів Із опікамі та после хірургічніх втручань); 4 колекційні штами (Staphylococcus epidermidis).

Активність препаратів "Колібактерин" та "Бактисубтил" до клінічніх штамів, в цілому, булу нижчих в порівнянні з дією на Музейні штам.

Як видно Із представлених в табл. 3.2 - 3.7 Даних виробничі штами E.coliM17 та B.cereus IP 5832 характеризуються вираженість антагоністічною актівністю по відношенню до клінічніх штамів стафілококів, ентеробактерів та кишково палічок. Слід відмітіті, что штам B.cereus IP 5832 проявляє більш вираженість антагоністічну Активність до клінічніх ізолятів роду Enterobacter (зони затримки росту штамів становили 8 - 15 мм), в порівнянні Із штам E.coli M17 (Рис 4.2). Найбільш віражах Активність пробіотічніх штамів булу відмічена до штамів роду Staphylococcus (Рис 4.3). Зони затримки росту стафілококів коліваліся в межах 20 - 25 мм. Для клінічніх штамів родів Escherichia та Klebsiella зони затримки росту Складанний 9 - 12 мм (Рис 4.4 та 4.5). Ще Менш віражах Активність булу у штамів роду Pseudomonas, зони затримки росту становили 6 - 8 мм (Рис 4.6). До клінічніх штамів роду Shigella (Збудник дізентерії) булу відмічена дуже низька антагоністічна дія.

Підсумовуючі представлені in vitro результати ДОСЛІДЖЕНЬ, можна заключіті, что промислові штами, Які Використовують як основа для пробіотічніх препаратів, ма ють Досить скроню антагоністічну Активність по відношенню до широкого спектру музейних тест-штамів мікроорганізмів и Дещо менше за відношенню до клінічніх штамів.

Рис 4.1. Характеристика антагоністічної актівності культур E.coli M-17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до клінічніх та стандартних тест-штамів Proteus


Рис 4.2. Характеристика антагоністічної актівності виробничих культур E.coli M17 та B.cereus IP5832 по відношенню до клінічніх штамів E.cloacae

Рис 4.3. Характеристика антагоністічної актівності виробничих культур E.coli M17 та B.cereus IP5832 по відношенню до клінічніх та стандартних тест-штамів S.aureus


Рис 4.4. Характеристика антагоністічної актівності штамів E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по відношеню до клінічніх та стандартних тест-культур E.coli

Рис 4.5. Характеристика антагоністічної актівності виробничих культур E.coli M17 та B.cereus IP5832 по відношенню до клінічніх штамів K.oxytoca та K.pneumoniae


Висновки

1. Проведення аналіз сучасного стану розробок пробіотічніх лікарськіх ЗАСОБІВ.

Сістематізовані Відомості про види пробіотиків и їх использование з ціллю нормалізації мікробного ценозу організму людини.

Досліджено антагоністічну Активність СУЧАСНИХ пробіотічніх препаратів "Колібактерин" та "Бактисубтил", основою якіх є виробничі штами E.coli M17 та B.cereus IP 5832. Антагонізм визначавши по відношенню до 65 штамів патогенних та умовно патогенних мікроорганізмів (родів Escherichia, Staphylococcus, Klebsiella, Pseudomonas, Enterobacter, Proteus).

Встановлен, что дані препарати характеризуються чітко вираженій антагоністічною дією относительно стандартних тест-штамів (Shigella sonnei 2802, 5063; Shigella flexneri 337, 170; Escherichia coli 157; Proteus vulgaris 177; Proteus mirabilis 24а, 249; Staphylococcus aureus 209) та менше антагоністічною дією до клінічніх штамів патогенних та умовно-патогенних мікроорганізмів.


Список використаної літератури

1. Шендеров Б.А. Медична мікробна екологія та функціональне харчування. Том 1: Мікрофлора людини і тварин і її функції. М .: Грант, 1998..

2. Мечников І.І. Етюди про природу людини. - М .: Наук. слово, 1903. - 173 с.

3. Мечников І.І. Етюди оптимізму. - 1907. - 350 с.

4. Барановський А.Ю., Кондрашина Е.А. Дисбактеріоз і дисбіоз кишечника. - Санкт-Петребург і ін., 2000. - 209 с.

5. Біологічні властивості аерококів-антагоністів - представників мікробіоценозів людини / Г.Н.Кременчуцкій, М.Л.Горбунова, Л.Г. Юргель і ін .// Микробиол. журнал 1994.- Т.56, № 4.- С.36-42.

6. Лізько М.М., Шилов В.І. Сучасні уявлення про стан кишкової мікрофлори у здорових дорослих людей // Журн. мікробіології, епідеміології і імунології.- 1979.- №4.-С. 36-41.

7.Коршунов В.М., Смирнов В.В., Єфімов Б.А. Раціональні підходи до проблеми корекції мікрофлори кишечника // Вести Ріс. МАН. - 1996.- № 2. - С. 60-65.

8. Лебедєва М.М., Гончарова Г.І., Лізько М.М. Сучасні аспекти норми і патології кишкової мікрофлори // Журн. мікробіології, епідеміології і імунології.- 1974.- №9.-С. 36-41.

9. Перспективи! Застосування біологічних бактерійніх препаратів для корекції порушених мікробіоценозу кишечнику / О.А.Журіло, Г.І.Барбова, Н.М.Недлінська // Український хіміотерапевтічній журнал 1999.- № 2.- С. 43-50.

10. Перетц Л.Г. Мікрофлора людського тіла. В кн .: Багатотомне керівництво по мікробіології, клініці і епідеміології інфекційних болезней.- М .: Медгіз.- 1962.- т.1.- С.659-671.

11. Бактеріологічна діагностика дисбактеріозів кишечника: Методичні рекомендації / Р.Б.Епштейн-Литвак, Ф.Л.Вільшанская.- М., 1969.- 29с.

12. Чебуркін О.В. Гнотобіологія як наука про мікрофлору організму людини // Вісник сільгосп. наук.- 1984.- № 8.- С. 116-123.

13. Дисбактеріоз кишечника (на допомогу практичному лікарю) / А.І. Парфьонов, Ю.К. Калоєв, С.А.Сафронова, Н.Г.Федотова // Український медичний часопіс.- 1998.- №3 (5) .- V / VI.- С.65-70.

14. Нісевіч Н.І., Гаспарян М.О., Новокшонов А.А. до питання про дисбактеріозі кишечника у дітей // Педіатрія.- 1999.- № 1.- С. 98-101.

15. Парфьонов А.І. Мікробна флора кишечника і дисбактеріоз // Рус. мед. журн.-1998.- Т.6, № 18.- С.1170-1173.

16. Румянцев В.Г. Дисбактеріоз кишечника: клінічне значення і приципи лікування // Ріс. журн. гастроентерол., гепатол., колопроктл.- 1999.- Т.9, № 3.- С.61-63.

17. Красонголовец В.Н. Дисбактеріоз кішечніка.- М .: Медицина, 1989.- 207с.

18. Бабак О.Я., Кушнір І.Е. Сучасна діагностика і лікування порушення мікробіоценозів кишечника // Провізор. - 1999.- № 15-16.- С.91-93.

19. Бабак О.Я., Кушнір І.Е. Сучасна фармакотерапія дісбактеріоза кишечника. // Метод. рекомендації / Ін-т терапії АМНУ. - Москва; Харків, 1999. - 28 с.

20. Панчишина А.І., Олійник С.Ф. Дисбактеріоз кішечніка.- К .: Здоров`я, 1983.-116с.

21. Мікробіологічна діаностіка дисбактериозов: Методичні рекомендації / В.А.Знаменскій, Н.В.Дегтяр, С.Н.Кузьмінскій и др Київ.- 1986.- 27с.

22. Козько В.Н. Еубіоз, дисбактеріоз, пробіотики // Лікування та діагностика. - 2001. - №2. - С. 21-27.

23. Петровська В.Г., Марко О.П. Мікрофлора людини в нормі та патології. - М .: Медицина, 1976. - 144 с.

24. Шевельова С.А. Прибуток, пробіотики і пробіот. продукти. Сучасний стан питання // Питання харчування 1099.- № 2.- С. 32-39.

25. Андрейчин М.А. Досягнення в терапії бактерійніх діарей и шляхи ее оптімізації // Інфекційні хворобі.-2000.- №1.- С.5-11.

26. Сучасні уявлення про механізми лікувально-профілактичної дії пробіотиків із бактерій роду Bacillus / В.В.Смірнов, С.Р.Резнік, В.А.Вьюніцкая і ін. // Микробиол. журн.- 1993.-Т.55, № 3.- С. 92-102.

27. Захарова І.Я., Павлова І.М. Литические ферменти мікроорганізмів. - Київ: Нак. думка, 1985.- 216 с.

28. Квасніков Є.І., Нестеренко О.А. Молочнокислі бактерії та шляхи їх використання. - М .: Наука, 1975. - 388 с.

29. Квасніков Є.І., Шишлевська Т.Н., Коваленко Н.К. Антагоністична активність молочнокислих бактерій по відношенню до збудників кишкових захворювань домашніх птахів. // Микробиол. журнал. - 1983. -Т. 45, № 5.- С. 27-32.

30. Бифидобактерии і їх використання в клініці, медичної промисловості і сільському господарстві. Зб. наук. праць Моск. НДІ епідеміології та мікробіологіі.- М .: 1986.- 208с.

31. Грігор`єв О.В. Пробіотики України: Збережемо генофонд. // Ліки України. - 1999. - №4. - С. 4-8.

32. Лихачова А.Ю., Бондаренко В.М., Соколова К.Я. Сучасний стан питання таксономії бактерій роду Lactobacillus // Журн. мікробіології, епідеміології і імунології.- 1992.- №9-10.-С.74-78.

33. Чернишова Н.А .. Мельникова К.І., Френкель М.П. Досвід застосування сухого біфідумбактерину у новонароджених груп ризику з метою профілактики гострих кишкових інфекцій // Журн. мікробіології, епідеміології і імунології.- 1994.- № 2.- С.37-39.

34. Коваленко Н.К., Підгірський В.С. Прибуток на підставі молочнокислих бактерій // Микробиол. журнал 1994.- Т № 1.

35. Цой І.Г., Сапаров А.С ,, Тимофєєва І.К. Імуностимулюючу дію лактобактерій на цитотоксичність природних кілерів і продукцію інтерферону // Журн. мікробіології, епідеміології і імунології.- 1994.- № 6.- С.112-113.

36. Тюрін М.В., Шендеров Б.А., Рахімова Н.Г., Поспєлова В.В., Лагода І.В. До механізму антагоністичної активності лактобацил // Журн. микробиол., епідемол. і іммунол. - 1989. - № 2. - С. 3-8.

37. Шендеров Б.А. Нормальна мікрофлора і її роль у підтримці здоров'я людини // Ріс. журн. гастроентерорл., гепатології, колонпроктол. - 1999. - № 1. - С. 61-65.

38. Коваленко Н.К. Молочнокіслі бактерії в кишково тракті тутового шовкопряду // Мікробіол. журнал - 1970. -Т. 32, № 6. - С.297-300.

39. Далін М.В., Фіш Н.Г. Адгезини мікроорганізмів. // Підсумки науки і техніки. Мікробіолог. - 1985. - Т. 16. - С. 3-98.

40. Корольов Н.П. Функції пектинів в клітинах // Підсумки науки і техніки / ВІНІТІ. Загальні проблеми фізико-хімічної біології. - М. 1984. - т.1.- 351 с.

41. Маркова Т.П., Чувіров Д.Г. Механізм дії бактерійних імуномодуляторів // Україн. Медічі. часопис. - 1998 - №6 / 8. - С. 27-32.

42. Нуріддінова Н.Р., Сіняшін Н.І. Вивчення імуномодулюючої дії позаклітинних субстратів біфідо-і лактобактерій // В кн .: Мікробіологія, імунологія, епідеміологія, профілактика інфекційних заболеваній.- Ташкент, 1991.- С.95-97.

43. Сорокулова І.Б. Вплив пробіотиків з бацил на функціональну активність макрофагів // Антибіотики і хіміотерапія.- 1998.-т.43, № 2.- С.20-23.

44. Матеріал підготовлено Представництвом фірми "Меркле" в Україні. ! Застосування препарату «Хілак» при дісбактеріозі кишечника // 1999. - № 8.

45. Про деякі механізми виникнення безсимптомної бкатеріеміі / В.В.Смірнов, С.Р.Резнік, І.Б. Сорокулова, В.А.Вьюніцкая // Микробиол. журн.- 1998.-Т.50, № 5.- С. 56-59.

46. ​​Смирнов В.В., Резник С.Р., Сорокулова І.Б. Високоеффектівні біологічний препарат біоспорин // Врачеб. справа.- 1993.- № 5-6.- С. 133-138.

47. Смирнов В.В., Резник С.Р., Сорокулова І.Б., В'юницька В.А. Дискусійні питання створення і застосування бактеріальних препаратів для кореляції мікрофлори теплокровних // Микробиол. журнал. - 1992. - Т.54, № 6. - С. 82-94

48. Амбарцумян К.Ф., Саркісян Б.Г., Елоян Д.В. Дія культуральной молочної суміші "Наріне" на кишкову мікрофлору при функціональних і запальних ураженнях товстої кишки // Клин. мед. М., - 1989.- Т.67, № 7.- С.72-74.

49. Богданов І.Г. Вивчення протипухлинної дії антибіотиків ЛБ-51 на саркомі 180 Крокера // Шляхи і методи дослідження протиракових антибіотиків. М .: Медгиз., 1959. - С. 198-199.

50. Богданов І.Г., Величков В.Т., Далев П.Г. та ін. Протипухлинна дія глікопептидів клітинної стінки L.Bulgaricus // Бюлл. експери. біол. і мед. - 1977. - Т.84, № 12. - С. 709-712.

51. Бондаренко В.М., Рубакова Е.І., Лаврова В.А. Імуностимулюючу дію лактобактерій, які використовуються в якості основи препаратів пробіотиків. // Микробиол. журн. - 1998. - № 5. - С.107-112.

52. Смирнов В.В. Сорокулова І.Б., Пінчук І.В. Бактерії роду Bacillus -перспектівний джерело біологічно активних речовин // Мікробіол. журн. - 2001- Т. 63, № 1. - С.72-79.

53. Смірнов В.В., Косюк І.В. Адгезівні Властивості бактерій роду Bacillus - компонентів пробіотика // Мікробіол. журнал. - 1997. - Т.59, № 6. - С. 36-43.

54. Сорокулова І.Б. Перспективи застосування бактерій роду Bacillus для конструювання нових біопрепаратів // Антібіоткікі і хіміотерапія. - 1996. - т.41, № 10. - С. 13-15.

55. Коршунов В.М. Проблема регуляції мікрофлори кишечника. // Журнал микробиол. - 1995. - № 3.

56. Слабостіцкая А.Т., Кришовская С.С., Резник С.Р. Ферментативна активність бацил, перспективних для включення до складу біопрепаратів // Микробиол. журнал. - 1990. - Т.52, № 2. - С. 9-14.

57. Смирнов В.В., Слабостіцкая А.Т., Кримовская С.С., Резник С.Р. Ліполітичних активність спорообразующх бактерій // Микробиол. журнал. - 1988. - Т.50, № 2. - С. 6-12.

58. Смирнов В.В., Коваленко Н.К, Підгірський В.С., Сорокулова І.Б. Прибуток на основі живих культур мікроорганізмів // Мікробіол. журн. - 2002 Т.64, № 4. - С.62-80.

59. Дрозд Т.Є., Кременчуцький Г.М., Горбунова М.Л. Стимулюючий вплив Aerococus viridans на фагоцити і антителообразование. // Журнал микробиол., Єпідеміол. і імунолог. - 1994. - № 6. - С. 11-12.

60. Дубінін Н.П. Загальна генетика. - М. Наука. - 1976. - с. 306-307.

61. Міршунова Н.В., Кіржаев Ф.С. Сучасне уявлення про роль нормальної мікрофлори травного тракту // Ветеринарія. - 1993. - № 6. - С. 30-33.

62. Калачнюк Г.І., Копча Я. та ін. Стимуляція рубцового травлення і пробіотики // Біологічні основи високої продуктивності тварин: Тези. доп. міжнар. конф. Боровськ. 3-7 вересня 1990. - Боровськ 1990.- Ч.2. - С. 118-119.

63. Калачнюк Г.І. Пробіотики у тваринництві. // Тваринництво України. - 1996.-№ 5. - С. 16-18.

64. Антипов В.А. Використання пробіотиків у тваринництві. // Ветеринарія. - 1991. - № 4. - С. 55-58.

65. Григоров Ю.Г., Коркушко О.В., Селисько Т.М. і ін. Вплив нового кисломолочного продукту "Лакгеровіт" на показники здоров'я людей старших вікових груп // Проблеми старіння і довголіття. - 1994. - № 4. - С. 105-113.

66. Підгорській В.С., Коваленко Н.К., Мацюк В.М. Пробіотики, створені на основе молочнокислих бактерій для ПРОФІЛАКТИКИ та лікування шлунково-кишково хвороб молодняку ​​сільськогосподарських тварин // Матеріали наук. конф. "Актуальні питання ветеринар. Медичного.", Київ, 1995. - С. 31-33.

67. Ашмарин І.П., Воробйов А. А. Статистичні методи в мікробіологічних дослідженнях. - Л .: Медгиз, 1962. - 140с.

68. Біргер М.О. Довідник за мікробіологічними та вирусологическим методам визначення. - Л .: Медгиз, 1982.- с.

69. Pharmindex. Лікарські засоби. - 1997.- с.475.



Скачати 166.16 Kb.